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Analises clinicas AV2 Imunologia clinica Testes de quantificação dos anticorpos: Teste qualitativo: Tem ou não tem o anticorpo Teste quantitativo: Analisa e diz a quantidade de anticorpo do paciente. Hematopoese: Células de defesa. Tipos de resposta: Inata: Células fagocíticas (inespecífica) > neutrófilos, macrófagos. Reconhecimento através dos receptores [germinativos] de membrana. Adaptativa: Linfócito B e Linfócito B (células evoluídas e especificas). Reconhecimento por mecanismo genéticos, através do MHC, e HLA é o gene mais importante (seleção e ativação de linfócitos). [um linfocito pra cada antigeno] Técnicas: Visualização direta no microscópio. Quantificação de anticorpos específicos do antígeno. TCD8: Citotoxica (imunidade celularativado a partir de grânulos toxicos) TCD4: TH1: Auxilia o macrófago a fazer a fagocitose./TH2: Ativa a célula B a produzir anticorpos. Função de anticorpos: Neutralizar, levar o agente infectante para o macrófago [opsonização] e ativação do sistema complemento. Classe Imunoglobulinas: IgG (séricas): IgM (séricas): IgE (alérgicas): Mastocito. IgA (mucosa): Escolher o kit, pegar o antigeno e pingar anticorpo. Trabalho com SORO = Parte liquida do sangue sem anticoagulante. Reações de aglutinação: Soro + antígeno = Rodar 5 minutos. Analisar a formação de grumos. Se houver, tem anticorpo. Se não formou, amostra é negativa. Dosagem de anticorpo: Diluição seriada (nos poços, colocar o anticorpo e a amostra do paciente. Depois, colocar salina + poço 1, e colocr no próximo poço a alíquota do poço anterior. Olhar ate a onde se formou grumos) Sifilis: Teste VDRL > Proteína análoga ao trocomonas. Analisar se houve a formação de grumos. Exame de antiaglutinação: Sangue B, tem anticorpo anti A. Teste complementar[RH] (produção de anticorpos se entrar em contato com um rh diferente do seu): CUMBS. ABO: Tem dominância genética. Anticorpo passa pela placenta e pega as hemácias que geral eristroblastose fetal. Teste de CUMBS. Direto: Faz o teste no sangue da criança (O reagente de cumbs se liga ao anticorpo) Indireto: Faz o teste na mãe (Coloca o sangue da mãe no tubo com um sangue diferente do dela, e depois coloca com o reagente de CUMBS). Método de Elisa (principio colorimétrico): Ligação antígeno anticorpo através de ligação covalente, e lava. Depois coloca cromógeno e nas amostras positivas, ao lavar, a ligação não é desfeita. Beta HCG: Se o resultado foi azul muito claro, pode ser um erro de pipetagem ou pede para refazer na próxima semana. HIV: Primeiro teste > Eliza. Visualização de – tamanho de – partícula viral. Blotting ver A proteína. Caso clinico Amostra com suspeite de siris chega ao laboratório, o que você faz? Faz o VDRL (exame de aglutinação). Chega no laboratório a amostra com rubéola. Qual o procedimento? Dosagem de IgG e IgM especifica pra rubéola na elisa. Dosagem de toxoplasmose: Dosagem de IgM e IgG e/ou analise direta. Diagnostico de denge: Dosagem de IgM e IgG (comprovar infecção) e hemograma (para gravidade) Mononucleose: Dosagem de IgE e analise se há linfócito atípico. Chagas: IgM e IgG e visualização direta do parasita. HIV: Elisa e depois Blooting. Hepatite: TGO/TGP, fosfatase alcalina, bilirrubina, Gama GT e depois sorologia especifica como IgM e IgG. Resumo: Utilização das técnicas de aglutinação, Elisa e Blooting. O resto é por detecção de anticorpos. Hematologia clinica. Contagem de células diferenciais. Leucograma: Como se faz, identifica as células e Interpretação. Função e reconhecimento de: Linfocito: Neutrofilo: Basofilo: Eosinofilo: Manocito: Hemograma é um coadjuvante para direcionar para fechar laudo. Controle dos níveis de infecção por HIV: Hemograma é feito mensalmente para acompanhar a evolução da terapia. Coleta de sangue, vai para o laboratório e o aparelho que le. Depois, faz a extensão e vai para microscópio somente as laminas que apresentam erro discrepante (obrigatório: Idoso/Recém-nascido) Hemograma não precisa de jejum (colhe com anticoagulante – EDTA) Princípio da máquina: Contagem por impedância, tamanho Vs granulosidade (o laser passa pela célula e emite e refração especifica). FLAG: Erro da maquina. DotPlot: Numero de células X Fl. Picos: 50 a 100: Linfocitos. 100 a 250: Monocito 250 a 400: Granulocitos Linfocitose: hemograma com número elevado de linfócito. Qual linfócito este alto? O LOT ou LOB? Faz-se imunomarcação. Princípio de Cells sorting: Se a célula com o anticorpo especifico absorve a luz verde, ela vai para outro recipiente. As que não absorvem, vão para outro tubo, e no final o equipamento conta as células de cada recipiente. Máquina não conta blastos e nem linfócitos atípicos. (Neutrófilo segmentado) Linhas de maturação: Mielocito Metamielocito Bastão SegmentadoOrdem de grandeza do que pode ser encontrado. Linfocito Monocito Conta 100 células e dá o diagnóstico do tipo celular que foi encontrado em maior número. Valor de referencia: Leucócitos: 4.000 a 11.000 Neutrofilos: Monocito: Tipo de resposta: Linfocito: Especificidade (anticorpo). Monocito: Linha primaria (inespecífica) Neutrofilo: Inespecífico. Neutrofilia: Infecção bacteriana (Fagocitose). Linfocitose: Virus (TCD4, TCD8, L0T, L0B). LLC: Pesquisa do cromossomo filhadelphia. Hemograma: Noção da evolução da doença. Diagnostico – rápido – de verminose: Dosagem de IgM e IgG, ou IgE.
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