Aula 1- Técnicas e formas celulares

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14/3/2014
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HISTOLOGIA
Introdução e técnicas
Lenir Orlandi Pereira Silva
Preparação da amostra
1. Fixação
2. Processamento (desidratação, diafanização 
ou clarificação e emblocamento em parafina)
3. Microtomia
4. Colocação em lâminas 
5. Coloração
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Perfusão
Fixação
1. prevenção de autólise e ataque bacteriano
2. preservar a estrutura e composição das 
moléculas dos tecidos
3. permite uma coloração adequada
Aldeídos: paraformaldeído, glutaraldeído
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Ligações cruzadas
Processamento
desidratação, diafanização ou clarificação e emblocamento 
em parafina, ou congelamento
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Microtomia
Montagem dos 
cortes
Secagem dos 
cortes
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Coloração
Hematoxilina e Eosina
Corante ácido
Eosina, floxina
 A parte pigmentada do corante é acida
 O radical ácido é carregado positivamente, portanto 
tem afinidade por estruturas carregadas negativamente, 
as básicas
 Componente acidófilo: parte da célula que tem 
afinidade pelo corante ácido
 O que é corado (róseo)?
 Citoplasma
 fibras colágenas
 a maioria dos filamentos protéicos do citoesqueleto 
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Corante básico
Hematoxilina, azul de metileno, azul de toluidina
 A parte pigmentada do corante é básica
 O radical básico é carregado negativamente, portanto 
tem afinidade por estruturas carregadas positivamente, as 
ácidas
 Componente basófilo: parte da célula que tem afinidade 
pelo corante básico
 O que é corado (roxo)?
 o núcleo e o Retículo Endoplasmático Rugoso
 as proteínas ácidas do citoplasma e algumas substâncias 
extracelulares como os proteoglicanos que contêm na sua 
estrutura glicosaminoglicanos ácidos e/ou sulfatados
Hematoxilina e eosina (HE)
Hematoxilina roxo Corante 
catiônico ou 
básico
(+)
Cora 
estruturas 
ácidas 
(basófilas)
Núcleo
(grupos fosfatos dos 
ácidos nucléicos)
Eosina rosa Corante 
aniônico ou 
ácido
(-)
Cora 
estruturas 
básicas
(acidófilas ou 
eosinófilas)
Citoplasma
(radicais amino das 
proteínas)
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Língua
Técnica de Nissl
• Corpúsculos ou grânulos de 
Nissl
– Retículo endoplasmático rugoso
– Basófilos
• Cresil violeta: colore estruturas 
basófilas
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Impregnação por prata
Técnica de Golgi
Microscopia óptica
(resolução 0,2 m; 
aumento 1000-1500 x)
Lentes: ocular, objetiva e 
condensadora
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Microscopia eletrônica 
(resolução 0,1 nm; aumento 120000 x)
Imunoistoquímica
• Permite identificar moléculas em cortes ou 
camadas de células por meio de anticorpos
Astrócitos 
Hipocampo, proteína glial fibrilar ácida
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Interpretação
Interpretação