RELATORIO BIOQUIMICA CARACTERIZAÇÃO DOS CARBOIDRATOS

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AULA 01 – CARACTERIZAÇÃO DE CARBOIDRATOS 
Título: Caracterização de Carboidratos
Objetivo: 
Ao final da pratica, o aluno devera ser capaz de executar testes para o reconhecimento de carboidratos.
Introdução: 
As biomoléculas mais abundantes da face da Terra são os carboidratos, cada ano a fotossíntese converte mais de 100 bilhões de toneladas de CO2 e H2O em celulose e outros produtos vegetais. Certos carboidratos são a base da dieta na maior parte do mundo e a oxidação dos carboidratos é a principal via metabólica fornecedora de energia na maioria das células não-fotossintéticas. Os carboidratos são poliidroxialdeídos ou poliidroxicetonas ou substâncias que liberam estes compostos por hidrólise. Muitos carboidratos, mas não todos, têm fórmulas empíricas (CH2O)n, alguns também contêm nitrogênio, fósforo ou enxofre. Os carboidratos estão divididos em três classes principais, de acordo com o seu tamanho: monossacarídeos, oligossacarídeos e polissacarídeos. 
Os monossacarídeos consistem de uma única unidade de poliidroxialdeído ou cetona, o mais abundante na natureza é o açúcar com seis átomos de carbono na molécula, a D-glicose, também chamado de dextrose.
Os oligossacarídeos são compostos por cadeias curtas de unidade monossacarídicas, ou resíduos, unidos entre si por ligações características, chamadas ligações glicosídicas. 
Os mais abundantes são os dissacarídeos, formados por duas unidades de monossacarídeos. A sacarose é o representante típico dessa classe. Polímeros que contêm mais de 20 unidades de monossacarídeos são os polissacarídeos e podem ter cadeias contendo centenas ou milhares de unidades monossacarídicas.
Matérias e reagentes:
Tubos de ensaio 
Pipetas graduadas 
Pipetas Pasteur plástica 
Béqueres 
Bico de Bunsen
Banho-maria
Copos plásticos 
Bastão de vidro 
Espátula 
Proveta 
Solução de glicose 1%
Solução de sacarose 1%
Solução de maltose 1%
Solução de amido 1%
Solução de Lugol (iodo a 5% em iodeto de potássio a 10%)
Reagente de Benedict (solução contendo citrato de sódio a 17,3%, carbonato de sódio anidro a 10% e sulfato cúprico penta-hidratado a 1,73%).
Leite, mel, amido de milho, açúcar comum, adoçante, batata crua macerada 10%.
Procedimento experimental:
Teste de Benedict:
Pipetou-se 1 mL da solução contendo carboidrato de cada amostra desconhecida (leite, mel, amido de milho, açúcar comum, adoçante) em um tubo de ensaio
Preparou-se um tubo-controle negativo com 1 mL de H2O; 
Preparou-se um tubo-controle positivo com1 mL da glicose; 
Adicionou-se a cada tubo 1,5 mL de Benedict; 
Aqueceram-se todos os tubos juntos em banho-maria fervente por 5 min. Observou-se a formação do precipitado vermelho-tijolo; 
Foram anotados todos os resultados do teste numa tabela (poderá ser observada nos resultados e discussões).
Teste de Iodo para Detecção de Amido:
Pipetou-se 1 mL da solução contendo carboidrato de cada amostra desconhecida (leite, mel, amido de milho, açúcar comum, adoçante) em um tubo de ensaio
Preparou-se um tubo-controle negativo com 1 mL de H2O; 
Preparou-se um tubo-controle positivo com 1 mL de amido padrão; 
Adicionou-se a cada tubo de ensaio uma gota de Lugol e observou-se o aparecimento da cor azul; 
Foram anotados todos os resultados do teste numa tabela (poderá ser observada nos resultados e discussões).
Aqueceu-se apenas o tubo com a solução de amido/iodo e observaram-se os resultados;
Esperaram os tubos se resfriarem e observou-se novamente.
Resultados e Discussões:
Teste de Benedict:
	AMOSTRAS 
	RESULTADOS 
	IDENTIFICAÇÃO
	Controle negativo
	Após a adição do reagente de Benedict a água se tornou azul, por conta do sulfato cúprico. Depois de colocado no banho-maria a solução continuou com a mesma coloração.
	Água
	Controle positivo 
	Com a adição do reagente Benedict, a solução de amido se tornou azul. Após o banho-maria a solução continuou com a mesma cor, por conta da solução de amido estar contaminada.
	Solução de amido 1%
	Positivo 
	Quando se adicionou a solução de Benedict a coloração mudou para azul. Após o aquecimento no banho-maria, a mesma solução se tornou vermelha.
	Maltose 1%
	Negativo 
	A solução continuou azul antes e após o aquecimento.
	Sacarose (açúcar comum) 1%
	Positivo 
	Com a adição do reagente de Benedict a solução tornou-se uma coloração de verde azulado. Após ser submetida ao aquecimento, a solução tornou-se laranja.
	Mel
	Positivo 
	Foi adicionado reagente de Benedict ao tubo de ensaio, fazendo com que a coloração da solução torna-se azul. Logo depois do aquecimento no banho-maria a mesma solução tornou-se vermelha.
	Adoçante 
	Positivo 
	Com a adição do reagente de Benedict, a solução tomou-se uma coloração azulada. Após o banho-maria a mesma solução se tornou amarela.
	Leite
	Positivo 
	Quando se adicionou o reagente de Benedict a solução se tornou azulada. Após o banho-maria a mesma solução tornou-se verde. 
	Solução de batata crua macerada 10%
	Positivo 
	Com a adição do reagente de Benedict a solução se tornou azul, logo após o banho-maria a mesma solução tornou-se vermelha.
	Glicose
Uma vez que a água não é um açúcar redutor, a coloração inicial se mantem azul. Nas amostras com açúcares que apresentaram alteração de cor, a glicose (monossacarídeo), reage positivamente frente à redução dos íons cobre. O aquecimento do açúcar redutor em presença de íons Cu(II) e OH- reduz o cobre a Cu(I) e o açúcar é oxidado, havendo a formação de precipitado de Cu2O que varia de cor de acordo com a concentração do açúcar. Para os dissacarídeos promoverem a formação do precipitado, eles precisam da presença de uma extremidade redutora, o que não ocorre com a sacarose. O açúcar de cana é um dissacarídeo de glicose e frutose e não possui átomos de carbono anomérico livres, pois esses estão ligados entre si e, consequentemente, não podem sofrer oxidação. O amido, um polímero de glicose, também é um açúcar não redutor, não devendo apresentar a formação de precipitado. Contudo, devido ao aquecimento, supõe-se que houve a hidrólise da molécula pelo calor, produzindo monossacarídeos e positivando a reação de Benedict.
Teste de Iodo para detecção de amido:
	AMOSTRAS
	RESULTADOS
	IDENTIFICAÇÃO
	Controle negativo 
	Após a adição de Lugol na água, obteve-se uma coloração marrom, causada pelo Iodo. 
	1 mL de Água
	Controle positivo 
	Com a adição do Lugol na solução de amido, a mesma tomou-se uma coloração azul marinho.
	1 mL de solução de amido
	Negativo 
	Houve alteração na cor da solução por conta da coloração do Iodo, porem não houve reação.
	1 mL de glicose 
	Negativo 
	Houve alteração na cor da solução por conta da coloração do Iodo, porem não houve reação.
	1 mL de maltose 
	Negativo 
	Houve alteração na cor da solução por conta da coloração do Lugol, porem não houve reação.
	1 mL de sacarose
	Negativo 
	Houve alteração na cor da solução por conta da coloração do Lugol, porem não houve reação.
	1 mL de mel
	Negativo 
	Houve alteração na cor da solução por conta da coloração do Lugol, porem não houve reação.
	1 mL de adoçante 
	Negativo 
	Houve alteração na cor da solução por conta da coloração do Lugol, porem não houve reação.
	1 mL de leite 
	Negativo 
	Nesta etapa era esperado que o teste fosse positivo, ou seja, toma-se uma coloração azul, já que a batata possui amido. A solução tomou uma coloração marrom idêntica a das etapas acima, o que pode ter influenciado foi que a solução de agua de batata ficou em repouso isso fez com que o amido contido ali se depositasse no fundo do Béquer.
	1 mL de água de batata
Se houver amido no alimento, a coloração da solução de iodo no alimento irá variar do azul ao preto, pois o I2 reage com o amido, formando uma estrutura complexa que possui essas cores.
É bem visível a coloração azul intensa que se forma no tubo após a adição do Lugol, porem quando é aquecido, se torna uma solução translúcida, pois este se dissocia. Quando resfriadoem água corrente, retorna a sua cor azul intensa devido as cadeias helicoidais da amilose prenderem o iodo, já na amilopectina isso não ocorre pois tem uma cadeia ramificada. 
 Questões:
Em que princípio baseia-se o Teste de Benedict?
R: Baseada na redução de íons Cu2+ a Cu+ com formação de um precipitado vermelho ou amarelo.
Qual a função do sulfato cúprico no Teste de Benedict?
R: Detectar a presença de açúcares e açúcares redutores, nos quais se incluem glicose, galactose, lactose, maltose e manose.
Explique as diferenças nos resultados do Teste de Benedict para maltose e sacarose.
R: Como a maltose é um açúcar redutor, os íons Cu2+ do reagente de Benedict foram reduzidos para Cu+, fazendo com que a coloração tornasse vermelha-tijolo. Já com a sacarose foi um processo diferente, após o banho-maria ele continuou da cor do reagente de Benedict (azul), isto indica que ela não é um açúcar redutor.
Explique como o amido interage com o iodo e como ocorrem as mudanças de coloração, observadas na prática.
R: O amido é formado pela combinação da amilose com a amilopectina. A amilose forma um complexo azul com o iodo, e a amilopectina um complexo vermelho.
Após identificar os carboidratos de cada amostra no teste de iodo para detecção de amido, justifique os resultados obtidos.
R: resposta acima. 
7. Qual a classificação, fonte\classificação e função dos carboidratos listados a seguir:
	Nome
	Classificação
	Fonte\Localização
	Função
	Ribose
	Monossacarídeos
	Parede celular de fungos e insetos.
	Aldeído
	Desoxiribose
	Monossacarídeos
	Na raiz de Rauwolfia serpentina, entre outras fontes vegetais.
	Aldeído
	Lactose
	Oligossacarídeos
	Todos os mamíferos produzem uma enzima que tem essa função a lactase.
	Dissacarídeo
	Sacarose
	Oligossacarídeos
	Encontrada em diversas plantas, principalmente na beterraba e na cana-de-açúcar.
	Dissacarídeo
	Quitina
	Polissacarídeos
	Ocorre naturalmente em diversos organismos, sendo o principal componente da parede celular dos fungos e do exoesqueleto dos artrópodes.
	Polímero de cadeia longa de N-acetilglicosamina.
	Peptídeoglicano
	Polissacarídeos
	Presente na parede celular de procariontes.
	Formado por dois tipos de açúcares (o ácido N-acetilmurâmico e a N-acetilglucosamina) e alguns aminoácidos.
	Amido
	Polissacarídeos
	Encontrada nos vegetais e nos fungos
	Polímero
	Celulose
	Polissacarídeos
	Componente da parede celular
	Polímero
	Glicogênio
	Polissacarídeos
	Encontradas nos animais (fígado e músculos).
	função primordial de manutenção da glicemia.
Conclusão:
A partir dos experimentos realizados concluiu-se o Teste de Iodo são para identificação de carboidratos. E o Teste de Benedict, é utilizado na identificação de açúcares redutores. E que para identificarmos se é açúcares redutores ou carboidrato, devemos utilizar reagentes específicos para isso.
Bibliografia:
ATKINS, P; JONES, L. Princípios de química; questionando a vida moderna e o meio ambiente. 3.ed. Porto alegre: Bookman, 2006.
WILMO, 2008. E. F. J. Carboidratos: estruturas, propriedades e funções. Química nova na escola: Conceitos científicos em destaque. N° 29, Agosto 2008.
MARVIAL, L. O. Bioquímica de carboidratos. Rio de Janeiro: UERJ. 2009.