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MÉTODOS DE AVALIAÇÃO DE FATORES SALIVARES E MICROBIOLÓGICOS

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MÉTODOS DE AVALIAÇÃO DE FATORES SALIVARES E MICROBIOLÓGICOS RELACIONADOS A DOENÇA CÁRIE
INTRODUÇÃO
Cárie dentária é uma doença multifatorial frequente na população em geral
Fatores salivares e microbiológicos são importantes para o entendimento do processo de formação da cárie.
Os cirurgiões-dentistas têm como ferramenta de apoio os testes de cárie
Importantes para ajudar no controle, prevenção e avaliação do estado da saúde bucal do paciente
CARACTERISTICAS E FUNÇÃO DA SALIVA
SALIVA X DOENÇAS
A saliva é um fluido fundamental para o equilíbrio e saúde da cavidade oral, logo se deficiente, pode provocar ou agilizar o surgimento de alguns problemas como, por exemplo, a cárie, doença periodontal e candidíase.
HIPOSSALIVAÇÃO E XEROSTOMIA
Hipossalivação é a produção diminuída de saliva
Xerostomia é o sintoma de secura bucal
Nervosismo, estresse, alguns medicamentos, envelhecimento, tratamento de câncer e diabetes são algumas das causas
Aumento da incidência de cáries, doença periodontal, candidíase, aumento dos níveis de desmineralização dental, dificuldade para deglutir e a halitose são algumas complicações orais que podem ocorrer
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IMPORTANCIA DA AVALIAÇÃO
Medida profilática
Identificar se existe ou não atividade
Indicar o risco ao desenvolvimento de lesões cariosas
Elaborar um plano de tratamento abrangente
Observação de multifatores que podem causar a doença
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INDICAÇÕES
Auxiliar na avaliação de dados obtidos na anamnese
Avaliar a capacidade tampão e medir o pH salivar
Identificar pacientes com alto risco de cárie
Avaliar níveis de microorganismos (Streptococcus e Lactobacillus) na saliva
Determinar a frequência do retorno do paciente para avalição 
TIPOS DE EXAMES: TESTES SALIVARES
MEDIÇÃO DE FLUXO
Coleta de saliva estimulada: mastigar 1g de parafina durante 1 min; eliminar a saliva produzida nesse momento; mastigar a parafina por mais 5 min; cuspir a saliva em um cilindro graduado.
Coleta de saliva não estimulada: é recolhida sem que haja estímulo.
MEDIÇÃO DE FLUXO
Resultados:
PODER TAMPONANTE
Analisa o pH da saliva após a adição de um ácido fraco à mesma
1mL de saliva é adicionada em 3mL de uma solução de HCL a 0,005%
A relação entre a capacidade tampão e a atividade de cárie é inversa
PODER TAMPONANTE
Resultados:
TIPOS DE EXAMES: TESTES MICROBIOLÓGICOS
CONTAGEM DE STREPTOCOCOS
Método convencional da placa de Petri:
Amostra diluída de biofilme dentário ou de saliva;
Meio de cultura ágar-Mitis Salivarius bacitracina, acrescido de 15% de sacarose;
Após 72 horas de incubação, os números de colônias são observados no microscópio e contados.
CONTAGEM DE STREPTOCOCOS
Método da espátula saliva/língua:
Meio de cultura ágar-Mitis Salivarius bacitracina e sacarose;
O paciente masca parafina durante 1 minuto;
Inocula-se um abaixador de língua e faz-se 10 rotações;
Após 48 horas de incubação, os números de colônias são contados;
Esse método evita a necessidade de coletar a saliva e não necessita meio de transporte.
CONTAGEM DE STREPTOCOCOS
Resultados:
CONTAGEM DE STREPTOCOCOS
Método da lâmina molhada:
Amostra de saliva estimulada não-diluída;
Meio de cultura Mitis Salivarius com 20% de sacarose;
Coloca-se dois discos de bacitracina no ágar;
Posta-se a lâmina de um tubo plástico protetor, ao qual é adicionado um comprimido gerador de CO2; 
Após 48 horas de incubação a 37°C, a quantidade de colônias que crescem dentro do halo de inibição da bacitracina é comparada a uma tabela fornecida pelo fabricante.
CONTAGEM DE STREPTOCOCOS
Técnica de imersão da lâmina:
Meio de cultura Mitis Salivarius sacarose sobre uma lâmina plástica;
 A saliva é coletada em um tubo contendo tampão;
Dissolve-se previamente uma pastilha de bacitracina no tubo;
Coloca-se uma pastilha geradora de CO2 dentro do tubo;
Após 48 horas de incubação a 37°C, a quantidade de colônias é calculada comparando-se a uma tabela fornecida pelo fabricante.
CONTAGEM DE STREPTOCOCOS
Técnica de crescimento em superfícies sólidas:
Avalia o crescimento de Streptococcus mutans em superfícies sólidas quando imersos em meio seletivo;
Coloca-se uma pastilha contendo bacitracina em um tubo com meio de cultura seletivo e aguarda-se 15 minutos;
 Estimulação com parafina;
Utiliza-se uma tira plástica para fazer 10 movimentos de rotação; 
A tira é imersa no meio de cultura; 
Após 48 horas de incubação a 37°C, o crescimento de colônias azuis é acompanhado.
CONTAGEM DE LACTOBACILOS
Altas concentrações em sítios retentivos e nas regiões mais profundas de sítios com cárie ativa; 
Meio de cultura Rogosa (meio SL);
Estimulação com parafina;
Diluída em solução salina tamponada e 0,1mL;
Semeados em placas de Petri, e incubados a 37°C por 3 a 4 dias;
CONTAGEM DE LACTOBACILOS
As colônias são contadas;
Saliva varia em relação ao momento do dia, ao alimento consumido e ao emprego da parafina a qual estimula a salivação;
Indivíduos com altas contagens de lactobacilos na saliva são mais suscetíveis a desenvolver cárie.
Método Simplificado para Estimular o Número de Lactobacilos
Saliva obtida por estimulação;
Meio de cultura Rogosa;
É colocado em um tubo fortemente fechado e inoculado por 4 dias a 37°C;
Densidade colonial sobre a lâmina é comparada com uma tabela-padrão.
CONTAGEM DE LACTOBACILOS
Resultados:
TESTE DE SNYDER
Mede a rapidez de formação de ácido quando uma amostra de saliva estimulada é inoculada em ágar-glicose contendo verde de bromocresol e pH entre 4,7 e 5;
Não prevê com exatidão a extensão da expectativa de cárie para um indivíduo.
CONTAGEM DE LEVEDURAS
A saliva é coletada sem estimulação;
Diluída até 10 elevado na -2;
Placas contendo ágar-Sabouraud Dextrose com cloranfenicol (0,1 mg/mL de meio);
Incubada a 37°C por 48 horas;
Leveduras acima de 400 ufc/mL alta atividade de cárie.
CONCLUSÃO
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
KRASSE, B. Risco de cárie
JORGE, A.O. Microbiologia Bucall
THYLSTRUP, A. Cariologia clínica
KRIEGER, L.ABOPREV Promoção de saúde bucal
TÓPICOS EM BIOQUÍMICA E MICROBIOLOGIA BUCAIS - caderno de estudos
FEJERSKOV, Ole. Cárie dentária: a doença e seu tratamento clínico.

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