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* Enzimas em Alimentos Enzimologia Prof. Ms. André Tomaz Terra Júnior * O que são enzimas ? Catalisador biológico que aumenta a velocidade de uma reação específica Abaixa a energia de ativação de uma reação * Energia * Reações enzimáticas A enzima se combina com um substrato, formando um complexo enzima-substrato antes de formar os produtos finais. * Ação da enzima * Estrutura de uma enzima Feita de uma parte proteica e outra não proteica. A parte não proteica é chamada de coenzima ou cofator. * Estrutura de uma enzima Sítio ativo é a parte da enzima onde as reações ocorrem O substrato (reagente) se encaixar no sítio ativo * Nomenclatura Nomes terminam em –ase. Nomes derivam do substrato Ex: Uréia urease Lactose lactase Outro do tipo de reação química Ex. Hidrólise hidrolases Oxidação oxidases Existem exceções Ex. ficina e papaína. * Fatores que influenciam a atividade pH e temperatura. Inibidores Ativadores Outras condições químicas (presença de sais, metais, etc). * Classificação das enzimas Baseado em onde a atividade enzimática ocorre: Exoenzimas extracelular Endoenzimes intracelular Uma enzima pode ser de ambos os tipos * Classificação das enzimas Baseado no tipo de reação Oxidoredutase Transferase Lipase Hidrolase Pectinase * Efeitos de fatores externos nas enzimas Temperatura Tende a aumentar a atividade enzimática até um máximo Temperaturas muito altas inativam a enzima * Temperatura Fenótipo Tirosinase inativa-se a temperaturas > 41 graus. * Efeitos de fatores externos nas enzimas pH A maioria das enzimas funciona apenas sob determinado pH. Para a maioria o pH ótimo é o próximo da neutralidade * Efeitos de fatores externos nas enzimas Concentração do substrato A velocidade da reação aumenta com o aumente da [] do substrato e depois estagna * Fatores Químicos Inibidores enzimáticos Reversíveis Alteram a forma do sítio ativo ou se liga temporariamente a este Irreversíveis Liga-se ao sítio ativo de forma irreversível * Fatores Químicos Inibidores enzimáticos Reversíveis Competitiva Ligação no sítio ativo Não competitiva Ligação em outro sítio * Fatores Químicos I inibição e ativação (efeito alostérico) Ativação Alostérica * Reações reversíveis Muitas reações enzimáticas são reversíveis Alcool desidrogenase Triptofano sintase Isso pode ser usado para inibir a enzima Excesso de produto * Reações reversíveis Alcool desidrogenase O etanol segue seu destino 80-90% dele será oxidado no fígado, com o auxílio de enzimas. Os outros 10% se destinarão aos diversos tecidos do corpo humano caso o álcool tenha sido 90% metabolizado no fígado. Caso seu metabolismo no órgão seja de 80%, 10% restantes são destinados aos tecidos enquanto que os outros 10% dele será expelido pela respiração ou excretado na urina). * Reações reversíveis Triptofano sintase Este processo é chamado de canalização do substrato e é extremamente vantajoso pois assim, além de aumentar mais de dez vezes a taxa catalítica global, ele previne a perda de um intermediário da síntese do triptofano. * Reações reversíveis * Mitos sobre enzimas São catalisadores O verdadeiro catalisador é a coenzima ou o cofator Catalisam apenas uma reação específica Catalisam um TIPO de reação específica Precisam de um substrato específico Pode ser usado qualquer substrato de uma determinada CLASSE, desde que o substrato tenha tamanho e conformação para encaixar no sítio ativo * Enzimas em Alimentos Controla amadurecimento. Causam degradação. Causa mudança em sabor, cor , textura e valor nutricional. São inativadas por calor para garantir maior tempo de conservação. * Enzimas em Alimentos Fermantação. Pode ser imobilizada em uma superfície. Extração e purificação. * Enzimas em Alimentos Aplicações * Enzimas na indústria Fermentação 28% Hidrólise de proteínas 59% Hidrólise de lipídios 3% Outros usos (farmacêutico, analítico, pesquisa, etc. ) 10% * Vendas anuais: 1,6 bilhões U$ Processamento de alimentos: 45% Detergentes: 34% Tecidos: 11% Couro: 3% Papel: 1,2% Mercado mundial * Tipos de enzimas usadas na indústria Commodities (Mercadoria) Alto volume anual Baixa pureza Baixo custo 8 a 100 BRL por Kg Baixa margem de lucro Enzimas especiais (química fina) Baixo volume (g – kg) Alta pureza Alto custo (8 – 25.000 BRL por g) Alta margem de lucro * Razões importantes para o uso de Enzimas Reduz número de etapas no processo Permite condições brandas no processo Elimina a necessidade de solventes orgânicos Podem ser reaproveitadas Podem ser projetadas e melhoradas * Enzimas na indústria de alimentos Zimases (fermentação) Amilases (massas) Proteases (carnes, queijos) Pectinases (clarificação de sucos) Oxidases (ovos e carnes) * Enzimas na indústria de alimentos Zimases (fermentação) Enzima do levedo de cerveja, que provoca a decomposição da glicose em álcool e em gás carbônico, na fermentação alcoólica. * Enzimas na indústria de alimentos Amilases (massas) A amilase é uma enzima produzida pelo pâncreas e pelas glândulas salivares, que atua na digestão do amido e do glicogênio contidos nos alimentos. * Enzimas na indústria de alimentos Amilases diagnosticar problemas de saúde no pâncreas e glândulas salivares; Amilase alta A amilase alta no sangue ou na urina pode indicar: Pancreatite aguda e crônica; Obstrução dos ductos pancreáticos; Câncer no pâncreas; Caxumba: Insuficiência renal * Enzimas na indústria de alimentos Proteases (carnes, queijos) São enzimas que quebram ligações peptídicas entre os aminoácidos das proteínas. O processo é chamado de clivagem proteolítica, um mecanismo comum de ativação ou inativação de enzimas envolvido principalmente na digestão e na coagulação sanguínea. * Enzimas na indústria de alimentos Pectinases são enzimas que quebram pectina, um polissacarídeo encontrado na parede celular de plantas. * Enzimas na indústria de alimentos Oxidases é uma enzima que catalisa uma reação de oxidação/redução envolvendo oxigênio molecular (O2) como aceptor de elétrons. Nestas reações o oxigênio é reduzido a água (H2O) ou a peróxido de hidrogênio (H2O2). As oxidases são uma subclasse das oxidorredutases. * Enzimas importantes Carboidrases Produção de xaropes a partir de milho Quebrar amido em açucares simples Indústria de panificação * Enzimas importantes Amilases Produzidas por bacterias ou leveduras Bacilus lichenformis Hidrólise de amido (105-110 graus) Íons Ca2+ acelera processo Degradação de amido em indústria da fermentação Padronizar panificação Conservação de pães (amilopectina) * Enzimas importantes Proteases Bromelina é uma enzima digestiva natural extraído de abacaxi Papaína é uma enzima alcalóide extraída do mamão. Ficina é uma enzima proteolítica obtida do látex de figos imaturos (Ficus carica) Uso para amaciar carnes * Enzimas importantes Pectinases Quebram pectina Utilizadas na clarificação de sucos Remoção de excesso de pectina (sucos em pó) Pectina esterase (plantas) Pectina liase (micro-organismos) * Enzimas importantes Oxidases Remoção de glicose ou oxigênio Peróxido de hidrogênio formado é degradado Catalase Durante a produção de ovo desidratado Previne reações de escurecimento Durante a produção de carne idem. Menos problemático Aplicações também em: Cerveja, vinho e sucos * Escurecimento enzimático Catecolase Frutos são ricos em catecol Catecol reage com oxigênio e forma polifenóis Compostos escuros Cobre II é o cofator da enzima Limitar o cobre disponível é uma maneira de retardar essa reação Ácido cítrico * Escurecimento enzimático Catecolase * Escurecimento enzimático Ácido ascórbico oxidase Cobre I/II é o cofator da enzima Limitar o cobre disponível é uma maneira de retardar essa reação Ácido cítrico * Escurecimento enzimático Ácido ascórbico oxidase * Outras aplicações Polifenol oxidase – armazenamento de frutos Protease – clarificação de cervejas Lipoxigenases – clarificação de farinhas Fenol oxidase – café, cacau, chá preto * Outras aplicações Controle das enzimas Sulfito: pH Ascorbato/citrato de sódio EDTA Açúcar Empacotamento à vácuo * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *
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