Aula de nutrição e crescimento 2013.1 MICRO I

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Nutrição,	
  cul-vo	
  laboratorial,	
  
reprodução	
  e	
  crescimento	
  dos	
  
micro-­‐organismos	
  
Microbiologia	
  I	
  
	
  
Josilene	
  Matos	
  
Universidade	
  Federal	
  da	
  Bahia	
  
Ins-tuto	
  de	
  Ciências	
  da	
  Saúde	
  
Departamento	
  de	
  Biointeração	
  
UFBA	
  
Condições	
  necessárias	
  para	
  o	
  cul-vo	
  
ü Fatores	
  1sicos:	
  temperatura,	
  pH	
  e	
  pressão	
  osmó-ca.	
  
ü Fatores	
   químicos:	
   água,	
   fontes	
   de	
   carbono,	
  
nitrogênio,	
   hidrogênio,	
   oxigênio,	
   enxofre,	
   fósforo	
   e	
  
fatores	
  orgânicos.	
  
ü Fatores	
   metabólicos:	
   enzimas	
   e	
   processos	
  
associados	
  aos	
  fatores	
  Msicos	
  e	
  químicos.	
  
Nutrição	
  microbiana	
  
“	
   Nutrientes:	
   todos	
   os	
  materiais	
   u0lizados	
   pela	
   célula	
  
para	
  a	
  construção	
  e	
  manutenção	
  da	
  sua	
  estrutura	
  e	
  
organização,	
   inclusive	
   como	
   fonte	
   de	
   energia,	
  
quando	
  esta	
  é	
  de	
  natureza	
  	
  química.”	
  
Bier,	
  O.,	
  Microbiologia	
  e	
  Imunologia,	
  24a.	
  Ed.,	
  
1985.	
  
ü Nutrição	
  bacteriana	
  
ž  Degradação	
  de	
  macromoléculas	
  por	
  bactérias	
  através	
  da	
  
secreção	
  de	
  enzimas	
  hidrolí-cas	
  (hidrolases),	
  proteases,	
  
lipases,	
  etc.	
  
Nutrição	
  microbiana	
  
ü Mecanismo	
   que	
   fornece	
   às	
   células	
   as	
   ferramentas	
  
químicas	
   (nutrientes)	
   necessárias	
   à	
   síntese	
   de	
  
moléculas	
  celulares	
  e	
  produção	
  de	
  energia.	
  
ü Importância	
  da	
  nutrição:	
  	
  
•  Torna	
  possível	
  a	
  reprodução	
  e	
  crescimento	
  bacteriano.	
  
Ø  	
   Ex:	
   Protéinas	
   estruturais,	
   enzimas,	
   mureína,	
   LPS,	
  	
  	
  	
  
polissacarídeos,	
  ácido	
  teicóico,	
  ácidos	
  nucléicos.	
  	
  
Nutrição	
  microbiana	
  -­‐	
  principais	
  
elementos	
  
ü Macronutrientes	
  –	
  Carbono	
  
•  Forma	
   o	
   esqueleto	
   dos	
   carboidratos,	
   lipídeos	
   e	
  
proteínas.	
  
•  Principais	
  fontes	
  
Ø Autotróficos:	
  u-lizam	
  o	
  CO2	
  como	
  principal	
  ou	
  única	
  
fonte	
  de	
  carbono.	
  
Ø Heterotróficos:	
  u-lizam	
  compostos	
  orgânicos	
  como	
  
principal	
  fonte	
  de	
  carbono	
  (proteínas,	
  carboidratos,	
  
lipídeos).	
  
Macronutrientes	
  
ü Nitrogênio	
  
•  Proteínas,	
  ácidos	
  nucléicos,	
  mureína,	
  ácido	
  teicóico.	
  
•  Principais	
   fontes	
   (diversidade	
   dependente	
   da	
   espécie	
  
bacteriana)	
  
Ø Nitrogênio	
   atmosférico	
   (N2	
  →	
   NH4+)	
   –	
   fixação	
   do	
  
nitrogênio	
  
Ø Obtenção	
  a	
  par-r	
  de	
  nitrato	
  ou	
  amônia	
  
Ø Nitrogênio	
   orgânico	
   (aminoácidos	
   ou	
   pepadeos	
   –	
  
fatores	
  de	
  crescimento).	
  
Macronutrientes	
  
ü Enxofre	
  
•  Síntese	
   de	
   aminoácidos	
   (cisteína	
   e	
   me-onina)	
   e	
  
vitaminas	
  (-amina	
  e	
  bio-na).	
  
	
  	
  
•  Principais	
  fontes:	
  	
  
Ø Íon	
  sulfato	
  (SO42-­‐)→	
  H2S	
  
Ø Sulfito	
  de	
  hidrogênio	
  (H2S)	
  
Ø Aminoácidos	
  que	
  contêm	
  enxofre	
  na	
  estrutura	
  
Macronutrientes	
  
ü Fósforo	
  
•  Compostos	
  orgânicos	
   celulares	
   -­‐	
  ATP,	
  NADP,	
   LPS,	
  
fosfolipídeos	
   da	
   membrana	
   celular	
   e	
   ácidos	
  
nucléicos.	
  
•  Principais	
  fontes:	
  
Ø Micro-­‐organismo	
  somente	
  obtém	
  na	
  forma	
  de	
  fosfato	
  
inorgânico	
  (PO4-­‐3)	
  
ü Potássio,	
   magnésio	
   e	
   cálcio	
   são	
   necessários	
   como	
  
co-­‐fatores	
  para	
  as	
  reações	
  enzimá-cas.	
  
Classificação	
  dos	
  micro-­‐organismos	
  quanto	
  às	
  fontes	
  de	
  
energia	
  e	
  carbono	
  
Nutrição	
  microbiana	
  
	
  
Oligo-­‐elementos	
  ou	
  elementos-­‐traços	
  
	
  
ü Elementos	
   exigidos	
   em	
   quan-dades	
   muito	
  
pequenas:	
  	
  
•  Ferro,	
  cobre,	
  zinco,	
  cobalto,	
  manganês.	
  
•  Essenciais	
  para	
  a	
  a-vidade	
  de	
  algumas	
  enzimas.	
  	
  
Fatores	
  de	
  crescimento	
  
ü Compostos	
   orgânicos	
   que	
   alguns	
   micro-­‐
organismos	
  necessitam:	
  
•  Vitaminas,	
  aminoácidos,	
  purinas	
  e	
  pirimidinas	
  
ü Micro-­‐organismos	
  fasFdiosos	
  
•  Bactérias	
   lá-cas:	
   Lactobacillus,	
   Leuconostoc,	
  
Streptococcus,	
  etc.	
  
Cul-vo	
  Laboratorial	
  
ü Meios	
  de	
  cultura	
  
•  Material	
  nutriente	
  preparado	
  no	
   laboratório	
  para	
  
o	
  crescimento	
  de	
  micro-­‐organismos	
  (cultura).	
  
ü Aplicação	
  
•  Isolamento	
  	
  e	
  iden-ficação	
  de	
  micro-­‐organismos	
  
Ø Meios	
  quimicamente	
  definidos	
  
Ø Meios	
  complexos	
  (indefinidos)	
  
•  Composição	
  química	
  não	
  definida	
  
Meio	
  quimicamente	
  definido	
  
Meio	
  complexo	
  
Quando	
  se	
  u-liza	
  meios	
  quimicamente	
  
definidos?	
  
ü Para	
  determinar	
  as	
  necessidades	
  nutricionais	
  de	
  um	
  
determinado	
  micro-­‐organismo.	
  
ü Cepa	
  prototrófica	
  
•  Não	
  requer	
  qualquer	
  suplemento	
  orgânico	
  para	
  crescer	
  
ü Cepa	
  auxotrófica	
  
•  Necessita	
  de	
  suplementos	
  orgânicos	
  em	
  um	
  meio	
  mínimo	
  
para	
  se	
  desenvolver.	
  
•  Desenvolveu	
  determinada	
  necessidade	
  nutricional	
  em	
  
decorrência	
  de	
  uma	
  mutação.	
  
Cul-vo	
  de	
  micro-­‐organismos	
  
ü Cu l-vo	
   de	
   bac tér ias :	
   me ios	
   de	
   cu l tura	
  
bacteriológicos.	
  
ü Cul-vo	
  de	
  fungos:	
  meios	
  de	
  cultura	
  para	
  fungos.	
  
ü Cul-vo	
   de	
   vírus:	
   ovo	
   embrionado	
   ou	
   cultura	
   de	
  
células.	
  
Cul-vo	
  de	
  bactérias	
  
ü Meios	
  de	
  cultura	
  bacteriológicos	
  
•  Caldo	
  nutriente	
  (líquido)	
  
Ø Extrato	
  de	
  carne	
  
Ø Peptona	
  
Ø Cloreto	
  de	
  sódio	
  
Ø Água	
  
•  Para	
  solidificar,	
  acrescentar	
  ágar	
  
Ø Semi-­‐sólido	
  (0,3-­‐05%)	
  
Ø Sólido	
  (1,5-­‐2%)	
  
Meio	
  líquido	
  -­‐	
  caldo	
  BHI	
  
Meio	
  sólido	
  em	
  tubo	
  -­‐	
  inclinado	
  
Meio	
  sólido	
  em	
  placa	
  de	
  Petri	
  
Qual	
  seria	
  a	
  vantagem	
  dos	
  
meios	
  sólidos?	
  
ü Imobilizam	
  as	
  células	
  e	
  
permitem	
  a	
  formação	
  
de	
  colônias	
  
•  Caracterís-cas	
  
coloniais	
  
•  Pureza	
  de	
  uma	
  cultura	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
Como	
  cul-var	
  bactérias	
  intracelulares?	
  	
  
ü Culturas	
  de	
  células	
  
•  Cul-vos	
   homogêneos	
   que	
   podem	
   ser	
  
propagados	
   e	
   manipulados	
   da	
   mesma	
   forma	
  
que	
  as	
  bactérias.	
  
•  Clamídias,	
   riquétsias	
   e	
   algumas	
   espiroquetas	
  
são	
  cul-vadas	
  em	
  culturas	
  de	
  células.	
  
Meios	
  –	
  finalidade	
  bacteriológica	
  
Meios	
  de	
  cultura	
  -­‐	
  conservantes	
  
ü  Finalidade	
  bacteriológica:	
  
1.	
  Conservantes	
  
•  Contém	
   substâncias	
   que	
   inibem	
   as	
   enzimas	
  
autolí-cas	
  e	
  previnem	
  os	
  efeitos	
  da	
  oxidação	
  
•  Transporte	
  -­‐	
  Stuart	
  /	
  Amies	
  
Meios	
  de	
  cultura	
  -­‐	
  sele-vos	
  
ü  Finalidade	
  bacteriológica:	
  
2.	
  SeleFvos	
  
•  Permitem	
   o	
   crescimento	
   de	
   um	
   -po	
   par-cular	
   de	
  
micro-­‐organismo	
   e	
   suprimem	
   o	
   crescimento	
   de	
  
outros.	
  
•  Mac	
  Conkey/EMB	
  
Microbelibrary.org	
  (American	
  Society	
  of	
  
Microbiology)	
  
Meios	
  de	
  cultura	
  
ü  Finalidade	
  bacteriológica:	
  
3.	
  Não-­‐seleFvos	
  
•  Permitem	
   o	
   crescimento	
   de	
   ampla	
   variedade	
   de	
  
micro-­‐organismos	
  	
  
•  Ágar	
  sangue	
  
Meios	
  de	
  cultura	
  
ü  Finalidade	
  bacteriológica:	
  
4.	
  De	
  enriquecimento	
  
•  Aumentar	
   o	
   número	
   de	
   micro-­‐organismos	
   de	
  
interesse	
   até	
   níveis	
   detectáveisem	
   uma	
   população	
  
mista.	
  	
  
•  Caldo	
  de	
  tetra-onato	
  (Salmonella)	
  
Meios	
  de	
  cultura	
  -­‐	
  diferenciais	
  
ü  Finalidade	
  bacteriológica:	
  
5.	
  Diferenciais	
  
•  Estabelecem	
   diferenças	
   entre	
   micro-­‐organismos	
   de	
  
caracterís-cas	
  parecidas	
  	
  
•  Ágar	
  sangue/SS	
  
Meios	
  de	
  cultura	
  -­‐	
  indicadores	
  
ü  Finalidade	
  bacteriológica:	
  
6.	
  Indicadores	
  
•  Possuem	
  substâncias	
  que	
  evidenciam	
  a	
  u-lização	
  de	
  
determinados	
  substratos	
  	
  
•  Urease	
  
Meios	
  de	
  cultura	
  -­‐	
  redutores	
  
ü  Finalidade	
  bacteriológica:	
  
7.	
  Redutores	
  
•  Agente	
  redutor	
  presente	
  no	
  meio	
  remove	
  o	
  oxigênio	
  
para	
  produzir	
  o	
  meio	
  reduzido	
  
•  Tioglicolato	
  de	
  sódio	
  –	
  combina	
  quimicamente	
  com	
  o	
  
oxigênio	
   dissolvido	
   em	
   um	
   meio	
   e	
   torna-­‐o	
   não	
  
disponível	
  para	
  os	
  micro-­‐organismos	
  
	
  
	
  
	
  
	
  
Crescimento	
  e	
  reprodução	
  
microbianos	
  
Crescimento	
  e	
  
reprodução	
  
ü Crescimento	
  
•  Aumento	
  no	
  número	
  de	
  
células	
  
ü Reprodução	
  	
  
•  Fissão	
  binária	
  (maioria)	
  
•  Brotamento	
  (micoplasmas,	
  
leveduras)	
  
31	
  
Tortora	
  et	
  al,	
  
Microbiologia,	
  2012	
  
Proteínas	
  importantes	
  no	
  processo	
  de	
  
divisão	
  celular	
  em	
  bactérias	
  
ü Proteínas	
   homólogas	
   às	
   do	
   citoesqueleto	
   de	
  
células	
  eucarió-cas:	
  
•  MreB	
   (homóloga	
   à	
   ac-na)	
   –	
   forma	
   celular,	
  
segregação	
   dos	
   cromossomos	
   e	
   localização	
   de	
  
proteínas.	
  
•  FtsZ	
   (homóloga	
   à	
   tubulina)	
   –	
   forma	
   celular	
  
regulação	
   da	
   divisão	
   celular	
   e	
   segregação	
  
cromossômica.	
  
Proteínas	
  Fts	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
Tempo	
  de	
  geração	
  
ü Tempo	
  necessário	
  para	
  uma	
  célula	
  se	
  dividir,	
  ou	
  para	
  
que	
  a	
  população	
  duplique	
  	
  em	
  número.	
  
ü Fatores	
  que	
  podem	
  influenciar	
  o	
  tempo	
  de	
  geração:	
  	
  
•  Composição	
   nutricional	
   e	
   as	
   condições	
   Msicas	
   de	
  
incubação.	
  	
  
Tempo	
  de	
  geração	
  –	
  são	
  variados	
  
•  Escherichia	
  coli 	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  20	
  -­‐	
  30	
  min	
  
	
  
	
  
•  Lactobacillus	
  spp 	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  70	
  -­‐	
  85	
  min	
  
	
  
	
  
	
  
•  Mycobacterium	
  tuberculosis	
  	
  	
  18	
  -­‐	
  20	
  horas	
  
Tortora	
  et	
  al,	
  
Microbiologia,	
  2012	
  
CRESCIMENTO	
  BACTERIANO	
  
⇒	
  N=	
  2n	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  
O	
   aumento	
   do	
   número	
   de	
   células	
   de	
  
uma	
  cultura	
  bacteriana	
  em	
  crescimento	
  
exponencial	
   ocorre	
   em	
   progressão	
  
geométrica	
  de	
  quociente	
  2.	
  
Representação	
  gráfica	
  
logarítmica	
  x	
  aritmé-ca	
  	
  
Curva	
  de	
  crescimento	
  
ü É	
   um	
   gráfico	
   que	
  mostra	
   a	
   variação	
   do	
   número	
   de	
  
células	
  viáveis	
  (capazes	
  de	
  se	
  reproduzir)	
  em	
  função	
  
do	
  tempo.	
  
ü Esta	
   curva	
   é	
   traçada	
   para	
   uma	
   população	
   em	
   um	
  
sistema	
  fechado	
  (tubo	
  contendo	
  meio	
  de	
  cultura).	
  
•  Nenhum	
   novo	
   nutriente	
   é	
   adicionado	
   ao	
   sistema	
   e	
  
nenhum	
  produto	
  de	
  excreção	
  metabólico	
  é	
  removido.	
  
	
  
Quais	
  são	
  as	
  fases	
  do	
  
crescimento	
  microbiano?	
  
Tortora	
  et	
  al,	
  
Microbiologia,	
  2012	
  
Métodos	
  para	
  quan-ficar	
  diretamente	
  o	
  
crescimento	
  microbiano	
  
ü Contagem	
  de	
  colônias	
  em	
  placa	
  
•  Método	
  Pour-­‐Plate	
  (semeadura	
  em	
  profundidade)	
  
•  Método	
  de	
  semeadura	
  por	
  espalhamento	
  
ü Filtração	
  
ü Contagem	
  direta	
  ao	
  microscópio	
  
•  Câmara	
  Petroff-­‐Hausser	
  
Diluição	
  seriada–	
  30	
  A	
  300	
  
colônias	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
Contagem	
  de	
  colônias	
  em	
  placa	
  
	
  
Contagem	
  de	
  colônias	
  em	
  placa	
  
	
  
ü É	
   a	
   técnica	
   mais	
   u-lizada	
   na	
   determinação	
   do	
  
tamanho	
  de	
  uma	
  população	
  bacteriana.	
  
ü Vantagem:	
  
•  As	
  células	
  viáveis	
  são	
  quan-ficadas.	
  	
  
ü Desvantagem:	
  
•  Necessita	
  tempo	
  de	
  incubação,	
  em	
  geral	
  24h.	
  
ü Deve-­‐se	
  u-lizar	
  a	
  diluição	
  seriada.	
  
Contagem	
  de	
  bactérias	
  pelo	
  
método	
  de	
  filtração	
  
Tortora	
  et	
  al,	
  
Microbiologia,	
  2012	
  
Quando	
  
devemos	
  
filtrar?	
  
Contagem	
  direta	
  ao	
  microscópio	
  
	
  
ü  Câmara	
  de	
  Petroff-­‐Hausser	
  
ü  Vantagem:	
  	
  
•  Não	
  necessita	
  de	
  período	
  de	
  incubação	
  –	
  resultado	
  rápido.	
  	
  
ü  Desvantagens:	
  
•  Existe	
  dificuldade	
  para	
  a	
  contagem	
  de	
  bactérias	
  móveis	
  
•  São	
  quan-ficadas	
  células	
  viáveis	
  e	
  mortas.	
  
•  Limite	
  de	
  resolução	
  do	
  microscópio	
  
	
  
	
  
Tortora	
  et	
  al,	
  
Microbiologia,	
  2012	
  
Câmara	
  de	
  contagem	
  Petroff-­‐Hausser	
  
Métodos	
  indiretos	
  na	
  determinação	
  do	
  
número	
  de	
  bactérias	
  
ü  Turbidimetria	
  	
  
ü  Peso	
  seco	
  
ü  principalmente	
  para	
  fungos	
  filamentosos	
  
	
  
a)	
  fungo	
  é	
  removido	
  do	
  	
  
	
  meio	
  por	
  filtração	
  
b)	
  seco	
  em	
  dessecador	
  
c)	
  posterior	
  pesagem	
  
Cultura	
  conanua	
  
ü  Man t e r	
   um a	
   p o p u l a ç ã o	
  
m i c r o b i a n a 	
   c r e s c e n d o	
  
con-nuamente	
   em	
   uma	
   taxa	
  
par-cular,	
  na	
  fase	
  logarítmica	
  
ü  Quimiostato	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
Efeitos	
  ambientais	
  no	
  crescimento	
  
microbiano	
  
ü Fatores	
  Msicos	
  
•  Temperatura	
  
•  pH	
  
•  Pressão	
  osmó-ca	
  
•  Atmosfera	
  gasosa	
  (reposta	
  ao	
  oxigênio)	
  
Efeitos	
  ambientais	
  -­‐	
  Temperatura	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
Por	
  que	
  logo	
  
acima	
  da	
  
temperatura	
  
ó-ma,	
  o	
  
crescimento	
  cai	
  
drama-camente?	
  
Curva	
  de	
  crescimento	
  x	
  variação	
  na	
  
temperatura	
  	
  
Curva	
  de	
  crescimento	
  caracterís-ca	
  de	
  diferentes	
  micro-­‐organimos	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
Crescimento	
  de	
  
hipertermófilos	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
pH	
  –	
  acidez	
  ou	
  alcalinidade?	
  
ü 	
  Maioria	
  dos	
  micro-­‐organismos	
  cresce	
  melhor	
  perto	
  da	
  
neutralidade	
  (pH	
  6,5	
  –	
  7,5);	
  
ü 	
  Maioria	
  das	
  Bactérias:	
  faixa	
  entre	
  pH	
  7,0	
  (neutroMlicos).	
  
ü Exceções:	
  	
  
• 	
  Bactérias	
  acidófilas:	
  alto	
  grau	
  de	
  tolerância	
  à	
  acidez	
  
(Thiobacillus	
  de	
  0,5	
  a	
  6,0	
  com	
  ó-mo	
  entre	
  2	
  e	
  3,5).	
  
• 	
  Bactérias	
  alcaliMlicas:	
  (Bacillus	
  e	
  Archaea)	
  (pH	
  10	
  –	
  11).	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
Efeitos	
  ambientais	
  –	
  pressão	
  osmó-ca	
  
ü Pressão	
  osmó-ca	
  
Tortora	
  et	
  al,	
  
Microbiologia,	
  2012	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  Microbiologia	
  
de	
  Brock,	
  2010	
  
Concentração	
  
de	
  sal	
  
Halotolerantes:	
  não	
  
necessitam	
  de	
  sal	
  mas	
  toleram	
  
a	
  presença	
  no	
  meio.	
  
Halófilos:	
  necessitam	
  de	
  sal	
  em	
  
uma	
  concentraçãomoderada.	
  
Halófilos	
  extremos:	
  necessitam	
  
de	
  sal	
  em	
  altas	
  concentrações.	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  Microbiologia	
  
de	
  Brock,	
  2010	
  
59	
  
Halo1licos	
  extremos	
  
Classificação	
  de	
  acordo	
  com	
  a	
  atmosfera	
  
de	
  cul-vo	
  
ü Aeróbios	
  obrigatórios:	
  21%	
  de	
  oxigênio.	
  
ü Anaeróbios	
  obrigatórios:	
  não	
  podem	
  crescer	
  em	
  presença	
  do	
  
oxigênio.	
  	
  
ü 	
  Anaeróbios	
  FacultaFvos:	
  podem	
  crescer	
  na	
  presença	
  do	
  oxigênio	
  
ou	
  em	
  anaerobiose.	
  
ü Microaerófilos:	
  oxigênio	
  de	
  1	
  a	
  15%.	
  	
  
ü Anaeróbios	
  aerotolerantes:	
  anaeróbios	
  que	
  não	
  morrem	
  com	
  a	
  
exposição	
  ao	
  oxigênio.	
  
U-lização	
  de	
  oxigênio	
  
AERÓBIO 
ESTRITOS 
alta [O2] 
catalase 
SOD 
ANAERÓBIO 
ESTRITO 
sem O2 
ausência: 
catalase 
SOD 
MICRO 
AERÓFILO 
baixa [O2] 
AERÓBIO 
FACULTATIVO 
alta e baixa 
[O2] 
catalase 
SOD 
alta e baixa 
[O2] 
SOD 
ANAERÓBIO 
AEROTOLERANTES 
Catalase	
   e	
   a	
  
s u p e r ó x i d o	
  
d i s m u t a s e	
  
reduzem	
   para	
  
H 2 O 	
   o s	
  
c o m p o s t o s	
  
tóxicos.	
  
Efeito	
  do	
  oxigênio	
  sobre	
  o	
  crescimento	
  de	
  vários	
  Fpos	
  de	
  bactérias.	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
Influência	
  do	
  oxigênio	
  
ü Anaeróbios	
  
•  Não	
   u-lizam	
   Oxigênio	
   para	
   as	
   reações	
   de	
  
produção	
  de	
  energia,	
  podendo	
  ser	
  mortos	
  por	
  ele.	
  
Ø Methanobacterium	
  –	
  anaeróbio	
  estrito	
  
Ø Anaeróbio	
  aerotolerante	
  –	
  Lactobacillus	
  
Ø Anaeróbio	
  faculta-vo	
  –	
  Escherichia	
  coli	
  
Ø Microaerófilo	
  –	
  Campylobacter	
  jejuni	
  
Ø Aeróbio	
  –	
  Micococcus	
  luteus	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
Por	
  que	
  o	
  O2	
  é	
  tóxico	
  para	
  os	
  
anaeróbios?	
  
Enzimas	
  que	
  ina-vam	
  o	
  O2	
  tóxico	
  
ü Superóxido	
  dismutase	
  
•  Elimina	
  os	
  radicais	
  
superóxido,	
  convertendo-­‐os	
  
em	
  peróxido	
  de	
  hidrogênio	
  
Madigan	
  et	
  al,	
  
Microbiologia	
  de	
  Brock,	
  
2010	
  
Incubação	
  de	
  anaeróbios	
  
ü Métodos	
  de	
  produção	
  de	
  ambiente	
  anaeróbio	
  	
  
Tortora	
  et	
  al,	
  
Microbiologia,	
  2012	
  
Incubação	
  
ü Métodos	
  de	
  produção	
  de	
  ambiente	
  anaeróbio	
  	
  
Injeção	
  de	
  N2,	
  H2	
  e	
  CO2	
  	
  Tortora	
  et	
  al,	
  
Microbiologia,	
  2012	
  
67