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02/03/2016 1 Microbiologia dos Alimentos Bactérias: morfologia, estrutura e reprodução Prof. Jossana Pereira de Sousa Guedes jossanapsousa@gmail.com Morfologia das bactérias Prof. Jossana Sousa (2016) Morfologia grosseira Tamanho Forma/Tipo Arranjo Classificação dos micro-organismos 2 Morfologia das bactérias Prof. Jossana Sousa (2016) 1. TAMANHO • Invisíveis ao olho humano; • Medidas em micrômetros (µm) • 1mm = 1.000 µm • 1 µm = 1.000 nm • Maioria tem de 0,5 a 1 µm de diâmetro ou largura • Comprimento: 2 a 100 µm 3 Morfologia das bactérias Prof. Jossana Sousa (2016) 1 trilhão de bactérias = 1.000.000.000.000 ou 10¹² = 1g • A relação entre a área de superfície das bactérias e seu volume é bastante elevada (nutrientes podem entrar). ↑ nutriente pode entrar ↓ volume de substância a ser absorvido 4 Morfologia das bactérias Prof. Jossana Sousa (2016) 2. FORMA Quatro formas básicas • Esféricas • Cilíndricas • Espiraladas • Vibriões Espirilos Bacilos Cocos Vibriões 5 Morfologia das bactérias Prof. Jossana Sousa (2016) 3. ARRANJO • Típico de cada espécie • Pode ser utilizado para identificação Arranjos dos cocos: Diplococo Estreptococos Tetracocos Estafilococos Sarcinas Exemplos: Neisseira Streptococcus Pediococcus Sstaphylococcus Sarcinas Arranjo predominante 6 02/03/2016 2 Morfologia das bactérias Prof. Jossana Sousa (2016) Bacilos: • Paliçada • Rosetas • Cadeias • Tricoma Exemplos: 7 Bacillus Caulobacter Corynebacterium diphtheride Saprospira grandis Morfologia das bactérias Prof. Jossana Sousa (2016) Espirilos: Exemplo: Campylobacter 8 Estrutura bacteriana Prof. Jossana Sousa (2016) Estruturas internas da célula • Área citoplasmática: porção fluída • Substâncias dissolvidas (ácidos nucléicos, proteínas, carboidratos, lipídeos, íons inorgânicos ) • Ribossomos – síntese de proteínas • Inclusões – reserva de energia • Área nuclear ou nucleóide: material genético (DNA) • Cromossomo único e circular Célula procariótica 0,5 a 5μm 9 Membrana citoplasmática • Sítio de atividade enzimática; • Transporte de moléculas (para dentro e fora da célula); • Permeases e bombas de efluxo (porina na camada externa da Gram-negativa) • Difusão simples (O2, CO2) • Osmose • Modelo do mosaico fluido • Fosfolipídeos • Proteínas Prof. Jossana Sousa (2016) 10 Parede celular Peptideoglicano ou mureína Prof. Jossana Sousa (2016) N-acetilglicosamina Ácido N-acetilmurâmico Tetrapeptídeo Autolisinas: enzimas (permite o crescimento da célula) Estrutura rígida: mantém a forma da célula Gram-negativas: 10 a 15 nm Gram-positivas: 20 a 25 nm Peptideoglicano: polímero poroso, insolúvel e resistente. Barreira: evita a evasão de enzimas e influxo de substâncias que causam danos a célula. 11 • Espessa camada de peptideoglicano necessária para: • Estrutura • Replicação • Sobrevivência • Sem a parede celular a célula entra em processo de lise (protoplasto) • Apresenta também ácidos teicóicos e lipoteicóicos, e polissacarídeos • São necessários a viabilidade da célula • Favorecem a adesão a outras bactérias e às células humanas • São capazes de desencadear respostas imunes Bactérias Gram-positivas Parede celular Prof. Jossana Sousa (2016) 12 02/03/2016 3 • Membrana interna • Fina camada de peptideoglicano • Membrana externa (proteção a bactéria) • Barreira: quando danificada permite a passagem de grandes moléculas • Proteínas chamadas porinas • Lipopolissacarídeos (LPS) ou endotoxina - estimulador de respostas imunes • Entre as membranas observa-se o espaço periplasmático • Contém diversas enzimas hidrolíticas • Ocorre degradação e metabolização de macromoléculas Bactérias Gram-negativas Parede celular Prof. Jossana Sousa (2016) 13 Prof. Jossana Sousa (2016) 14 Gram-positiva Gram-negativa Prof. Jossana Sousa (2016) 15 Prof. Jossana Sousa (2016) A identificação das bactérias, após o processo de coloração de Gram é possível em consequência da coloração que adquirem de acordo com a presença ou não da parede celular. As bactérias gram-positivas possuem parede celular e apresentam coloração roxa, entretanto, as bactérias gram-negativas não possuem parede celular e aparecem com uma coloração vermelha quando as lâminas são observadas no microscópio ótico. Coloração de Gram Gram-positiva Gram-negativa 16 Coloração de Gram - procedimento Prof. Jossana Sousa (2016) 17 Prof. Jossana Sousa (2016) 18 02/03/2016 4 Estruturas extracelulares Glicocálice: Material viscoso (cápsula ou limo) • Aderência; • Evitar a entrada de bacteriófagos na célula; • Protegem as bactérias patogênicas da fagocitose. Prof. Jossana Sousa (2016) 19 Streptococcus pneumoniae Bacillus anthracisEscherichia coli Estruturas extracelulares Prof. Jossana Sousa (2016) Flagelos (flagelina) • Funcionam como saca-rolhas (rotação) • Tamanho: 15 a 20 µm • Diâmetro: 12 a 20 nm • Nem todas as bactérias possuem Flagelo monotríquio Pseudomonas Flagelos anfitríquios (espirilos) Flagelos lofotríquios Flagelos peritríquios Escherichia 20 Cabelo Estruturas extracelulares Prof. Jossana Sousa (2016) Pêlo (fímbria) • Gram-negativas, principalmente • Estruturas ocas como flagelos, mas não são helicoidais • Mais finas, menores, mais retas e mais numerosas • Proteínas chamadas pilina formam a estrutura ancorada na parede celular Função básica é a Adesão 21 Bactérias esporuladas Podem sobreviver em condições desfavoráveis Endósporos – múltiplas camadas • Membrana interna • 2 camadas de peptideoglicano • 1 revestimento proteico (queratina) O DNA é protegido do calor, radiação e ataque de enzimas e agentes químicos. Formação do esporo: 6 a 8 h para ser concluído Germinação: 90 minutos Prof. Jossana Sousa (2016) 22 Estado vegetativo Estado de dormência (esporo) Clostridium Bacillus Bactérias esporuladas Reprodução das bactérias Prof. Jossana Sousa (2016) • Reprodução assexuada • Procariotos unicelulares = fissão binária ou cissiparidade • Células filhas idênticas a célula mãe • Tempo de Geração, em geral, de cerca de 15 a 30 minutos para a maioria das espécies mesófilas de importância em microbiologia de alimentos. 24 02/03/2016 5 Crescimento bacteriano 1 2 4 8 16 Prof. Jossana Sousa (2016) 25 Crescimento bacteriano Prof. Jossana Sousa (2016) Progressão geométrica (PG) 20 → 2¹ → 2² → 2³ ... → 2 elevado a n 1 → 2 → 4 → 8 ... → N – número total de células Crescimento exponencial Tempo de geração: intervalo de tempo requerido para que cada micro- organismo se divida ou que uma população se duplique em número. Número de gerações 26 Prof. Jossana Sousa (2016) Tempo Nº de bactérias 2:45h 2.048 3h 4.096 3:15h 8.192 3:30h 16.384 3:45h 32.768 4h 65.536 4:15h 131.072 4:30h 262.144 4:45h 524.288 5h 1.048.576 Crescimento bacteriano Tempo Nº de bactérias 0 min 1 15 min 2 30 min 4 45 min 8 1h 16 1:15h 32 1:30h 64 1:45h 128 2h 256 2:15h 512 2:30h 1.024 Aproximadamente 1,0 x 106 UFC Exemplo: •Tempo de geração – 15 min •Aumento da população bacteriana em Progressão Geométrica (PG) • Formação de populações elevadas em curto período de tempo 27 Representação gráfica do crescimento bacteriano Prof. Jossana Sousa (2016) Gerações 28 Curva padrão do crescimento Prof. Jossana Sousa (2016) Micro-organismos unicelulares em sistema fechado 29 Curva do crescimento Possui quatro (4) fases: • Lag: não há crescimentoem termos do aumento do número de células. • Log (crescimento logarítmico ou exponencial): período rápido de crescimento balanceado. • Estacionária: nenhum crescimento é evidente. • Declínio ou morte: declínio da população viável até que todas as células morram. Prof. Jossana Sousa (2016) 30 02/03/2016 6 Grupos bacterianos de importância em alimentos 1. Gram-negativas, aeróbias e microaerófilas; 2. Gram-negativas aeróbias estritas; 3. Gram-negativas anaeróbias facultativas; 4. Cocos Gram-positivos aeróbios e anaeróbios facultativos; 5. Bacilos Gram-positivos produtores de esporos; 6. Bacilos Gram-positivos não esporulados; 7. Outros. Prof. Jossana Sousa (2016) 31 Gram-negativas aeróbias e microaerófilas • Gênero Campylobacter • Possuem flagelos polares • Motilidade características (movimento saca-rolha) • Exemplos: • Campylobacter jejune • Campylobacter coli • Campylobacter lari Grupos bacterianos de importância em alimentos Prof. Jossana Sousa (2016) 32 Gram-negativas aeróbias estritas • Pseudomonas • Xanthomonas • Halobacterium • Halococcus • Acetobacter • Gluconobacter • Acinetobacter Pseudomonas Acetobacter Grupos bacterianos de importância em alimentos Deterioração em produtos de origem vegetal Bactérias halófilas (pescados e carnes salgados) Deterioração de sucos e bebidas alcoólicas Deterioração de vegetais, frutas, vinho, cidra e etc Deterioração de carnes e carcaças de aves Prof. Jossana Sousa (2016) 33 Gram-negativas aeróbias estritas • Alcaligenes • Alteromonas • Brucella • Flavobacterium • Moxarella • Psychrobacter • Shewanella Deterioração de alimentos proteicos Halófilas (deterioração de pescado) Causam brucelose (leite cru e laticínios e carnes) Ambiente aquático e marinho Brucella Grupos bacterianos de importância em alimentos Prof. Jossana Sousa (2016) 34 Gram-negativas anaeróbias facultativas • Citrobacter (coliformes): bactérias intestinais • Edwardsiella • Enterobacter (coliformes): bactérias intestinais • Erwinia (causam doenças em plantas) • Escherichia (coliformes) • Hafnia: deterioradores de carne e vegetais • Klebsiella (coliformes) • Pantoea • Proteus Escherichia coli Grupos bacterianos de importância em alimentos Prof. Jossana Sousa (2016) 35 Gram-negativas anaeróbias facultativas • Salmonella: presentes no TGI (aves e suínos) • Serratia: deterioração de carnes e vegetais • Shigella: presentes no TGI • Yersinia (pseudoapendicite, gastrenterite, entre outras) • Aeromonas: comuns no ambiente aquático • Plesiomonas: isolada de água, peixes, caranguejos e ostras • Vibrio: encontrados em água e alimentos marinhos Salmonella typhimurium Vibrio cholerae Grupos bacterianos de importância em alimentos Prof. Jossana Sousa (2016) 36 02/03/2016 7 Cocos Gram-positivos aeróbios e anaeróbios facultativos • Micrococcus: geralmente deterioram leite e derivados e carnes • Staphylococcus: produção de toxinas (S. aureus) • Aerococcus • Enterococcus: E. faecalis e E. faecium (indicadores) • Lactococcus: importantes no processamento de alimentos • Leuconostoc: não são patogênicos. Importante para fermentação. • Pediococcus: encontrados em picles, cerveja e vinho • Streptococcus • Vagococcus Leuconostoc Staphylococcus aureus Enterococcus faecalis Grupos bacterianos de importância em alimentos Prof. Jossana Sousa (2016) 37 Clostridium botulinumBacillus Grupos bacterianos de importância em alimentos Bacilos Gram-positivos produtores de esporos • Bacillus: espécies patogênicas, deteriorantes e outras empregadas na produção de alimentos. • Clostridium (anaeróbios estritos): C. perfringes e C. botulinum • Desulfotomaculum: reduz compostos sulfurados. Enegrecimento de alimentos enlatados. Prof. Jossana Sousa (2016) 38 Bacilos Gram-positivos não esporulados • Brochothrix: deterioração de carnes • Carnobacterium: alimentos embalados à vácuo • Lactobacillus: bastante úteis na produção de alimentos (fermentação) • Listeria: causa listeriose Lactobacillus Listeria Grupos bacterianos de importância em alimentos Prof. Jossana Sousa (2016) 39 Referências • FORSYTHE, S. J. Microbiologia da segurança dos alimentos. 2 ed. Porto Alegre: Artmed, 2013. • FRANCO, B. D. G. M.; LANDGRAF, M. F. Microbiologia dos alimentos. 2 ed. São Paulo: Editora Atheneu, 2002. • JAY, J. M. Microbiologia de alimentos. 6 ed. Porto Alegre: Artmed, 2005. • PELCZAR, M. J.; CHAN, E. C. S.; KRIEG, N. R. Microbiologia - conceitos e aplicações. 2ª ed. São Paulo: Pearson Makron Books, 1997. Prof. Jossana Sousa (2016) 40 Dúvidas? Prof. Jossana Sousa (2016) 41
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