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UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE – UFCG CENTRO DE CIÊNCIAS E TECNOLOGIA AGROALIMENTAR – CCTA UNIDADE ACADÊMICA DE TECNOLOGIA DE ALIMENTOS – UATA RELATÓRIO DA AULA PRÁTICA: COLORAÇÃO DE GRAM Disciplina:Microbiologia Geral Professor:Bruna Sousa Alunos: Alinne Karen Gomes de Castro Hozana Maria Figueiredo Silva Jackeline Alves da Silva Mikaely Fernandes da Silva POMBAL – PB 2017 INTRODUÇÃO A técnica de coloração de Gram foi desenvolvida em 1884, pelo bacteriologista Hans Christian Gram e é a coloração diferencial mais utilizada em bacteriologia. Esta coloração separa as bactérias em dois grandes grupos: as Gram-positivas (Gram+ ,que coravam-se em roxo) e as Gram-negativas (Gram-, que coravam-se em vermelho). Este método de coloração é o método de escolha para a identificação de bactérias, porém deve ser utilizado em bactérias em fase de crescimento (Vermelho et al., 2006). A partir do advento da microscopia eletrônica e do aperfeiçoamento das técnicas de análise bioquímica dos diferentes componentes celulares, foi verificado que esta diferença entre as bactérias Gram positivas e Gram negativas era, provavelmente, devida às diferenças de composição e estrutura das paredes celulares. As paredes das bactérias Gram positivas são fundamentalmente compostas por uma espessa camada de peptidoglicano enquanto as bactérias Gram negativas possuem uma fina camada de peptidoglicano e, exteriormente, uma membrana externa. O método de coloração de Gram é considerado um dos mais importantes dentro dos laboratórios de análises clínicas e microbiologia. O objetivo da prática foi observar e identificar se as bactérias presentes em um esfregaço de determinada cultura são Gram positivas ou Gram negativas, através do método de coloração de Gram. METODOLOGIA - O material biológico foi coletado esfregando com o auxilio de uma alça de inoculação, depois foi feito um esfregaço no centro de uma lâmina de vidro, fixou-se o esfregaço pelo calor moderado de um bico de Busen; - Cobriu o esfregaço com cristal violeta (1º corante) por 1 minuto; - Lavou com água destilada; - Cobriu com lugol por 1 minuto; - Lavou com água destilada; - Cobriu o esfregaço com álcool por 1minuto; - Lavou com água destilada; - Cobrir o esfregaço com fucsina ou safranina (2º corante) por 30 segundos; - Lavou com água destilada; - Deixou secar; Observou ao microscópio. RESULTADOS E DISCUSSÃO A lâmina foi observada, e nela foram encontradas muitas bactérias Gram-negativas, de coloração rosada. O primeiro corante foi arrastado pelo álcool, sendo posteriormente recoradas pelo segundo corante a (fucsina). Com base no que foi visto nos resultados, as Gram negativas possuem uma fina camada de peptidoglicano que as fazem eliminar os corantes mais rápido. CONCLUSÃO Todos os passos e procedimentos necessários para o método de coloração de Gram foram feitos, Os objetivos foram alcançados, obtendo bactérias Gram negativas onde foram bem visualizadas. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS Coloração de Gram. Disponível em < http://www.dbm.ufpb.br/microbio/Download/Colora%E7%E3o%20de%20Gram.pdf > Acesso em 18 de Junho de 2017. Prática de coloração de Gram. Disponível em < http://www.uff.br/bacteriologia/aulaspraticas/coloracaodegram.htm > Acesso em 18 de Junho de 2017. VERMELHO, A.B.; PEREIRA, A.F.; COELHO, R.R.R.; SOUTO-PADRÓN. T.C.B.S.. Práticas de Microbiologia – Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2006.
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