Efeito da Concentração de Substrato

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20/05/2015 Efeito da Concentração de Substrato
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Efeito da Concentração de Substrato na Atividade
Enzimática
 
Há muitos anos, foi observado experimentalmente que para uma determinada concentração de
enzima, o aumento da concentração de substrato (S) causa um aumento gradual na velocidade inicial
(V0) da reação catalisada, como mostram as figuras 1 e 2. 
 
Os valores de V0 são calculados pela inclinação das curvas de formação de produto com o tempo. Na
figura 1, essas curvas são mostradas para 4 concentrações de substrato, como indicado na legenda
do gráfico.
 
O gráfico de V0 em função de diferentes concentrações de substrato está mostrado na figura 2.
 
Figura 1 Figura 2
 
Podemos ver que V0 aumenta até que tende a atingir um patamar. A partir daí, V0 não se modifica
muito, mesmo que sejam adicionadas quantidades crescentes de substrato. Essa situação é
considerada como estando se aproximando da velocidade máxima da reação (Vmáx), uma situação
em que todas as enzimas (E) estão com substratos ligados em seus sítios ativos, formando o
complexo ES:
 
A equação 1 descreve a relação entre V0 e a concentração de substrato, permite determinar a Vmáx
e, também, a constante de Michaelis (Km):
 
  eq. 1
 
 
Não é possível determinar Vmáx a partir do gráfico da Figura 2. O que se faz, é utilizar o Gráfico dos
Duplos Recíprocos (ou gráfico de Lineweaver­Burk). Esse gráfico é uma representação linear da
equação de Michaelis­Menten (eq. 1):
 
      eq. 2
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Essa é uma equação de reta (y = ax + b) em que
a inclinação (a) é igual a Km/Vmáx e o intercepto
(b) é igual a 1/Vmáx.
Os dados da Figura 2 estão representados ao lado
na forma linear. Essa é a forma mais comum de
se determinar os parâmetros cinéticos (Km e
Vmáx). 
 
Caso seja utilizada uma concentração maior de enzimas,Vmáx será atingida com maiores
concentrações de substrato (veja Efeito da Concentração de Enzima).  
 
Faça o estudo dirigido de Cinética Enzimática deste site para aprender mais sobre Km e Vmáx e para
entender a forma da .
 
Texto: Profa. M. Lucia Bianconi
e­mail: enzimas@bioqmed.ufrj.br
Página atualizada em: 17/10/2006
 
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