5. gram

Prévia do material em texto

Bactérias GRAM 
Sheila P.P.Tiusso 
 Chamadas de Gram positiva e negativa. 
 Hans Christian Joachim Gram, em 1884, quem elaborou o 
processo de colorir e descolorir as bactérias. 
 Cerca de 90 a 95% das bactérias Gram-negativas são 
patogênicas e muitas Gram-positivas não são patogênicas. 
Sheila P.P.Tiusso 
Ajuda a reconhecer as características de cada caso 
de infecção 
Composição 
química 
Estrutura 
Permeabilidade Metabolismo 
Patogenicidade 
Sheila P.P.Tiusso 
GRAM POSITIVAS 
Composição da parede celular: 
 
 Peptidioglicano(cruzadas e de rede rígida e forte, espessa) 
(15% a 20% da massa seca da bactéria)- responsável pela forma 
das células confere rigidez ao corpo bacteriano 
Facilitar a ligação e regulação 
de entrada e saída de 
cátions(carga positiva) na 
célula 
 Ácidos teicóicos(50%)- ligada aos lipídeos da 
membrana plasmática. 
 Ácidos 
lipoteicóicos 
Sheila P.P.Tiusso 
Facilitar a ligação e regulação 
de entrada e saída de 
cátions(carga positiva) na 
célula 
Funções do ácido teicóico 
Induz formação de 
anticorpos 
Sheila P.P.Tiusso 
Sheila P.P.Tiusso 
Sheila P.P.Tiusso 
Sheila P.P.Tiusso 
Gram negativa 
Composição da parede celular: 
 
 Peptidioglicano(5%)- parede não tão rígida= fraca 
 Lipoproteina, polissacarídeos e fosfolipídeos 
 (membrana externa) 
Sheila P.P.Tiusso 
Constituída por múltiplas camadas bastante 
complexas. 
A membrana externa é uma dupla camada, 
contendo fosfolipídeos e proteínas- barreira seletiva 
que controla a passagem de algumas substâncias. 
Na camada externa, o lipopolissacarídeo. 
Sheila P.P.Tiusso 
Camada interna- camada de fosfolipídeos e lipoproteína, 
que está ancorada ao peptidioglicano. 
Sheila P.P.Tiusso 
Resumindo: 
 Possui uma camada dupla de fosfolipídios 
 Outra camada é formada por lipopolissacarídeos 
 
Sheila P.P.Tiusso 
DIFERENÇAS ENTRE BACTÉRIAS GRAM 
POSITIVAS E GRAM NEGATIVAS 
Positivas Negativas 
Múltiplas camadas 
peptidioglicano(rigidez) 
múltiplas 
camadas(peptidioglicano, 
lipoproteína, membrana 
externa e 
lipopolissacarídeo) 
Parede espessa Parede pouco espessa 
Adquire o primeiro 
corante(roxo- violeta de 
genciana ) 
Adquire o segundo 
corante(vermelho- 
safranina) 
Aderência Endotoxinas(patogênicas) 
Sheila P.P.Tiusso 
Sheila P.P.Tiusso 
Toxinas produzidas por bactérias: 
Endotoxinas e exotoxinas. 
Ambas alteram o metabolismo normal das células ou dos tecidos do 
hospedeiro, danificando-os. 
As endotoxinas são secretadas exclusivamente pelas bactérias Gram-
negativas, geralmente estão ligadas à membrana externa da parede 
da célula, só sendo liberadas após destruição das mesmas. 
Febre, dores, choques e vasodilatação. 
Já as exotoxinas podem ser produzidas tanto por bactérias Gram positivas, 
quanto por bactérias Gram negativas. 
Em grandes quantidades, septicemia e à 
morte 
 
Sheila P.P.Tiusso 
Sheila P.P.Tiusso 
Técnica de GRAM 
 Flambar a alça de platina, 
 Resfriar em um tubo com água esterilizada ou salina. 
Montagem da lâmina 
Sheila P.P.Tiusso 
Sheila P.P.Tiusso 
 Espalhar com a alça em movimentos circulares em 
um só sentido, obtendo-se assim um esfregaço de 
forma oval, uniforme e fino. 
 Retirar uma amostra da 
cultura com a alça 
 Procedimento realizar 
próximo da chama do 
bico de Bunsen. 
 Passar no Bico de Bunsen até secar a amostra 
Fixar Preservar 
a 
morfologia 
Sheila P.P.Tiusso 
Método 
1. Bactéria + violeta de Genciana/ Violeta cristal – 
1 min. 
2. Lavar com água destilada ou corrente 
3. Lugol- 1 min. 
Coram 
em 
violeta 
4. Lavar com água corrente 
5. Descoram com álcool acetona(lavando) 
6. Lavar com água corrente 
Sheila P.P.Tiusso 
7. Cobrir com safranina ou fucsina por 1 min. 
8. Lavar com água corrente 
9. Secar e observar ao aumento de 1000 X 
GRAM + cora-se em roxo 
GRAM – cora-se em róseo 
Sheila P.P.Tiusso 
Sheila P.P.Tiusso 
Retenção ou não do corante depende da sua 
constituição, espessura, porosidade 
Reagentes: 
+ parede simples - complexa 
Violeta Genciana- 
Ocorre a desidratação das proteínas e do 
peptidioglicano e isso causa o fechamento dos 
poros existentes na parede celular não permitindo 
que o corante saia da célula Gram + 
Parede espessa retêm o corante violeta 
Sheila P.P.Tiusso 
Lugol 
Fixador 
Sheila P.P.Tiusso 
 Descora as membranas externas de Gram – 
não descora as Gram + 
- Dissolve os lipídeos(presente na -), aumentando a 
porosidade remove o corante. 
Álcool acetona 
- Desidrata a parede celular, diminuindo a 
porosidade e permeabilidade, permanecendo 
corado(+) 
Gram Positivas Gram negativas 
Adquire a coloração do 
primeiro corante 
Adquire a coloração do 
segundo corante 
é única composta por 
peptidioglicano 
parede celular está 
composta por uma 
camada de 
peptidioglicano, 
lipoproteína, outra 
membrana externa e 
lipopolissacarídeo. 
parede celular espessa menos espessa 
Constituída por 
exotoxina, composta 
pelo ácido lipoteinóico, 
tem como característica 
principal a aderência. 
constituídas por uma 
endotoxina, o LPS, que 
lhes confere a 
propriedade de 
patogenicidade 
 
roxas vermelhas 
Fácil de penetrar o 
antibiótico mais fácil de 
morrer 
Difícil de penetrar o 
antibiótico mais difícil 
morrer