RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA MÉTODO GRAM

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MICROBIOLOGIA - RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA
	ETAPA: 02
	
ALUNO:__________________________________________________________________________________
	AULA PRÁTICA 
	TEMA: Método Gram
	DATA ____/_____/_____
	VISTO:
	
Informação: A coloração de Gram é um método de coloração de bactérias desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram em 1884, e que consiste no tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes: cristal violeta, lugol, etanol-acetona e fucsina básica. Essa técnica permite a separação de amostras bacterianas em Gram-positivas e Gram-negativas e a determinação da morfologia e do tamanho das amostras analisadas. O método da coloração de Gram é baseado na capacidade das paredes celulares de bactérias Gram-positivas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com etanol-acetona enquanto que as paredes celulares de bactérias Gram-negativas não o fazem. 
	
OBJETIVO DA AULA: Executar a técnica da coloração de Gram e compreender a importância de realizar a referida técnica a partir de um material submetido a exame microbiológico.
	MATERIAIS: 
- 40 Lâminas 
- 02 Pinças estéreis
- 40 Swabs estéreis 
- 02 almotolias (pissete) com álcool absoluto
- 02 almotolias (pissete) com água destilada
- 02 almotolias (pissete) com solução salina estéril a 0,9%
- Lugol de Gram
- Corante cristal violeta
- Corante fucsina
 
- Óleo de cedro (óleo de imersão)
- Microscópio
- Bico de Bunsen
	METODOLOGIA:
 PREPARO E FIXAÇÃO DO ESFREGAÇO
Transferir uma alçada da cultura ou uma colônia da placa para uma lâmina de microscópio limpa.
Com o auxílio da alça, espalhar a cultura. (Se tiver sido colhida colônia da placa, adicionar salina estéril para facilitar o espalhamento).
Passar a lâmina com o esfregaço sobre a chama do Bico de Bunsen, até que este esteja completamente seco.
TÉCNICA DE COLORAÇÃO:
 1. Recobrir a lâmina com a solução de Cristal Violeta e deixar por trinta segundos a um minuto. Escorrer o excesso de corante. 
2. Sem lavar com água, verter sobre a lâmina a solução de Lugol, deixar agir durante um minuto, verter fora o excesso de solução. 
3. Ainda sem lavar a preparação, recobrir a lâmina com o Álcool absoluto e lavar a lâmina com esta solução até que a cor roxa cesse de desprender-se. 
4. Lavar com água. 
5. Corar com a Fucsina, durante 30 segundos.
 6. Escorrer o corante, lavar com água. Secar e proceder a leitura com objetiva de imersão.
	ANÁLISE DOS RESULTADOS:
	CONCLUSÃO