Baixe o app para aproveitar ainda mais
Prévia do material em texto
IMUNO-HEMATOLOGIA Sistemas de grupos sanguíneos DEFINIÇÃO Estudo e classificação dos grupos sanguíneos através de reações imunológicas entre antígenos e anticorpos. HISTÓRICO • Início do século XX – Landsteiner verifica a incompatibilidade sanguínea entre as pessoas •Reação de amostras de sangue de diversas pessoas Aglutinação • Substâncias do plasma X Substâncias presentes na membrana das hemácias •1901, Landsteiner descreveu os tipos A, B e O das hemácias, posteriormente, Decastello e Sturli descreveram o tipo AB. Importância na Transfusão: • Definir o fenótipo, sobretudo ABO e RhD dos doadores e receptores de sangue. • Pesquisar a presença de anticorpos no plasma do receptor contra antígenos presentes na hemácias do doador. • Evitar a reação transfusional, que pode ser leve a grave, podendo ocasionar a morte do receptor. ANTÍGENOS Substâncias reconhecidas pelo organismo como “não-próprias”, podendo se ligar especificamente a uma molécula de anticorpo ou receptor de célula T. • Antígeno completo ou imunógeno: é capaz de ativar uma resposta imune. • Antígeno incompleto: não é capaz de ativar uma resposta imune. • Antígenos Eritrocitários: antígenos de grupos sanguíneos sendo A, B e D os principais. ANTICORPOS OU IMUNOGLOBLULINAS São substâncias produzidas a partir da ativação dos glóbulos brancos do sangue (linfócitos B), em resposta à introdução de um dado antígeno. • Funções: Ligar-se ao antígeno Neutralização do Ag Opsonização Ativação dos FC Pertencem a fração gama(gamaglobulinas), podendo ser classificadas : IgG, IgM, IgE, IgA, IgD. IgM • Molécula pentamérica • Capaz de ativar o sistema complemento • Não atravessa a barreira placentária • São Ac “frios” (a fixação do Ac sobre o Ag é máxima em baixa temperatura 4 a 18°C) IgG • Principal imunoglobulina sérica (75%) • Molécula monomérica • Atravessa a barreira placentária • São produzidas em respostas secundárias ANTICORPOS OU IMUNOGLOBLULINAS • Anticorpos naturais: Ac formados contra antígenos não presentes no organismo, sem necessidade de contato prévio com o Ag. Surgem em resposta a antígenos presentes em bactérias e alimentos com estrutura semelhante a dos grupos sanguíneos. Ex: Ac sistema ABO (em geral da classe IgM) • Anticorpos adquiridos: Formam-se após a ativação do sistema imune. Ex: Ac adquiridos por resposta imune a transfusão e/ou gravidez. •Anticorpos irregulares: anticorpos formados a partir da exposição a um antígeno. A ocorrência não é esperada. Ex: aloimunização pelo sistema Rh ANTICORPOS OU IMUNOGLOBLULINAS • Anticorpos completos: promovem aglutinação de hemácias em meio salino. Ex: IgM • Anticorpos incompletos: reagem com antígeno mas não promovem aglutinação de hemácias. Precisam de um meio artificial que promova a aglutinação para visualização da reação. Ag-Ac. Ex: IgG Fenômeno da aglutinação de hemácias (HEMAGLUTINAÇÃO) • É a técnica que objetiva detectar e quantificar as reações Ag- Ac • A aglutinação das hemácias ocorre quando há uma diminuição das forças de repulsão das hemácias TESTE DA ANTIGLOBULINA HUMANA (TAG) • Coombs (1945) : Sensibilização de animais com injeções de imunoglobulinas humanas. Levando a produção de Ac contra a fração Fc das mesmas. • Soro de coombs ( Ac contra Ac humanos – antiglobulinas humanas) Direto- Hemácias sensibilizadas por Ac ou Fc (DHPN) • Teste da antiglobulina Indireto- Ac no soro/plasma (identificação de ac irregulares) Sistema ABO • Primeiro sistema de grupo sanguíneo a ser descoberto em 1900 • É o principal sistema de grupo sanguíneo • Os genes ABO localizados no cromossomo 9, tem relação de codominância. (A1, A2, B,O) • Gene O é considerado silencioso • Possui anticorpos de ocorrência “natural” • Os Ac ABO são dirigidos contra os Ag presentes nas hemácias do próprio individuo. São de classe IgM e IgG, ativos a 37oC e capazes de fixar e ativar o complemento, provocando hemólises intravasculares severas em casos de incompatibilidades transfusionais. Antígenos dos sistema ABO • Presentes na membrana de diversos tecidos • Encontrados na forma solúvel na saliva, leite, lágrima, urina, líquido amniótico, etc. • São produtos secundários dos genes ABO • Os produtos primários são enzimas (glicosiltransferases) capazes de adicionar carboidratos sobre uma estrutura precursora na membrana da hemácia • A expressão dos genes ABO depende da ação de outro gene, o gene H (FUT1), localizado no cromossomo 19 Biossíntese dos Ag do sistema ABO A- Ag H B- Ag A C- Ag B GENÓTIPO FENÓTIPO IA IA IA i Sangue A IB IB IB i Sangue B IA IB Sangue AB i i Sangue O Relação entre os Genótipos Tipo sanguíneo Genótipo Aglutinogênio (na membrana das hemácias) Aglutinina (no plasma sanguíneo) A IA IA ou IA i A Anti-B B IB IB ou IB i B Anti-A AB IA IB AB Ausente O ii Ausência Anti-A e Anti-B Determinação do fenótipo ABO • Prova Direta :Detecção de antígenos através do uso de de anti-soros conhecidos • Prova Reversa: Detecção de anticorpos através do uso de hemácias conhecidas MÉTODOS DE TIPAGEM TUBOS GEL CENTRIFUGAÇÃO MICROPLACAS Tubo Mais difundida. Muito utilizada para resolver problemas nos resultados. Realizada em pipetagem manual e de rotinas pequenas. Microplaca Mais utilizada para doadores, pode ser para sistemas automatizados ou pipetarem manual . Colunas de aglutinação Gel centrifugação, para pipetagem manual ou sistema automatizado. Principais variações das técnicas TUBOS 15 SEGUNDOS MICROPLACA 1 a 2 MINUTOS COLUNA 9 a 10 MINUTOS Tempo médio de centrifugação TUBOS 2,5 a 5% MICROPLACA 1 a 3% COLUNA 0,8 a 1,2% ou 2,5 a 5% Concentração da suspensão de hemácias Sistema Rhesus Rh Esse sistema sanguíneo recebeu esse nome por ter sido o resultado de pesquisas feitas com uma espécie de macacos, a MACACARhesus. Por volta de 1940, Landsteiner e Wiener , injetando sangue desse macaco em cobaias, verificaram que elas produziam anticorpos a algum antígeno do sangue do macaco. Desse experimento esses pesquisadores concluíram que no sangue do macaco havia um antígeno que induzia a produção de anticorpos na cobaia. Esse antígeno foi denominado fator Rh e o anticorpo, anti-Rh. Os sangues que aglutinaram em presença do fator Rh (que correspondem aproximadamente 85% da população) foram denominados Rh positivos (Rh+) e os 15% que não apresentaram reação foram denominados negativos (Rh-) por não possuírem fator Rh. Reações Rh O fator Rh é encontrado nas hemácias, verificando esses pesquisadores que ele obedece às leis da hereditariedade, sendo o Rh positivo um fator dominante em relação ao Rh negativo. Fenótipos Genótipos Rh+ RR, Rr Rh- rr Sistema Rh Quando o indivíduo é Rh+, o Ag D está presente. Após os Ag do sistema ABO, o Ag D é o mais importante na prática transfusional. DHRN (eritroblastose fetal) Quando a mãe Rh- gera um bebê Rh+. O sangue positivo do bebê entra na circulação da mãe durante o parto Esta exposição estimula a produção de Anti-D pela mãe. Neste caso, os anticorpos da mãe vão entrar na circulação do feto e “atacarão” as células vermelhas do bebê. O efeito sobre o feto pode ser leve ou severo e pode variar de anemia a lesões cerebrais. Sistema Rh • É o mais complexo sistema de grupos sanguíneos • Depois do sistema ABO, é o de maior importância clinica • Sistema composto de aproximadamente 49 antígenos • Cinco deles (D,E,e,C,c) são responsáveis por 99% dos problemas clínicos associados ao sistema Rh • É exclusivamente eritrocitário( Associado com o citoesqueleto da membrana pela anquirina e proteína 4.2) • Produzido a partir 10º semana de vida IU Variantes fenotípicas do Ag D 1)D fraco • Indivíduos portadores de D fraco apresentam menor expressão de antígenos D nas hemácias D normal: 10.000 a 25.000 sítios antigênicos D fraco: 66 a 5.000 sítios antigênicos • Variação qualitativa do antígeno RhD que produz uma alteração quantitativa de sítios antigênicos expressos na membrana eritrocitária. • Indivíduos com esse fenótipo não produzem anti D caso recebam transfusão de hemácias D normal. 2)D Parcial • Caracterizados pela ausência de um ou mais epítopos do antígeno D que foram substituídos por epítopos da proteína CcEe • Alteração qualitativa da proteína RhD na porção extracelular • Produção de anticorpos anti-D contra as subunidades ausentes. Variantes fenotípicas do Ag D Anticorpos Rh • Aloimunização por transfusão sanguínea ou gestação • Classe IgG • Responsáveis pela doença hemolítica do recém- nascido • Clinicamente significativos • Reagem otimamente a 37°C • Não fixam complemento • Hemólise extravascular • Reação transfusional hemolítica retardada • Uma vez formados, persistem por vários anos Condição: pai Rh+, mãe Rh- e filho Rh+. 1) Mãe Rh- é sensibilizada (exposta ao fator Rh por uma transfusão ou primeira gestação de filho Rh +) 2) Mãe começa a produzir anti Rh 3) Em uma segunda gestação de filho Rh +, os anti Rh produzidos passarão através da placenta atingindo o sangue da criança Rh+. Ocorrerá a destruição das hemácias do feto (icterícia, anemia hemolítica, insuficiência hepática, hepatoesplenomegalia e liberação de eritroblastos). DHPN Procedimento após o parto Administração de injeção intravenosa com anticorpos anti-Rh que provocarão a destruição das hemácias fetais presentes na circulação sanguínea materna. Antígenos eritrocitários A B A + B H Anticorpos plasmáticos Anti-B Anti-A -- Anti-A + anti-B + anti-A,B Fenótipos A B AB O Sistema ABO: grupos ou fenótipos eritrocitários Tipagem direta Tipagem reversa Grupos Anti-A Anti-B Anti-A,B A1 B A B AB O Anti-soros Hemácias-padrão Sistema ABO: tipagens direta e reversa Sistema ABO: reagentes para as tipagens direta e reversa Tipagem direta Anti-soro anti-A Anti-soro anti-B Anti-soro anti-A,B Tipagem Reversa Hemácias padrão A1 Hemácia padrão B Sistema ABO: método de tipagem em lâminas ABA OB Vantagens Fácil realização Fácil interpretação Interpretação subjetiva Desvantagens Maior risco de contato com a amostra Inadequada para prova reversa Difícil interpretação de reações fracas Sistema ABO: método de tipagem em tubos ABA O Vantagens Fácil realização e interpretação Reações positivas fortes Interpretação menos subjetiva Desvantagens Necessidade de equipamento Resíduos de detergentes nos tubos Difícil interpretação de reações fracas Sistema ABO: método de tipagem em colunas de gel Vantagens Procedimento padronizado Menor número de pipetagens Reações estáveis por mais tempo Intepretação não é subjetiva Desvantagens Custo elevado Necessidade de equipamentos A D (Rh0) neg A2 D (Rho) neg Sistema ABO: regras para compatibilidade transfusional O A B AB O AB BA Sistema ABO: efeitos da transfusão incompatível O rim de um doador é transplantado em um paciente que tenha anticorpos contra os antígenos de grupos sangüíneos do doador (Ex: paciente do grupo O e doador do grupo A). Os anticorpos do paciente (anti-A) reagem com os antígenos expressos nas células endoteliais, iniciando uma resposta inflamatória que leva à oclusão dos vasos sangüíneos do órgão enxertado. O enxerto torna-se ingurgitado e de cor púrpura devido à hemorragia. Perda do enxerto. Rejeição hiperaguda: incompabibilidade no sistema ABO em transplante renal FENÓTIPO BOMBAIM O Fenótipo Bombaim Grupo sanguíneo hh, ou grupo sanguíneo de Bombaim, é um fenômeno raro, primeiramente descoberto na cidade de Bombaim, Índia, pelo qual indivíduos que possuem genótipo referente aos grupos sangüíneos "A", "B", ou "AB" expressam o grupo sangüíneo “O”. O fenótipo, Bombaim é um fenômeno raro, descoberto na cidade indiana de Bombaim, por isso o nome. Esse fenômeno faz com que indivíduos com o genótipo dos grupos sanguíneos “A”, “B” e “AB” expressem o fenótipo do grupo sanguíneo “O”. Na Índia a prevalência desse fenótipo é de 1:10.000 e na Europa é de 1:1.000.000. FENÓTIPO BOMBAIM FENÓTIPO BOMBAIM O alelo H produz uma enzima (enzima H) que transforma uma substância precursora em antígeno H, que, por sua vez, é transformado em antígeno A ou B por ação, respectivamente, de enzimas sintetizadas sob o comando dos alelos IA ou IB. Como o alelo i é inativo, não promove qualquer transformação no antígeno H, que permanece presente nas hemácias dos indivíduos do verdadeiro sangue tipo “O”. FENÓTIPO BOMBAIM Pessoas com o fenótipo Bombaim não produzem a enzima ativa (H) que transformaria a substância precursora em antígeno H. Sendo assim, a sua ausência [da enzima] faz com que essas pessoas não apresentem os antígenos “A” e “B” nem o “H”, em suas hemácias, mesmo possuindo os alelos responsáveis pela síntese dessas substâncias. Essas pessoas não produzem a enzima ativa (H) que transformaria uma substância precursora em antígeno H. FENÓTIPO BOMBAIM Os antígenos A e B são produzidos a partir desse antígeno. Desse modo, a sua ausência faz com que essas pessoas não apresentem quer o antígeno A, quer o B, nos seus glóbulos vermelhos, mesmo que possuam alelos referentes à síntese dessas substâncias FENÓTIPO BOMBAIM FENÓTIPO BOMBAIM O paciente que receber sangue contendo um antígeno que jamais esteve no seu próprio sangue terá uma reação imune. Assim sendo, os indivíduos com o fenótipo de Bombaim podem doar sangue para qualquer membro do sistema ABO (a não ser que outro fator sangüíneo, como o Rh, seja incompatível), mas não podem receber de nenhum membro do sistema ABO (cujo sangue contém sempre um ou mais antígenos A, B e H); somente recebem sangue de indivíduos com o fenótipo de Bombaim O teste para detectar se uma pessoa é realmente “O” ou falso “O” é feito aplicando-se o anticorpo anti-H em uma gota de sangue. Se houver aglutinação, o indivíduo é um “O” verdadeiro, ou seja, “ii”. Se não ocorrer aglutinação, ele é falso “O”, podendo ser IAIA, IAi, IBIB, IBi ou IAIB. FENÓTIPO BOMBAIM francisco.hslab@gmail.com 01. Por que o indivíduo do grupo O pode doar seu sangue a qualquer pessoa? Por que uma pessoa do grupo AB pode receber sangue de qualquer tipo? Resp.: “O” é doador universal por não apresentar aglutinogênios nas hemácias. “AB” é receptor universal por não possuir aglutininas no plasma. 02. Um homem do grupo sangüíneo AB é casado com uma mulher cujos avós paternos e maternos pertencem ao grupo sangüíneo O. Esse casal poderá ter apenas descendentes: a) do grupo O; b) do grupo AB; c) dos grupos AB e O; d) dos grupos A e B; e) dos grupos A, B e AB. 03. Um banco de sangue possui 5 litros de sangue tipo AB, 3 litros tipo A, 8 litros tipo B e 2 litros tipo O. Para transfusões em indivíduos dos tipos O, A, B e AB estão disponíveis, respectivamente: a) 2, 5, 10 e 18 litros; b) 2, 3, 5 e 8 litros; c) 2, 3, 8 e 16 litros; d) 18, 8, 13 e 5 litros; e) 7, 5, 10 e 11 litros. 04. Uma mulher que nunca recebeu transfusão sangüínea teve três filhos. O primeiro e o terceiro nasceram normais e o segundo, com eritroblastose fetal. Quais são os fenótipos e os genótipospara o fator Rh dos indivíduos acima citados? RESP.: Mulher Rh- (rr); Marido Rh+ (Rr); 1° filho Rh+ (Rr); 2º filho Rh+ (Rr); 3º filho Rh- (rr). 05. Para que haja possibilidade de ocorrência de eritroblastose fetal (doença hemolítica do recém- nascido), é preciso que o pai, a mãe e o filho tenham, respectivamente, os tipos sangüíneos: a) Rh+, Rh-, Rh+ b) Rh+, Rh-, Rh- c) Rh+, Rh+, Rh+ d) Rh+, Rh+, Rh- e) Rh-, Rh+, Rh+ 06. Assinale a afirmativa incorreta: a) Pessoas pertencentes ao grupo sanguíneo B possuem aglutinogênios B em suas hemácias e aglutinina anti-A em seu plasma sanguíneo. b) Pessoas do grupo sanguíneo AB podem ser chamadas de receptores universais por não apresentarem nenhum tipo de aglutininas em seu plasma sanguíneo. c) Pessoas do grupo sanguíneo do tipo B podem doar sangue para pessoas com os tipos sanguíneos do tipo B e AB e podem receber de B e O. d) Pessoas do tipo sanguíneo do tipo O apresentam aglutinogênios do tipo anti-A e anti-B e por isso são chamados de doadores universais. De acordo com seus conhecimentos sobre transfusão sanguínea, complete as frases abaixo. a) Uma pessoa do grupo sanguíneo A pode receber sangue de __ e __, e doar sangue para __ e __. b) Uma pessoa do grupo sanguíneo __ pode receber sangue de B e __, e doar sangue para __ e AB. c) Uma pessoa do grupo sanguíneo __ pode receber sangue de __ e doar sangue para todos os outros tipos sanguíneos. d) Uma pessoa do grupo sanguíneo __ pode doar sangue para todos os outros grupos sanguíneos, mas pode receber somente de __. francisco.hslab@gmail.com
Compartilhar