Buscar

APRESENTAÇÃO DE TIPAGEM SANGUÍNEA

Prévia do material em texto

IMUNO-HEMATOLOGIA
Sistemas de grupos 
sanguíneos 
DEFINIÇÃO
Estudo e classificação dos grupos sanguíneos através de reações 
imunológicas entre antígenos e anticorpos.
HISTÓRICO
• Início do século XX – Landsteiner verifica a incompatibilidade
sanguínea entre as pessoas
•Reação de amostras de sangue de diversas pessoas Aglutinação
• Substâncias do plasma X Substâncias presentes na membrana das
hemácias
•1901, Landsteiner descreveu os tipos A, B e O das hemácias,
posteriormente, Decastello e Sturli descreveram o tipo AB.
Importância na Transfusão:
• Definir o fenótipo, sobretudo ABO e RhD dos doadores e receptores de
sangue.
• Pesquisar a presença de anticorpos no plasma do receptor contra antígenos
presentes na hemácias do doador.
• Evitar a reação transfusional, que pode ser leve a grave, podendo ocasionar a
morte do receptor.
ANTÍGENOS
Substâncias reconhecidas pelo organismo como “não-próprias”, podendo se
ligar especificamente a uma molécula de anticorpo ou receptor de célula T.
• Antígeno completo ou imunógeno: é capaz de ativar uma resposta
imune.
• Antígeno incompleto: não é capaz de ativar uma resposta imune.
• Antígenos Eritrocitários: antígenos de grupos sanguíneos sendo A, B e
D os principais.
ANTICORPOS OU IMUNOGLOBLULINAS
São substâncias produzidas a partir da ativação dos glóbulos brancos do 
sangue (linfócitos B), em resposta à introdução de um dado antígeno.
• Funções:
Ligar-se ao antígeno Neutralização do Ag
Opsonização
Ativação dos FC
Pertencem a fração gama(gamaglobulinas), podendo ser classificadas : 
IgG, IgM, IgE, IgA, IgD.
IgM
• Molécula pentamérica
• Capaz de ativar o sistema complemento
• Não atravessa a barreira placentária
• São Ac “frios” (a fixação do Ac sobre o Ag é máxima em baixa 
temperatura 4 a 18°C)
IgG
• Principal imunoglobulina sérica (75%)
• Molécula monomérica
• Atravessa a barreira placentária
• São produzidas em respostas secundárias
ANTICORPOS OU IMUNOGLOBLULINAS
• Anticorpos naturais: Ac formados contra antígenos não presentes no organismo,
sem necessidade de contato prévio com o Ag. Surgem em resposta a antígenos
presentes em bactérias e alimentos com estrutura semelhante a dos grupos
sanguíneos.
Ex: Ac sistema ABO (em geral da classe IgM)
• Anticorpos adquiridos: Formam-se após a ativação do sistema imune.
Ex: Ac adquiridos por resposta imune a transfusão e/ou gravidez.
•Anticorpos irregulares: anticorpos formados a partir da exposição a um antígeno. A
ocorrência não é esperada.
Ex: aloimunização pelo sistema Rh
ANTICORPOS OU IMUNOGLOBLULINAS
• Anticorpos completos: promovem aglutinação de hemácias em meio
salino. Ex: IgM
• Anticorpos incompletos: reagem com antígeno mas não promovem
aglutinação de hemácias. Precisam de um meio artificial que promova a
aglutinação para visualização da reação. Ag-Ac. Ex: IgG
Fenômeno da aglutinação de hemácias
(HEMAGLUTINAÇÃO)
• É a técnica que objetiva detectar e quantificar as reações Ag-
Ac
• A aglutinação das hemácias ocorre quando há uma
diminuição das forças de repulsão das hemácias
TESTE DA ANTIGLOBULINA HUMANA (TAG)
• Coombs (1945) : Sensibilização de animais com injeções de imunoglobulinas
humanas. Levando a produção de Ac contra a fração Fc das mesmas.
• Soro de coombs ( Ac contra Ac humanos – antiglobulinas humanas)
Direto- Hemácias sensibilizadas por Ac ou Fc (DHPN)
• Teste da antiglobulina
Indireto- Ac no soro/plasma (identificação de ac irregulares)
Sistema ABO
• Primeiro sistema de grupo sanguíneo a ser descoberto em 1900
• É o principal sistema de grupo sanguíneo
• Os genes ABO localizados no cromossomo 9, tem relação de codominância.
(A1, A2, B,O)
• Gene O é considerado silencioso
• Possui anticorpos de ocorrência “natural”
• Os Ac ABO são dirigidos contra os Ag presentes nas hemácias do próprio
individuo. São de classe IgM e IgG, ativos a 37oC e capazes de fixar e ativar
o complemento, provocando hemólises intravasculares severas em casos de
incompatibilidades transfusionais.
Antígenos dos sistema ABO
• Presentes na membrana de diversos tecidos
• Encontrados na forma solúvel na saliva, leite, lágrima, urina, líquido amniótico, etc.
• São produtos secundários dos genes ABO
• Os produtos primários são enzimas (glicosiltransferases) capazes de adicionar
carboidratos sobre uma estrutura precursora na membrana da hemácia
• A expressão dos genes ABO depende da ação de outro gene, o gene H (FUT1),
localizado no cromossomo 19
Biossíntese dos Ag do sistema ABO
A- Ag H
B- Ag A
C- Ag B
GENÓTIPO FENÓTIPO
IA IA
IA i
Sangue A
IB IB
IB i
Sangue B
IA IB Sangue AB
i i Sangue O
Relação entre os Genótipos
Tipo 
sanguíneo
Genótipo
Aglutinogênio 
(na membrana 
das hemácias) 
Aglutinina 
(no plasma 
sanguíneo) 
A IA IA ou IA i A Anti-B
B IB IB ou IB i B Anti-A
AB IA IB AB Ausente
O ii Ausência Anti-A e Anti-B
Determinação do fenótipo ABO
• Prova Direta :Detecção de antígenos através do uso de de anti-soros
conhecidos
• Prova Reversa: Detecção de anticorpos através do uso de hemácias 
conhecidas 
MÉTODOS DE TIPAGEM
TUBOS GEL CENTRIFUGAÇÃO
MICROPLACAS
Tubo
Mais difundida. Muito utilizada para resolver problemas nos resultados.
Realizada em pipetagem manual e de rotinas pequenas.
Microplaca
Mais utilizada para doadores, pode ser para sistemas automatizados ou
pipetarem manual .
Colunas de aglutinação
Gel centrifugação, para pipetagem manual ou sistema automatizado.
Principais variações das técnicas
TUBOS 15 SEGUNDOS
MICROPLACA 1 a 2 MINUTOS
COLUNA 9 a 10 MINUTOS
Tempo médio de centrifugação
TUBOS 2,5 a 5%
MICROPLACA 1 a 3%
COLUNA 0,8 a 1,2% ou 2,5 a 5%
Concentração da suspensão de hemácias
Sistema Rhesus Rh
 Esse sistema sanguíneo recebeu
esse nome por ter sido o
resultado de pesquisas feitas
com uma espécie de macacos, a
MACACARhesus.
 Por volta de 1940, Landsteiner e Wiener , injetando sangue desse macaco em 
cobaias, verificaram que elas produziam anticorpos a algum antígeno do sangue 
do macaco.
 Desse experimento esses pesquisadores concluíram que no sangue do macaco
havia um antígeno que induzia a produção de anticorpos na cobaia. Esse
antígeno foi denominado fator Rh e o anticorpo, anti-Rh.
Os sangues que aglutinaram em presença do fator Rh (que
correspondem aproximadamente 85% da população) foram
denominados Rh positivos (Rh+) e os 15% que não
apresentaram reação foram denominados negativos (Rh-)
por não possuírem fator Rh.
Reações Rh
 O fator Rh é encontrado nas
hemácias, verificando esses
pesquisadores que ele obedece às leis
da hereditariedade, sendo o Rh
positivo um fator dominante em
relação ao Rh negativo.
Fenótipos Genótipos
Rh+ RR, Rr
Rh- rr
Sistema Rh
Quando o indivíduo é Rh+, o Ag D está
presente.
Após os Ag do sistema ABO, o Ag D é o
mais importante na prática transfusional.
DHRN (eritroblastose fetal)
Quando a mãe Rh- gera um bebê Rh+.
O sangue positivo do bebê entra na
circulação da mãe durante o parto
Esta exposição estimula a produção de
Anti-D pela mãe.
Neste caso, os anticorpos da mãe vão entrar
na circulação do feto e “atacarão” as células
vermelhas do bebê.
O efeito sobre o feto pode ser leve ou severo
e pode variar de anemia a lesões cerebrais.
Sistema Rh
• É o mais complexo sistema de grupos sanguíneos
• Depois do sistema ABO, é o de maior importância clinica
• Sistema composto de aproximadamente 49 antígenos 
• Cinco deles (D,E,e,C,c) são responsáveis por 99% dos problemas 
clínicos associados ao sistema Rh
• É exclusivamente eritrocitário( Associado com o citoesqueleto da 
membrana pela anquirina e proteína 4.2)
• Produzido a partir 10º semana de vida IU
Variantes fenotípicas do Ag D
1)D fraco
• Indivíduos portadores de D fraco apresentam menor expressão de antígenos
D nas hemácias
D normal: 10.000 a 25.000 sítios antigênicos
D fraco: 66 a 5.000 sítios antigênicos
• Variação qualitativa do antígeno RhD que produz uma alteração quantitativa
de sítios antigênicos expressos na membrana eritrocitária.
• Indivíduos com esse fenótipo não produzem anti D caso recebam transfusão
de hemácias D normal.
2)D Parcial
• Caracterizados pela ausência de um ou mais epítopos do antígeno D que
foram substituídos por epítopos da proteína CcEe
• Alteração qualitativa da proteína RhD na porção extracelular
• Produção de anticorpos anti-D contra as subunidades ausentes.
Variantes fenotípicas do Ag D
Anticorpos Rh
• Aloimunização por transfusão sanguínea ou gestação
• Classe IgG
• Responsáveis pela doença hemolítica do recém- nascido
• Clinicamente significativos
• Reagem otimamente a 37°C
• Não fixam complemento
• Hemólise extravascular
• Reação transfusional hemolítica retardada
• Uma vez formados, persistem por vários anos
Condição: pai Rh+, mãe Rh- e filho Rh+.
1) Mãe Rh- é sensibilizada (exposta ao fator Rh por uma transfusão ou
primeira gestação de filho Rh +)
2) Mãe começa a produzir anti Rh
3) Em uma segunda gestação de filho Rh +, os anti Rh produzidos passarão
através da placenta atingindo o sangue da criança Rh+.
Ocorrerá a destruição das hemácias do feto (icterícia, anemia hemolítica,
insuficiência hepática, hepatoesplenomegalia e liberação de eritroblastos).
DHPN
Procedimento após o parto
Administração de injeção intravenosa com anticorpos anti-Rh que provocarão a
destruição das hemácias fetais presentes na circulação sanguínea materna.
Antígenos eritrocitários
A
B
A + B
H
Anticorpos plasmáticos
Anti-B
Anti-A
--
Anti-A + anti-B + anti-A,B
Fenótipos
A
B
AB
O
Sistema ABO: grupos ou fenótipos eritrocitários
Tipagem direta Tipagem reversa
Grupos Anti-A Anti-B Anti-A,B A1 B
A
B
AB
O
Anti-soros Hemácias-padrão
Sistema ABO: tipagens direta e reversa
Sistema ABO: reagentes para as tipagens direta e reversa
Tipagem direta
Anti-soro anti-A
Anti-soro anti-B
Anti-soro anti-A,B
Tipagem Reversa
Hemácias padrão A1
Hemácia padrão B
Sistema ABO: método de tipagem em lâminas
ABA OB
Vantagens
Fácil realização
Fácil interpretação
Interpretação subjetiva
Desvantagens
Maior risco de contato com a amostra
Inadequada para prova reversa
Difícil interpretação de reações fracas
Sistema ABO: método de tipagem em tubos
ABA O
Vantagens
Fácil realização e interpretação
Reações positivas fortes
Interpretação menos subjetiva
Desvantagens
Necessidade de equipamento
Resíduos de detergentes nos tubos
Difícil interpretação de reações fracas
Sistema ABO: método de tipagem em colunas de gel
Vantagens
Procedimento padronizado
Menor número de pipetagens
Reações estáveis por mais tempo
Intepretação não é subjetiva
Desvantagens
Custo elevado
Necessidade de equipamentos
A D (Rh0) neg A2 D (Rho) neg
Sistema ABO: regras para compatibilidade transfusional
O
A B
AB
O
AB
BA
Sistema ABO: efeitos da transfusão incompatível
O rim de um doador é
transplantado em um paciente
que tenha anticorpos contra os
antígenos de grupos sangüíneos
do doador (Ex: paciente do grupo
O e doador do grupo A).
Os anticorpos do paciente (anti-A)
reagem com os antígenos
expressos nas células endoteliais,
iniciando uma resposta inflamatória
que leva à oclusão dos vasos
sangüíneos do órgão enxertado.
O enxerto torna-se ingurgitado e
de cor púrpura devido à
hemorragia.
Perda do enxerto.
Rejeição hiperaguda: incompabibilidade no sistema ABO em transplante renal
FENÓTIPO BOMBAIM
O Fenótipo Bombaim
Grupo sanguíneo hh, ou grupo sanguíneo de Bombaim, é
um fenômeno raro, primeiramente descoberto na cidade
de Bombaim, Índia, pelo qual indivíduos que possuem
genótipo referente aos grupos sangüíneos "A", "B", ou "AB"
expressam o grupo sangüíneo “O”.
O fenótipo, Bombaim é um fenômeno raro, descoberto 
na cidade indiana de Bombaim, por isso o nome.
Esse fenômeno faz com que indivíduos com o genótipo 
dos grupos sanguíneos “A”, “B” e “AB” expressem o 
fenótipo do grupo sanguíneo “O”. Na Índia a 
prevalência desse fenótipo é de 1:10.000 e na Europa 
é de 1:1.000.000.
FENÓTIPO BOMBAIM
FENÓTIPO BOMBAIM
O alelo H produz uma enzima (enzima H) que transforma uma
substância precursora em antígeno H, que, por sua vez, é transformado
em antígeno A ou B por ação, respectivamente, de enzimas sintetizadas
sob o comando dos alelos IA ou IB.
Como o alelo i é inativo, não promove qualquer transformação no
antígeno H, que permanece presente nas hemácias dos indivíduos do
verdadeiro sangue tipo “O”.
FENÓTIPO BOMBAIM
Pessoas com o fenótipo Bombaim não produzem a enzima ativa
(H) que transformaria a substância precursora em antígeno H.
Sendo assim, a sua ausência [da enzima] faz com que essas pessoas
não apresentem os antígenos “A” e “B” nem o “H”, em suas hemácias,
mesmo possuindo os alelos responsáveis pela síntese dessas
substâncias.
Essas pessoas não produzem a enzima ativa (H) que transformaria
uma substância precursora em antígeno H.
FENÓTIPO BOMBAIM
Os antígenos A e B são produzidos a partir desse antígeno.
Desse modo, a sua ausência faz com que essas pessoas não
apresentem quer o antígeno A, quer o B, nos seus glóbulos
vermelhos, mesmo que possuam alelos referentes à síntese
dessas substâncias
FENÓTIPO BOMBAIM
FENÓTIPO BOMBAIM
 O paciente que receber sangue contendo um antígeno que jamais esteve no
seu próprio sangue terá uma reação imune.
 Assim sendo, os indivíduos com o fenótipo de Bombaim podem doar sangue
para qualquer membro do sistema ABO (a não ser que outro fator
sangüíneo, como o Rh, seja incompatível), mas não podem receber de
nenhum membro do sistema ABO (cujo sangue contém sempre um ou mais
antígenos A, B e H); somente recebem sangue de indivíduos com o fenótipo
de Bombaim
O teste para detectar se uma pessoa é realmente “O” ou
falso “O” é feito aplicando-se o anticorpo anti-H em uma
gota de sangue.
Se houver aglutinação, o indivíduo é um “O” verdadeiro, ou
seja, “ii”.
Se não ocorrer aglutinação, ele é falso “O”, podendo ser
IAIA, IAi, IBIB, IBi ou IAIB.
FENÓTIPO BOMBAIM
francisco.hslab@gmail.com
01. Por que o indivíduo do grupo O pode
doar seu sangue a qualquer pessoa?
Por que uma pessoa do grupo AB pode
receber sangue de qualquer tipo?
Resp.: “O” é doador universal por não
apresentar aglutinogênios nas hemácias.
“AB” é receptor universal por não
possuir aglutininas no plasma.
02. Um homem do grupo sangüíneo AB é
casado com uma mulher cujos avós paternos e
maternos pertencem ao grupo sangüíneo O.
Esse casal poderá ter apenas descendentes:
a) do grupo O;
b) do grupo AB;
c) dos grupos AB e O;
d) dos grupos A e B;
e) dos grupos A, B e AB.
03. Um banco de sangue possui 5 litros de sangue
tipo AB, 3 litros tipo A, 8 litros tipo B e 2 litros tipo O.
Para transfusões em indivíduos dos tipos O, A, B e
AB estão disponíveis, respectivamente:
a) 2, 5, 10 e 18 litros;
b) 2, 3, 5 e 8 litros;
c) 2, 3, 8 e 16 litros;
d) 18, 8, 13 e 5 litros;
e) 7, 5, 10 e 11 litros.
04. Uma mulher que nunca recebeu transfusão
sangüínea teve três filhos. O primeiro e o terceiro
nasceram normais e o segundo, com eritroblastose
fetal. Quais são os fenótipos e os genótipospara o
fator Rh dos indivíduos acima citados?
RESP.: Mulher Rh- (rr);
Marido Rh+ (Rr); 
1° filho Rh+ (Rr); 
2º filho Rh+ (Rr); 
3º filho Rh- (rr).
05. Para que haja possibilidade de ocorrência de
eritroblastose fetal (doença hemolítica do recém-
nascido), é preciso que o pai, a mãe e o filho
tenham, respectivamente, os tipos sangüíneos:
a) Rh+, Rh-, Rh+
b) Rh+, Rh-, Rh-
c) Rh+, Rh+, Rh+
d) Rh+, Rh+, Rh-
e) Rh-, Rh+, Rh+
06. Assinale a afirmativa incorreta:
a) Pessoas pertencentes ao grupo sanguíneo B possuem
aglutinogênios B em suas hemácias e aglutinina anti-A em seu
plasma sanguíneo.
b) Pessoas do grupo sanguíneo AB podem ser chamadas de
receptores universais por não apresentarem nenhum tipo de
aglutininas em seu plasma sanguíneo.
c) Pessoas do grupo sanguíneo do tipo B podem doar sangue para
pessoas com os tipos sanguíneos do tipo B e AB e podem receber de
B e O.
d) Pessoas do tipo sanguíneo do tipo O apresentam aglutinogênios
do tipo anti-A e anti-B e por isso são chamados de doadores
universais.
De acordo com seus conhecimentos sobre transfusão sanguínea,
complete as frases abaixo.
a) Uma pessoa do grupo sanguíneo A pode receber sangue de
__ e __, e doar sangue para __ e __.
b) Uma pessoa do grupo sanguíneo __ pode receber sangue de
B e __, e doar sangue para __ e AB.
c) Uma pessoa do grupo sanguíneo __ pode receber sangue de
__ e doar sangue para todos os outros tipos sanguíneos.
d) Uma pessoa do grupo sanguíneo __ pode doar sangue para
todos os outros grupos sanguíneos, mas pode receber somente de
__.
francisco.hslab@gmail.com

Continue navegando