Relatório 8 aula prática microbiologia

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Ministério da Educação 
Secretaria de Educação Profissional e Tecnologia 
Instituto Federal Catarinense 
Campus de Rio do Sul 
ALANA MACHADO COSTA 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
MICROBIOLOGIA 
Aula Prática 8 – Isolamento de solo / Diluição seriada 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Rio do Sul 
2018 
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1. INTRODUÇÃO 
 
Quando existe a necessidade de avaliar a quantidade de microrganismo presente em uma 
determinada amostra, utiliza-se a técnica de diluição seriada. Refere-se a um método onde 
parte-se de uma quantia da amostra em questão, diluída em uma solução, desta primeira solução 
coleta-se uma fração e coloca-se em outra solução, da segunda solução, coleta-se uma amostra 
novamente e coloca-se em uma terceira solução, e segue assim, fracionando a solução, até o 
ponto onde considera-se necessário. De acordo com o que se quer avaliar, já tem-se definido 
quantas séries devem ser realizadas. 
 
2. DESENVOLVIMENTO 
 
Nesta aula prática o professor Leandro Marcuzzo nos mostrou como proceder com o 
isolamento de solo e diluição seriada para quantificar os microrganismos presentes na amostra 
de solo manejado. As alunas Aline e Débora foram escolhidas para realizar esta prática. 
Primeiramente as alunas lavaram as mãos, esterilizaram, com álcool 70%, ao redor do 
bico de Bunsen e o acenderam, a fim de criar um ambiente esterilizado para não contaminar as 
soluções durante o processo. 
Foram utilizados 11 tubos de ensaio, 1 tubo de ensaio continha 10 ml de água destilada 
e esterilizada e 10 tubos de ensaio continham 9 ml de água destilada e esterilizada. Os tubos 
foram mantidos na grade de tubos para facilitar o manuseio. O tubo de ensaio que continha 
10ml de água foi identificado com 100, será a solução mãe, na qual sairá a amostra para as 
séries. 
Os tubos de ensaio que possuem 9 ml de água destilada e esterilizada foram identificadas 
da seguinte forma: 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109 e 1010, são os tubos de ensaio da 
série, na qual serão retiradas as amostras para incubar. 
Foi pesado 1 grama de solo manejado, colocado no tubo de ensaio 100 (tubo de ensaio 
mãe) e este tubo foi agitado no agitador vortex para homogeneizar a solução. Com uma pipeta 
de vidro com pera de borracha, foi coletado 1 ml do tubo de ensaio 100 e colocado no tubo de 
ensaio 101, sendo este agitado posteriormente. Para cada coleta nos tubos de ensaio, foi utilizado 
uma pipeta diferente, esterilizada, para evitar que a pipeta usada na solução anterior, que possue 
quantidade maior de microrganismo, contaminasse as soluções posteriores, resultando em uma 
análise incorreta. 
 
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O procedimento seguiu da seguinte forma: 
� 1 ml de solução do tubo de ensaio 101 foi colocado no tubo de ensaio 102. O tubo 
102 foi agitado. A pipeta foi trocada. 
� 1 ml de solução do tubo de ensaio 102 foi colocado no tubo de ensaio 103. O tubo 
103 foi agitado. A pipeta foi trocada. 
� 1 ml de solução do tubo de ensaio 103 foi colocado no tubo de ensaio 104. O tubo 
104 foi agitado. A pipeta foi trocada. 
� 1 ml de solução do tubo de ensaio 104 foi colocado no tubo de ensaio 105. O tubo 
105 foi agitado. A pipeta foi trocada. 
� 1 ml de solução do tubo de ensaio 105 foi colocado no tubo de ensaio 106. O tubo 
106 foi agitado. A pipeta foi trocada. 
� 1 ml de solução do tubo de ensaio 106 foi colocado no tubo de ensaio 107. O tubo 
107 foi agitado. A pipeta foi trocada. 
� 1 ml de solução do tubo de ensaio 107 foi colocado no tubo de ensaio 108. O tubo 
108 foi agitado. A pipeta foi trocada. 
� 1 ml de solução do tubo de ensaio 108 foi colocado no tubo de ensaio 109. O tubo 
109 foi agitado. A pipeta foi trocada. 
� 1 ml de solução do tubo de ensaio 109 foi colocado no tubo de ensaio 1010. O 
tubo 1010 foi agitado. A pipeta usada nesta última coleta não foi trocada. 
 
Foram alinhadas 10 placas de petri com meio de cultura, e identificadas com a mesma 
descrição dos tubos de ensaio da série (101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109 e 1010). Usando-
se a mesma pipeta da coleta anterior (109 � 1010), sem trocá-la, iniciou-se a coleta dos tubos 
de ensaio para as placas de petri. 
O procedimento seguiu da seguinte maneira: 
� 0,1 ml da solução do tubo de ensaio 1010 foi colocada na placa de petri 1010; 
� 0,1ml da solução do tubo de ensaio 109 foi colocada na placa de petri 109; 
� 0,1 ml da solução do tubo de ensaio 108 foi colocada na placa de petri 108; 
� 0,1 ml da solução do tubo de ensaio 107 foi colocada na placa de petri 107; 
� 0,1 ml da solução do tubo de ensaio 106 foi colocada na placa de petri 106; 
� 0,1 ml da solução do tubo de ensaio 105 foi colocada na placa de petri 105; 
� 0,1 ml da solução do tubo de ensaio 104 foi colocada na placa de petri 104; 
� 0,1 ml da solução do tubo de ensaio 103 foi colocada na placa de petri 103; 
� 0,1 ml da solução do tubo de ensaio 102 foi colocada na placa de petri 102; 
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� 0,1 ml da solução do tubo de ensaio 101 foi colocada na placa de petri 101. 
 
Em um béquer foi colocado álcool puro, mergulhado a alça de Drigalski e este passado 
na chama do bico de Bunsen para esterilização. Com a alça de Drigalski, fazendo um círculo, 
foi espalhado as amostras de cada placa de petri, iniciando-se na 1010 e terminando na 101. 
As placas de petri foram empilhadas, embaladas com plástico filme, identificadas como 
“solo manejado” e colocados em incubadora para desenvolvimento de microrganismos. As 
placas de petri ficarão 7 dias em incubação. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
3. CONCLUSÃO 
 
A técnica de diluição seriada é importante para avaliar o nível de contaminação de 
alimentos, solos, entre outros. Ela permite quantificarmos microrganismos existentes na 
amostra e avaliar o quão prejudicial pode ser. 
0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml 
Tubo de ensaio mãe Tubos de ensaio da série 
Placas Petri 
1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1 ml 
100 101 
 
101 
 
103 104 105 106 107 108 109 1010 
101 
106 
102 
107 
103 
108 
104 
109 
105 
1010 
Figura 1 - Esquema Diluição Seriada 
Pipeta de vidro – trocada a cada coleta para evitar contaminação entre soluções 
Pipeta de vidro – usada a mesma, feito a coleta no sentido 1010 � 101 para evitar contaminação