Estudo Dirigido Microbiologia

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Estudo Dirigido – Microbiologia
Como se faz a identificação dos bastonetes esporulados?
É preciso isolar a amostra em ágar sangue → analise das características morfotintoriais → prova da catalase. Dois grupos nessa classe são importantes: Bacillus – catalase positivo e Clostridium – catalase negativo. 
Como se faz a identificação dos bastonetes não esporulados?
É preciso isolar a amostra em ágar sangue → analise das características morfotintoriais → quando não se forma esporos a identificação é pela morfologia, sendo ela regular ou irregular (corineforme). Nas regulares estão a Listeria e o Lactobacillus e nas irregulares, o Corynebacterium e Actinomyces pyogenes.
Quais são as características do Bacillus?
São bastonetes gram positivos, formam esporos, podem ser aeróbios ou anaeróbios facultativo, são móveis (apresentam flagelos), pouco exigentes nutricionalmente, estão presentes no ambiente por serem da microbiota natural do solo, podem ser contaminante ambiental e patógeno de animais, crescem em diversas temperaturas e seu pH fica entre 2,0 e 10,0.
Como se dá a transmissão e quais os riscos patogênicos de uma infecção por Bacillus anthracis? 
A transmissão pode ser no solo, ingerindo alimentos e água contaminada ou contato de alguma lesão com água e solo contaminados e por picadas de artrópodes. Em humanos a contaminação pode ser através de inalação (selecionadores de lã, por exemplo). Uma infecção por Bacillus anthracis pode levar a casos de necrose, também está presente em zoonoses e pode ser usado como bioterrorista. 
Quais são os fatores de virulência que torna os Bacillus anthracis tão resistentes?
Ele produz uma toxina chamada toxina proteica complexa que age nos leucócitos levando a edemas e trombose e possui cápsula, que os protegem da fagocitose. 
Como é o quadro clínico do Carbúnculo Hemático? 
O período de incubação é de 1 a 5 dias, os sintomas são febre alta, calafrios, edema, congestão da mucosa, diarreia hemorrágica, perda na produção leiteira, agalactia (ausência de leite nas glândulas durante o período de amamentação) e aborto. Alguns animais morrem sem sintomas aparentes. A evolução da doença é muito rápida. 
Quais são as medidas de controle para evitar tal doença?
Eliminação correta das carcaças, evitar a contaminação dos produtos animais, animais contaminados devem ser isolados, limpeza do ambiente, uso de roupas e luvas protetoras, imunização ativa dos animais (vacina).
Quais os riscos patogênicos de uma infecção por Bacillus cereus?
É causador de intoxicações alimentares, diarreia hemorrágica pois produzem hemolisinas (exotoxinas produzidas por bactérias que provocam lise dos eritrócitos), abortos e mastite bovina. 
Quais amostras e meios de cultura ideais para isolar os Bacillus?
As amostras podem ser de líquido ou pus da lesão local, sangue, solo, leite e produtos alimentícios. Os meios de cultura variam desde o Ágar sangue, Ágar BHI, Ágar simples, Ágar Müeller Hinton e Ágar nutrientes. 
Como funciona a fermentação de açúcares usados na identificação de espécies?
São usados carboidratos no meio de cultura para avaliar se a bactéria o usa ou não. A coloração amarela indica que a bactéria usou o carboidrato (fermentou e produziu ácido), a coloração rosa indica que a bactéria não é capaz de usar o carboidrato mas usou a peptona que é alcalino. B. anthracis e cereus utilizam glicose se estiver disponível no meio de cultura, porém se for sacarose o anthracis utiliza e com o cereus é variável. 
Como funciona o teste da gelatina usado na identificação das espécies? 
A gelatina avalia se a bactéria isolada possui enzima gelatinase (capaz de hidrolisar a gelatina e de liquefazer). O meio de cultura semi-sólido se tornará líquido. 
Quais é a importância do teste no Ágar SIM? E no Ágar Sangue?
O Ágar SIM é um meio semi-sólido que identifica produção de H2S, motilidade das bactérias pela presença de flagelos e produção de indol na quebra de triptofano. O Ágar Sangue identifica hemólise das bactérias. 
Quais são as características do Clostridium?
São bactérias gram positivo, formam esporos (que podem ser centrais, subterminais ou terminais), são móveis (com exceção do C. perfringens), são anaeróbios obrigatórios (algumas espécies como C. carnis, C, tertium e C. histolitycum toleram moderadamente a presença de oxigênio), não possuem sistema citocromo e enzimas catalase, peroxidase e superóxido dismutase. 
Como é o quadro clínico da exotoxina tetânica liberada pelo C. tetani? Há profilaxia e tratamento? 
Causa paralisia espástica e rigidez muscular, convulsões, tremores e sensibilidade aumentada a estímulos. A neurotoxina age na fenda pré-sináptica nos neurônios motores, bloqueia da liberação de neurotransmissores, o que causa a contração da musculatura. Sim, existem vacinas como medida profilática e antitoxina para casos de tetanoespamina. 
Como é o quadro clínico da exotoxina tetânica liberada pelo C. botulinum? Quais alimentos são mais propensos a ter essa bactéria?
Ao contrário do tétano, há mais relaxamento do que contração, porém as consequências são as mesmas. Age na fenda pré-sináptica nos neurônios liberando de vesículas com toxina na placa motora o que causa a paralisia. Mel, carnes, vegetais, produtos lácteos, pescados, TGI de frutos do mar.
Como é o quadro clínico da Celulite necrótica e gangrena gasosa causadas pelo C. perfringens? 
A bactéria C. perfringens produz a toxina alfa que causa mionecrose com edema, hemorragia, enfisema crepitante (ruído) e toxemia febril. A doença tem curso fatal.
Como é feito o isolamento e identificação das espécies de Clostridium?
O isolamento deve ser feito na jarra de anaerobiose com Ágar Sangue a 35/37ºC. 
A avaliação da colônia diferencia as espécies: colônias elevadas com bordas definidas são de C. perfringens, colônias menores que se estendem por filamentos são de C. tetani.
 C. perfringens produzem hemólise formando zonas duplas. 
Isolados em Ágar glicosado em camada alta, C perfringens produzem alta concentração de gás. Isolados em Ágar de gema de ovo, C. botulinum produzem lipase.
Prova da gelatina e fermentação de açúcares auxilia na diferenciação das espécies. 
Quais são as características de Corynebacterium?
Fazem parte dos bastonetes gram positivos não esporulados de morfologia irregular, possuem dificuldade na coloração de gram, formam arranjos de cadeias curtas (“V” ou “Y”), são exigentes em termos nutricionais, são comensais de mucosas (trato respiratório em especial), estão associados a infecções piogênicas. São imóveis (não apresentam flagelos), catalase positivo e anaeróbios facultativo. 
Como é o quadro clínico da Linfadenite caseosa e da Linfangite Ulcerativa causada por Corynebacterium pseudotuberculosis? Existe tratamento?
A Linfadenite caseosa apresenta abcessos caseosos nos linfonodos e órgãos internos, os abcessos contém pus de coloração amarelo-esverdeado e consistência de queijo coalho. Sim, eliminando os recidivantes do rebanho, antibioticoterapia e excisão cirúrgica.
A Linfangite Ulcerativa causa lesões ulcerativas ao longo dos vasos linfáticos. O tratamento é feito com antibioticoterapia (penicilina, aminoglicasídeos).
Como é o quadro clínico da Mastite, Otite Externa e Endocardite bacteriana causada por Corynebacterium? Existe tratamento?
Mastite – É causada por Corynebacterium pyogenes. Acomete bovinos, suínos, cabras e ovelhas. Os sinais clínicos são exudato purulento e odor fétido.
Endocardite bacteriana – Causada por Corynebacterium pyogenes. Pode ocorrer após a remoção de cálculo dentário. 
Otite Externa – Causada por Corynebacterium spp. Acomete cães e gatos. Os sinais clínicos são odor fétido, inclinação da cabeça e prurido intenso.
Para todas as doenças existem tratamento com antibioticoterapia. 
Quais são as características da Escherichia Coli?
São bactérias gram-negativa, anaeróbia facultativa e que não produzem esporos. Podem ser benéficas ou prejudiciais à saúde dependendo da espécie e quantidade noorganismo. Possuem flagelos e fímbrias ou adesinas que permitem a sua fixação. Embora a maioria das variedades de Escherichia coli sejam inofensivas, outras podem provocar doenças. Alguns tipos de Escherichia coli podem causar diarreia, enquanto outros provocam infecção urinária, doença respiratória, pneumonia e outras doenças. Há ainda outros tipos de Escherichia coli que são usados como marcadores de contaminação na água.
Quais são as principais infecções causadas por E. Coli em animais?
Enteropatias enterotóxicas – diarreia colibacilar de leitões e bezerros pela presença de toxina.
Mastite bovina colibacilar – indica falta de higiene no local. 
Síndrome metrite-mastite-agalaxia (MMA) – comprometimento do endométrio e pode evoluir para perda da função da glândula mamária. 
Infecção colibacilar em galinhas
Infecção urogenitais em animais de companhia
Como são divididas as E. coli associadas a processos diarreicos?
EPEC (E.coli enteropatogênica) se adere às células da mucosa do intestino delgado. Produzem diarreia em lactentes. Responsável pela diarreia colibacilar dos bezerros e colibacilose dos leitões. 
ETEC (E.coli enterotoxigênica) que produzem exotoxinas termolábeis e/ou termoestáveis que estimulam a produção de líquidos e, causam doenças mortais por conta do desequilíbrio hídrico e eletrolítico. Responsável pela enterotoxemia colibacilar dos neonatos. 
EHEC (E.coli enterohemorrágica) que produzem a verotoxina responsável pela forma diarreica grave e pela síndrome hemolítico-urêmica. 
EIEC (E.coli enteroinvasiva) que tem a capacidade de invadir as células epiteliais. 
EAEC (E.coli enteroagregativa) que tem a capacidade de se agregar às células epiteliais. Associadas às diarréias agudas e crônicas.
Quais são os fatores de virulência da Salmonella? 
São catalase e superóxido-dismutase tornando-os resistência a fagocitose, produzem toxinas (LT e fosfolipase A que causa perda de líquido). Possuem sideróforo, um composto orgânico que atua na captação de ferro. Possuem fimbrias que aumentam sua fixação no organismo. 
Quais são as três formas clínicas relacionadas a Salmonella?
Gastroenterite: período de incubação de 6 a 48h relacionado à dose infectante. Os sintomas são náusea, vômitos, diarreia, febre e dor abdominal.
Septicemia: pode ser um estágio intermediário de infecção sem sintomas intestinais ou isolamento das bactérias nas fezes.
Febre entérica: ocorre fagocitose por macrófagos e multiplicação no fígado, baço e medula óssea. Forma sistêmica severa. Ex. Febre tifóide (S. Typhi). O período de incubação é de 10-14 dias. Os sintomas não são específicos mas causa febre, anorexia, dor de cabeça, dores musculares e constipação.
Quais os quadros clínicos apresentados nos animais contaminados com Salmonella?
Em Bovinos: Bezerros e adultos. Gastroenterite, septicemia e pneumonia em bezerros (S. dublim). Fêmeas: septicemia e aborto (S. tyhimurium e S. newport)
Em Suínos: Septicemia aguda e fulminante. Doença crônica intestinal debilitante.
Em Equinos: diarreia associada à cólica.
Qual o quadro clínico da Salmonelose Aviária?
É frequentemente associada a contaminação de ovos (cru, mal cozidos ou em maioneses artesanais). Causa febre, dor abdominal e diarréia. O período de incubação é de 12 a 72 horas.
Pulorose: S. pulorum (perus e galinhas: fezes esbranquiçada). Infecta o óvulo, contamina o ambiente de incubação após postura. Causa morte por septicemia.
Tifo aviário: S. gallinarum. Causa perda apetite, prostração, diarreia amarela-esverdeada, queda de postura e em poucos dias a morte. Septicemia aguda
Arizonose Aviária: S. arizonae. Infecta o óvulo. Dissemina-se nas fezes contaminando o ambiente. Répteis e anfíbios são portadores assintomáticos.
Como é feito o isolamento?
A bactéria precisa ser isolada em caldos que impeçam o crescimento de outros micro-organismos e facilite o da salmonela. Ex: selenito-cistina e tetrationato de sódio.
Quais são as características da Shigella?
São bactérias que produzem cápsula (impedem a fagocitose), são imóveis, possuem proteínas de adesão epitelial, lisa fagossomo, produzem exotoxinas (shiga-toxina, shigella enterotoxinas) relacionados a casos de diarreia. Produzem hemolisinas que podem levar a choque vascular. 
Como é o quadro clínico da Desinteria Bacilar?
O animal apresenta cólicas abdominais, febre, fezes sanguinolentas e com pus. A bactéria coloniza e se instabiliza no intestino delgado e partir da sua multiplicação os sintomas aparecem. 
Quais são as características da Klebsiella?
É uma bactéria associada a infecções no trato gastrointestinal, quadros de pneumonia, comprometimento do endométrio levando a abortos em éguas, diarreia em bezerros, abscesos, septicemias. Quando isolada sua consistência é mais pegajosa do que as demais pela alta produção de cápsula. 
Quais são as características da Klebsiella?
São bactérias associadas a casos de pneumonia e septicemia. São patógenos oportunistas nosocomial resistentes a desinfetantes. Estão associadas a infecções hospitalares. Possuem enzimas com atividade de adesina e fatores de invasão celular. Apresentam resistência a diversos antibióticos. As colônias apresentam pigmentação avermelhada. 
Quais são as características da Proteus?
Bactérias associadas a otites, infecções em feridas, infecções no trato urogenital, glândulas anais, casos de diarreia e mastite aguda. Colônias em “swarm” (ondas). Estão presentes no solo, na água e materiais contaminados com fezes. 
Como é feito o diagnóstico de enterobactérias?
Isolamento em Ágar Mac Conkey → coloração de gram → bastonetes ou cocobacilos gram-negativo → fermentação de glicose positivo → citocromo-oxidase negativo → redução de nitrato a nitrito positivo. 
Descreva sobre o Ágar Mac Conkey, Ágar EMB e Ágar SS usados na diferenciação de espécies.
Ágar Mac Conkey – é seletivo e diferencial. Possui peptona, sais biliares, cristal violeta e lactose.
Ágar EMB – possui lactose, sacarose e eosina. E. Coli apresenta coloração metálica quando isolada nesse ágar. É seletivo e diferencial.
Ágar SS – é seletivo e diferencial. Seletivo a Salmonella pois ela não fermenta a lactose presente nesse meio de cultura. Possui alto teor de sais biliares e peptona. 
Como funciona a diferenciação pela utilização de carboidratos?
A amostra é isolada em um tubo com ágar ferro de Kliger ou Ágar TSI onde as concentrações de carboidratos precisam ser diferentes: Glicose 0,1%, Sacarose 0,1% e Lactose 1% (o Ágar ferro de Kliger não possui sacarose). 
Coloração vermelha → não fermentou nenhum dos carboidratos. Ficou com a mesma coloração de antes.
Coloração amarela → utilizou e fermentou lactose.
Coloração amarela somente na base do tubo → utilizou e fermentou glicose.
Amostra desprende do fundo → produziu gás.
Fundo escurecido → produziu ácido sulfídrico.
Quais são os outros testes bioquímicos capazes de auxiliar na diferenciação das espécies?
No meio SIM pode se observar produção de Indol, motilidade (bactérias que possuem flagelos) e a produção de H2S (deixa o tubo escurecido). Existe também o teste de Vogues Proskauer, teste vermelho de metila, o teste da utilização de citrato e o sistema API.