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Estrutura do DNA Passos na identificação do DNA como material hereditário • Teoria cromossômica da Herança • DNA como material genético – Princípio transformante – Experimento de Avery, Mc Leod, Mc Carty – Experimento de Hersey & Chase • Estrutura do DNA – Watson & Crick Princípio transformante (Griffits) • Experimento de Avery, Mc Leod & McCarty Estrutura do DNA • Nucleotídeos – Bases púricas e pirimídicas – Bases raras • Dupla hélice – Complementaridade – Antiparalelismo • Tipos de DNA – DNA A – DNA B – DNA Z Dupla hélice • Ligação fosfodiéstes • Molécula assimétrica • Interações hidrofóbicas • Pontes de hidrogênio – Conteúdo G/C Características da molécula do DNA Comprimento de uma volta em torno do eixo Distância entre nucleotídeos Espessura da molécula Tipos de DNA Topologia DNA B • Forma predominante • Comprimento de uma volta em torno do eixo = 3,4 nm – 10,4 pares de bases • Passo de hélice – Distância entre nucleotídeos = 0,34 nm Espessura da molécula = 2 nm DNA A • Características • Mais espessa – Passo da hélice = 2,6 nm • 11 pb de comprimento • Originada a partir do DNA B – Por desidratação (álcool a 75%) – Diminuição da concentração de sal DNA Z • Características – Uma volta completa 12 pb – Passo de hélice 4,56 nm – Diâmetro 1,84 nm – Cavidade maior desaparece – Cavidade menor fica profunda • Forma Z – Metilação – Estresse torcional – Ação de proteínas específicas Estruturas do DNA • Molécula relaxada • Superespiralada Superenrolamento Enzimas • Topoisomerases I • Topoisomerase II – Girase Topoisomerase II Junção de holliday Interações entre DNA e proteína Interações proteínas DNA Cromatina eucarioto Interações proteínas DNA Replissomo Interações proteínas DNA Regulação e transcrição gênica Conseqüências da complementaridade • Especificidade – Biológico • Hereditariedade – Fidelidade e mutação • Fisiologia celular – Transcrição – Técnico • Hibridização (sondas) • Amplificação Técnicas envolvendo complementariedade • Técnicas de citogenética molecular – Sondas radioativas – SKY – FISH • Técnicas moleculares (eletroforese) – Hibridização • Sounthern Blot • Northen Blot Hibridização Citogenética molecular SKY FISH Técnica de RFLP Complementariedade • Técnicas de amplificação de DNA – Iniciadores e especificidade de amplificação • PCR, AFLP, microssatélite Estrutura do RNA Monômeros do RNA Domínios funcionais do RNA Estrutura secundária do RNA Domínios funcionais tRNA Complexos RNA-proteína Ribossomo Complexos RNA-proteína Telomerase Complexos RNA-proteína Spliceossomo
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