Dosagem de substrato em matéria prima (1) (1)

Prévia do material em texto

Dosagem de substrato em matéria prima
Professores: Thiago e Anderson
Alunas: Rosângela Moura 
 Thaís Farias Turma: PMQ 361 
Resultado e Discussão 
Dosagem de açucares redutores Ácido 3,5- DINITROSALICÍLICO (DNS) 
Preparou-se, a partir da solução estoque de glicose, 10 mL das soluções padrões nas seguintes concentrações: 1,2,4,6 e 8 µmols/mL.
Fdil1: = 0,100 mL de solução est. e 0,900 mL de H2O 
Fdil2 : = 0,200 mL de solução est. e 0,800 mL de H2O
Fdil 3: = 0,400 mL de solução est. e 0,600 mL de H2O
Fdil 4: = 0,600 mL de solução est e 0,400 mL de H2O
Fdil 5 : = 0,800 mL de solução est e 0,200 mL de H2O
	Amostra 
	Concentração (µmols/mL)
	Absorbância(A)
	B
	-
	0,035
	1
	1
	0,136
	2
	2
	0,216
	3
	4
	0,422
	4
	6
	0,603
	5
	8
	0,845
*tabela: Dados obtidos durante a construção da curva padrão 
A partir da tabela 1, foi possível plotar o gráfico que representa a curva-padrão da DNS. A partir dessa curva-padrão foi possível quantificar a concentração do açúcar redutor e o açúcar não redutor, aplicando a equação da reta obtida através da concentrações do DNS. 
Obs: Retirou-se o ponto referente a concentração de 8 µmols/mL pois detectou-se que a mesma era um outlier. 
 Construção da curva padrão de glicosídeos redutores
	Tubo
	Glicose(mL)
	H2O(mL)
	DNS(mL)
	Abs(nm)
	μmol/mL
	Branco
	0
	1,0
	1,0
	0,035
	0
	1
	0,1
	0,9
	1,0
	0,136
	1,0
	2
	0,2
	0,8
	1,0
	0,216
	2,0
	3
	0,4
	0,6
	1,0
	0,422
	4,0
	4
	0,6
	0,4
	1,0
	0,603
	6,0
	5
	0,8
	0,2
	1,0
	0,845
	8,0
A concentração de glicose em cada tudo é feita a partir da seguinte relação:
C1V1=C2V2
Para o tubo 1 tem-se que 0,1x10 = 1,0xC2 -> C2=1,0 μmol/mL
Para os demais tubos os cálculos são feitos da mesma forma, utilizando-se dos seus valores respectivos valores.
Cálculo Açúcar hidrolisado Cálculo do açúcar não hidrolisado 
	
Y= 0,1014x + 0,0268
A=0,562
0,562= 0,1014x + 0,0268
X= 5,29 µmols/mL
	
 Y = 0,1014 x + 0,0268
 A= 0,426
 0,426 = 0,01014x + 0,0268
 X= 39,4 µmols/mL
 
O limite se sensibilidade do método para a aparelhagem utilizada, são extremos dos valores de absorbância medidos a 540nm (0,136 e 0,845), a concentração de glicose estar associada a um valor de absorbância nessa faixa, o que é definido pela equação da reta apresentada anteriormente; y= 0,1014x + 0,0268
 
O método do DNS se fundamenta na redução do ácido 3,5-dinitro salicílico em ácido 3-amino-5-nitro salicílico por conta da ação de açúcares redutores. Dessa forma, a glicose utilizada e se oxidou, resultando em um ácido glucônico.
Existem técnicas que necessitam da hidrólise para quantificar os dois tipos de açúcares.
Determinação do ºBRIX de soluções açucaradas
Xarope de malte; guaraviton; caldo de cana; suco de uva Aurora.
Métodos refratômetro e de Brix e Densímetro (sacarímetro) de Brix.
A unidade utilizada é o grau Brix . A medida de 1°Bx representa 1g de compostos solúveis totais a cada 100g de solução. Assim sendo, uma solução de 100g de água e sacarose, contendo 20g de sacarose, é uma solução de 20°Bx. A medida do índice de refração de uma solução varia com a sua concentração.
O grau Brix é a quantidade de sólidos solúveis no sumo de frutas e em outros produtos líquidos, tais como, caldo de cana, melado, melaço, xarope de frutas. Como esses sólidos são, em grande parte representados pelos açúcares totais, ele às vezes também é utilizado como estimativa de açúcares.
Resultados e discussões
Os valores obtidos ao analisar os sólidos solúveis de cada amostra estão demonstrados na tabela abaixo conforme o método utilizado:
	Amostra
	Densímetro de Brix
	Refratômetro de Brix
	Guaraviton
	9,2
	10º Brix
	Suco de uva
	15
	14º Brix
	Xarope de malte
	-
	81º Brix
	Cana de açúcar
	-
	20º Brix
Suco de uva
O teor de açúcar varia entre 13ºBrix e 16º Brix segundo literatura, com acidez relativamente baixa. De acordo com experimento os valores estão dentro do limite esperado, tanto no densímetro como no refratômetro.
Caldo de cana
O teor de açúcar varia em 18º Brix ou mais. De acordo com os resultados está dentro do esperado. Devido a quantidade restrita do caldo de cana, foi feito apenas análise no refratômetro.
Xarope de malte
O teor de açúcar do xarope de malte foi de 81ºBrix, o que é esperado de acordo com a literatura que é em torno de 80º Brix. Por ser um liquido muito denso, não seria possível a análise ser feita no densímetro, apenas no refratômetro.
Guaraviton
O teor de açúcar no guaraviton variou entre 9,2 a 10ºBrix.
De acordo com a embalagem, há 18 g em 200 mL de açúcar, portanto em 100 mL há 9 g de açúcar. O valor está de acordo com o ensaio realizado.
Densímetro
Vantagens: método simples de rápida medição: instrumento econômico; instrumentos especiais com leituras diretas em álcool % ou açúcar% (Brix) ou outros valores disponíveis relacionados a densidade.
Desvantagens: vidraria quebrável; faixa de medição pequena; leituras dependentes do operador, portanto de precisão limitada; volume grande de amostra; difícil secagem.
Refratômetro óptico portátil
Poucas gotas do líquido a ser medido são colocadas no prisma. O índice refrativo pode ser lido diretamente a partir da balança integrada, olhando no interior do refratômetro. Alguns modelos possuem uma balança de compensação de temperatura. Há refratômetros para medição de concentração específica com balanças de concentração dedicada (Brix, salinidade).
Vantagens: método simples; instrumento econômico; instrumento especiais com leituras diretas em Brix ou salinidade.
Desvantagens: pequena faixa de medição; leituras dependentes do operador, portanto de precisão limitada; sem protocolo de medição.