Aula 1 Histologia e seus métodos de estudo

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Histologia e seus 
métodos de estudo 
Curso de Nutrição e enfermagem 
Disciplina: Histologia e Embriologia 
 
 Professor: Eduardo Reis‏ 
O que estuda a Histologia? 
http://msalx.recreionline.abril.com.br 
http://i00.i.aliimg.com 
http://3.bp.blogspot.com 
Para onde estamos olhando? 
http://3.bp.blogspot.com 
• Células com estrutura, função e 
comportamento semelhante 
• Classificação dos tecidos: 
– Morfologia, localização, função e origem 
embriológica. 
 
Tecido - Definição 
Tecido - Tipos 
http://www.icb.usp.br 
A 
B 
C 
C 
D 
B 
A 
D 
C 
Tecido - Constituição 
http://blogelseviersaude.elsevier.com.br/ http://www.icb.usp.br/ 
Células 
Matriz extracelular 
Tecido - Constituição 
Tecido epitelial 
Tecido muscular 
http://www.icb.usp.br/ 
http://www.icb.usp.br/ 
Grupo de tecidos formam órgãos 
http://fotosenoticias.com 
• Tamanho pequeno das células e dos 
componentes da matriz extracelular torna 
necessário o uso de microscópios. 
• Química, fisiologia, imunologia e parasitologia 
– interação com histologia 
 
Aumentar e evidenciar! 
Métodos de estudos em histologia 
 
• Tecidos e órgão – muito espessos 
• Seccionamento em micrótomo 
 
• Série de tratamentos prévios: 
– Fixação 
– Inclusão 
– Coloração 
Preparação de tecidos para exame 
microscópico 
Fixação 
Evita digestão dos tecidos 
 
 Química 
 Física 
 
Soluções desnaturantes 
ou estabilizadoras 
 
Solução isotônica tamponada de 
formaldeído 
 
ME – outros fixadores 
 
Congelamento 
http://www.scielo.br 
Preparação de tecidos para exame microscópico 
Inclusão ou embebição 
Desidratação 
 
Clareamento 
 
Infiltração 
 Parafina 
 Resina 
 
 
http://www.forp.usp.br 
1 – 10 mm 
1 mm = 0,001 mm 
Preparação de tecidos para exame microscópico 
Coloração e Montagem 
Preparação de tecidos para exame microscópico 
Evidenciar e distinguir estruturas 
 
Corantes 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Resina 
Corantes 
ácidos 
Basófilos 
Componentes 
teciduais 
básicos 
Corantes 
básico 
Acidófilos 
Componentes 
teciduais 
ácidos 
Coloração e Montagem 
Preparação de tecidos para exame microscópico 
Evidenciar e distinguir estruturas 
 
Corantes 
 
Hematoxilina e Eosina - HE 
 
 
Microscopia de Luz 
Partes 
 
 Mecânicas 
 Óticas 
 
Poder de resolução 
0,2 mm 
1.000 – 1.500 x 
 
Equipamentos de análise 
(JUNQUEIRA & CARNEIRO, 2004) 
Microscopia de Contraste de Fase 
Equipamentos de análise 
Cortes não corados 
Células vivas 
 
Luz muda de velocidade 
Diferentes índices de refração 
 
Microscopia de Polarização 
Equipamentos de análise 
Átomos e moléculas com alto grau de orientação 
Birrefringência 
Ex.: celulose, colágeno, cristais, microtúbulos e microfilamentos 
Fibras de colágeno 
Microscopia Confocal 
Equipamentos de análise 
(JUNQUEIRA & CARNEIRO, 2004) 
Foca plano muito delgado 
Microscopia de Fluorescência 
Equipamentos de análise 
Emite comprimento de onda maior do que recebeu 
Luz ultravioleta sob corantes específicos (fluorescentes) 
Microscopia Eletrônica de 
Transmissão 
Equipamentos de análise 
Interação entre elétrons e 
componentes do tecido 
 
Resolução: 1 nm 
120.000 – 400.000 x 
 
Imagem projetada em 
um monitor 
 
P&B 
 
Espécimes: 40-90 nm 
Navalhas de vidro ou diamante 
(JUNQUEIRA & CARNEIRO, 2004) 
Microscopia Eletrônica de 
Transmissão 
Equipamentos de análise 
Microscopia Eletrônica de Varredura 
Equipamentos de análise 
Interação entre elétrons e 
Camada de metal 
 
Imagem projetada em 
um monitor - P&B 
 
(JUNQUEIRA & CARNEIRO, 2004) 
Microscopia Eletrônica de Varredura 
Equipamentos de análise 
Radioautografia em seções de tecidos 
Outros tipos de análises histológicas 
Localização de substâncias 
radioativas 
 
Brometo de prata 
 
 
Cultura de Células e Tecidos 
Separação mecânica ou enzimática 
 
Cultivo em placa de Petri 
 
Duração da vida celular 
 
Experiências in vitro 
 
Outros tipos de análises histológicas 
APLICAÇÃO MÉDICA 
 
Estudo de metabolismo de células 
e cancerosas 
 
Desenvolvimento de Fármacos 
Fracionamento celular 
Purificação e isolamento de 
componentes celulares 
 
Processo físico 
 
Coeficiente de sedimentação 
 
Outros tipos de análises histológicas 
(JUNQUEIRA & CARNEIRO, 2004) 
Histoquímica e Citoquímica 
Indicar e localizar substâncias 
 
Reações química com molécula 
de alta afinidade 
 
Substâncias insolúveis coloridas 
 
Íons, ácidos nucléicos, proteínas, 
polissacarídeos e oligossacarídeos, 
e lipídeos 
 
Outros tipos de análises histológicas 
(JUNQUEIRA & CARNEIRO, 2004) 
Íons de cálcio 
Histoquímica e Citoquímica 
Outros tipos de análises histológicas 
(JUNQUEIRA & CARNEIRO, 2004) 
Rim – Fosfatase alcalina 
Rim – Fosfatase ácida 
Intestino - Polissacarídeos 
Histoquímica e Citoquímica 
Outros tipos de análises histológicas 
Aplicação médica 
 
Diagnóstico laboratorial 
 
Ferro 
Hemocrematose e Hemossiderose 
 
Glicogênio – Glicogenoses 
 
Glicosaminoglicanas 
Mucopolissacaridoses 
 
Esfingolipídios 
Esfingolipidoses 
 
Interação entre molécula de alta afinidade 
Outros tipos de análises histológicas 
Detecção de molécula em cortes 
histológicos por meio de interações 
moleculares de alta afinidade 
 
Marcadores 
 
Faloidina (Amanita phalloides) 
Actina 
 
Proteína A (Staphylococcus aureus) 
Imunoglobulinas 
 
Lectinas (vegetais) 
Carboidratos 
CÉLULA 
A Célula 
ROBERT HOOKE – SEC. XVII 
Descoberta da célula 
Teoria celular 
Meados do Séc. XIX 
Matthias Schleiden 
Theodor Schwann 
Célula Procariótica e Eucariótica 
Célula Procariótica e Eucariótica 
Célula procariótica Célula eucariótica 
Tamanho 1 – 10 mm 5 – 100 mm 
Envoltório nuclear Ausente Presente 
DNA Circular Linear 
Organelas Ausente Presente 
Citoesqueleto Ausente Presente 
Tamanho do ribossomo 70 S 80 S 
Histonas Ausente Presente 
Membrana plasmática 
Plasmalema 
 
Bicamada lipídica 
Permeabilidade seletiva 
Mosaico-fluido 
Comunicação 
 
Transporte ativo e passivo 
Difusão facilitada 
Membrana plasmática 
Fibrose cística e transporte 
transmembranar 
Membrana plasmática 
Transporte de macromoléculas e 
de partículas 
 
Endocitose e exocitose 
Pinocitose de fase fluida 
Endocitose mediada por receptores 
Diferenciação e Especialização Celular 
CÉLULA 
Exercer funções com maior 
rendimento 
 
Modificações 
 
Bioquímicas 
Morfológicas 
Funcionais 
 
Diferenciação e Especialização Celular 
CÉLULA 
Exercer funções com maior 
rendimento 
 
Modificações 
 
Bioquímicas 
Morfológicas 
Funcionais 
 
Membrana plasmática 
CÉLULA 
Exercer funções com maior 
rendimento