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1. Calcule o pI da glicina e identifique a forma iônica predominante neste ponto pI = ( pK1 + pK2 ) / 2 = ( 2,34 + 9,30 ) / 2 portanto, pI = 5,80 No ponto isoelétrico , o aminoácido não apresenta carga elétrica líquida pois o seu grupo alfa carboxil está carregado negativamente (COO-) enquanto o grupo alfa amino encontra-se carregado positivamente (NH3+), de modo que neste pH a glicina está na sua forma dipolar, totalmente ionizada, sem carga elétrica final. 3. Todos os aminoácidos devem apresentar uma curva de titulação semelhante a da glicina? Justifique a resposta Os aminoácidos variam em suas propriedades ácido-básicas e têm curvas de titulação características. Em alguns casos apresentam mais um grupo ionizável além dos grupos alfa amino e alfa carboxil. Assim, a curva de titulação irá apresentar uma terceira zona de tamponamento (e portanto um pK3). Os casos especiais são aminoácidos que possuem cadeias laterais ionizáveis: aspartato e glutamato(ácidos), lisina, arginina e histidina ( os básicos) e ainda a cisteína e a tirosina. 4. Por que razão a curva de titulação da glicina sofreu um achatamento no pK1 e outro no pK2? A glicina comporta-se como um ácido fraco diprótico, liberando primeiro num pH menor um H+ do grupo alfacarboxil, cujo pKa é mais baixo (pK1), e depois num pH maior um H+ do grupo alfa amino, que apresenta o maior valor de pKa (pK2). Dentro de faixas de valores de pH situados até uma unidade abaixo e acima de cada pKa (área de achatamento), o aminoácido age como um tampão e desta forma a adição, por exemplo, de uma base, durante a titulação não irá ocasionar uma mudança proporcional no valor de pH, que mudará mais lentamente, enquanto nas regiões fora dessa zona achatada, a adição da base provocará uma mudança muito maior no valor de pH e proporcional ao valor da base adicionada. 5. Caso a glicina ocorresse em altas concentrações no sangue ela desempenharia um papel importante na manutenção ( tamponamento ) do pH fisiológico? Justifique a resposta. No pH fisiológico ( aproximadamente 7,3 ),o grupo alfa carboxil da glicina já encontra-se inteiramente desprotonado . Assim, no pH 7,3 o único grupo que está parcialmente dissociado é o grupo alfa amino, que pode estar protonado ou desprotonado . Assim, como podemos observar na curva de titulação da glicina, a zona aproximada do pH do sangue não está na região de maior tamponeamento deste aminoácido. 6. Compare as curvas, teórica e experimental, obtidas nesta aula prática e comente eventuais divergências. De acordo com Lehninger, 5ª ed., os pKas da glicina são: pKa1 igual a 2,34 e o pKa2 igual a 9,60. Os dados estimados a partir do experimento apresentaram pequenas alterações nesses valores. Isso pode ser justificado pelo fato de que quando o pH está muito próximo de 1 ou de 14. Os valores medidos mostrados pelo pHmetro podem sofrer algumas alterações devido a presença de altas ou baixas concentrações de íons, segundo explicação contida no Lehninger, 6ª ed. Bibliografia: LEHNINGER. PRINCIPIOS DA BIOQUIMICA, 6ª ED., 2014.
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