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Efeito da temperatura na atividade enzimática INTRODUÇÃO Os sistemas vivos são formados por uma variedade enorme de reações bioquímicas, e quase todas elas são mediadas por catalisadores biológicos conhecidos como enzimas. A maioria das enzimas são proteínas, com exceção de um pequeno grupo de moléculas de RNA catalíticas. Como toda proteína, a sua função está intimamente relacionada com a sua estrutura. Portanto, a atividade catalítica de uma enzima depende da integridade da sua conformação nativa. Se uma enzima for desnaturada, ou dissociada nas suas subunidades, a sua atividade catalítica será perdida. No nosso corpo, as enzimas possibilitam que diversas reações que não ocorreriam ao acaso aconteçam em apenas alguns segundos, ou mesmo em fração deles. A reação de catalisação mediada pelas enzimas ocorre confinada em uma região específica denominada de sítio ativo. A molécula que se liga no sítio ativo e sobre a qual a enzima age, é denominada de substrato . Toda enzima é especifica para um substrato e o complexo enzima-substrato, é fundamental para a ação enzimática. Catalisador é qualquer molécula ou substancia que acelera a velocidade de uma reação. Uma reação enzimática simples pode ser escrita como: E + S ↔ ES ↔ P + E Onde E, S e P representam enzima, substrato e produto respectivamente. ES e EP são complexos transitórios da enzima com o substrato e com o produto. No final de uma reação enzimática, a enzima (E) permanece inalterada enquanto o substrato (S) sofre alterações transformando se em um produto (P). A temperatura é um fator importante na atividade das enzimas. Dentro de certos limites, a velocidade de uma reação enzimática aumenta com o aumento da temperatura. Entretanto, a partir de uma determinada temperatura, a velocidade da reação diminui bruscamente. O aumento de temperatura provoca maior agitação das moléculas e, portanto, maiores possibilidades de elas se chocarem para reagir. Porém, se for ultrapassada certa temperatura, a agitação das moléculas se torna tão intensa que as ligações que estabilizam a estrutura espacial da enzima se rompem e ela se desnatura. Seguindo o comportamento das reações químicas, a velocidade da atividade enzimática aumenta quando se aumenta a temperatura. Entretanto, a velocidade da reação aumenta até um máximo, após determinada temperatura a velocidade declina rapidamente, mesmo aumentando a temperatura. Isso ocorre por que a estrutura tridimensional das enzimas se rompe, impossibilitando-a de formar o complexo enzima-substrato. Pode-se dizer que a velocidade de reação aumenta ou diminui por um fator de 2 a cada variação de 10 graus centígrados na faixa de 10° a 70°. OBJETIVO DO ESPERIMENTO Verificar se o fator temperatura tem efeito na atividade enzimatica do colágeno (gelatina) e se de fato existe a bromelina (enzima do abacaxi). MATERIAIS Tubos de ensaio Becker Pipetador automático Estante Banho maria Refrigerador Placa de aquecimento Geladeira Agua Suco abacaxi Picete PROCEDIMENTO Primeiramente, fez-se a identificação de oito tubos de ensaios. Com a pipeta automática, transferiu-se 2ml de agua no tubo 1c e 2ml de suco de abacaxi no tubo 1E levados a geladeira (8º) por 15 minutos. Transferiu-se 2ml de agua no tubo 2C e 2ml de suco de abacaxi no tubo 2E e reservados em temperatura ambiente, em torno de 25ºC. Transferiu-se 2ml de agua no tubo 3C e 2ml de suco de abacaxi no tubo 3E e colocados em banho-maria a (45ºC) Transferiu-se 2ml de agua no tubo 4C e 2ml de suco de abacaxi no tubo 4E e levados a fervura a (100ºC). Feito isso, os tubos foram colocados sobre a bancada e adicionou-se 10ml de gelatina sem corante e sabor em cada tubo. Agitou-se com cuidado todos os tubos, para que a gelatina se homogeneizasse com a solução contida no tubo. Após, colocou-se todos os tubos no refrigerador e aguardou-se por cerca de 20 minutos, após foram retirados do refrigerador. resultado
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