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IFES – INSTITUTO FEDERAL DO ESPÍRITO SANTO CIÊNCIA TECNOLOGIA DE ALIMENTOS JÚLIO DIAS CAMPOREZI SANDY RODRIGUES DIAS SILVANA SOARES DA SILVA VINÍCIUS SERAFIM COELHO VIVIANI BAPTISTA BUENO CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA VENDA NOVA DO IMIGRANTE NOVEMBRO DE 2017 Objetivos: - Aprender sobre Cromatografia em Camada Delgada (CCD) e seus cálculos de Rf (Fator de Retenção); - Identificar as substâncias no cromatograma; - Identificar as substâncias no cromatograma. Resultados e discussão Um parâmetro frequentemente usado em cromatografia é o "fator de retenção" de um composto (Rf). Na CCD, o Rf é função do tipo de suporte (fase fixa) empregado e do eluente. Ele é definido como a razão entre a distância percorrida pela mancha do componente e a distância percorrida pelo eluente. Portanto: Rf= dc / ds Onde: dc= distância (cm, mm) percorrida pela substância. ds = distância (cm, mm) percorrida pela frente da fase móvel (eluente). Tabela do quanto a amostra percorreu sobre as placas em centímetros: Placa 1 Placa 2 Placa 3 Mancha verde até a cinza 0,5 0,5 0,5 mancha verde até a amarela 5,0 5,3 * Ponto verde até o pontilhado 5,5 5,7 5,5 *não foi possível ver a mancha amarela, pois deve ter sido colocada pouca amostra. **de um pontilhado há outro é 6 cm A) Cálculo sobre o fator de retenção dos carotenóides: Placa 1 ator de retenção dos carotenóides , 9090909F = Ponto verde até o cinzaPonto verde até o pontilhado = 5,5 0,5 = 0 0 Placa 2 ator de retenção dos carotenóides , 87719298F = Ponto verde até o cinzaPonto verde até o pontilhado = 5,7 0,5 = 0 0 Placa 3 ator de retenção dos carotenóides 0, 9090909F = Ponto verde até o cinzaPonto verde até o pontilhado = 5,5 0,5 = 0 B) Cálculo para o fator de retenção da clorofila Placa 1 ator de retenção da clorof ila , 09090909F = Amostra até o pontilhado Amostra até mancha amarela = 5,5 5,0 = 0 9 Placa 2 ator de retenção da clorof ila 0, 29824561F = Amostra até o pontilhado Amostra até mancha amarela = 5,7 5,3 = 9 Placa 3 Não foi possível verificar o fator de retenção da clorofila na placa 3, pois não foi possível visualizar a mancha amarela. Isto deve ter ocorrido devido a pouca quantidade de amostra que foi colocada na placa. Os pigmentos do espinafre são formados por uma mistura de componentes, dentre os quais encontramos as clorofilas e carotenos. A Clorofila é identificada facilmente nas plantas, sendo ela a responsável pela coloração verde das mesmas. A Clorofila A é mais abundante no reino vegetal, é encontrada junto com a clorofila B. As clorofilas apresentam estrutura complexa, porém os heteroátomos presentes em sua estrutura fazem com que esse composto apresenta característica polar. O que explica o fato de que a mesma substância seja menos arrastada pelo solvente, obtendo um alto valor de retenção. Os carotenos são hidrocarbonetos apolares que tem pouca afinidade com fase estacionária e maior afinidade com a fase móvel. Esse hidrocarbonetos devem, portanto, fluir com facilidade pela fase móvel, vale ressaltar que durante a corrida cromatográfica, mais se distancia do ponto de aplicação da amostra , sendo assim, possui um baixo valor de retenção. CONCLUSÃO A partir do experimento realizado é possível perceber que a cromatografia, depende do grau de afinidade da amostra com a fase estacionária e com o solvente. Também é possível separar os compostos presentes na amostra. Notou-se que o carotenóide possui mais afinidade com o solvente do que a clorofila, fazendo com que o fator de retenção de um seja menor que do outro. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS BOBBLIO, F. O.; BOBBLIO, P.A. Introdução à química de alimentos. 2. ed. São Paulo: Livraria Varela. 1992 COLLINS, C.H.; BRAGA, G.L. e BONATO, P.S. Introdução a métodos cromatográficos. 5ª ed. Campinas: Editora da Unicamp, 1993 COLLINS, C.H.; BRAGA, G.L. e BONATO, P.S. Introdução a métodos cromatográficos. 5ª ed. Campinas: Editora da Unicamp, 1995 DEGANI, A . L G., CASS, Q. B.; VIEIRA, P.C. Química Nova na Escola, 1998.7,21.
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