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Hidrólise enzimática Aplicada à produção de etanol de segunda geração Gabriel Terra Castilho dos Anjos Hidrólise Hidrólise é um termo aplicado a reações orgânicas e inorgânicas em que água efetua uma dupla troca com outro composto: XY + H2O HY + XOH KCN + H2O HCN + KOH C2H5Cl + H2O HCl + C2H5OH (Barcza, 2012) O que são enzimas? Enzimas são proteínas (polímeros de aminoácidos) que atuam como catalisadores em reações químicas. Oferece uma condição melhor de ambiente para que o substrato sofra a reação química em questão, diminuindo a energia de ativação das reações. http://www.lourdes-luengo.es/unidadesbio/proteinas/condensacion.htm O complexo celulolítico isolado a partir de fungos foi largamente interpretado em termos de desenvolvimento substancial biológico molecular e bioquímico especificamente para o fungo Tricoderma reesei – o primeiro fungo a ser utilizado na produção industrial de celulase, permanecendo ainda como a fonte mais utilizada. Além de celulases de fungos, há celulases produzidas por bactérias aeróbicas e anaeróbicas. (OGEDA et al., 2010) Isolamento da celulase Celulase x celulose (Bocchini et al., 2011) Maltose: glicose + glicose (a - 1,4). Presente no malte e na cevada ou no milho, resultante da hidrólise do amido. Celobiose: glicose + glicose (b - 1,4). Resultante da hidrólise da celulose, não se encontra livre na natureza. Hidrólise enzimática Em geral, tanto celulases livres como imobilizadas apresentam maior atividade na faixa de temperatura de 60 a 70 ºC e pH entre 4,5 e 5. Temperaturas mais elevadas podem favorecer a diminuição da cristalinidade e a mobilidade da água de hidratação, fatores que inibem a ação da celulase. Temperaturas baixas diminuem as colisões entre enzimas e substrato. (OGEDA et al., 2010) Alta atividade catalítica, as enzimas do complexo celulolítico são inibidas pelos produtos gerados na hidrólise (glicose e celobiose). * “Simultaneous Saccharifi cation and Fermentation” (SSF). (CGEE, 2010) Bagaço ou palha de cana de açúcar pré-tratado Rota enzimática Pesar 10 g em um erlenmeyer Solução tampão + Celulase Agitação/aquecimento a 65ºC Licor hidrolisado Fração residual (filtração) A hidrólise da celulose à glicose em meio aquoso catalisado pelas enzimas celulase possui uma taxa de rendimento muito baixa: Estrutura altamente cristalina da celulose, a qual dificulta o acesso do substrato aos sítios ativos. Lignina. Sendo assim, a etapa de pré-tratamento se faz necessária, tanto a fim de quebrar a estrutura cristalina da lignocelulose quanto a fim de remover a lignina, expondo as moléculas de celulose e hemicelulose à ação enzimática. Normalmente, hidrólises enzimáticas possuem um rendimento de açúcar menor que 20%, enquanto que, se uma etapa de pré-tratamento for utilizada, o rendimento pode alcançar até >90%. (OGEDA et al., 2010) A hidrólise de ligninas e hemicelulose gera açúcares e subprodutos (principalmente, difenóis, derivados de fenilpropano, cetonas, furfural e ácido acético), que muitas vezes inibem a fermentação microbiana. Rota enzimática para hidrólise é mais promissora do que a rota ácida. Não precisa de materiais muito resistentes à corrosão. Não necessita de ajuste de pH para fermentação, devido à solução Tampão. Gera menos inibidores de fermentação na hidrólise, tendo assim um maior rendimento na produção de etanol. Preço das enzimas inviabiliza a produção. Referências Bibliográficas BARCZA, M. V., Processos Unitários Orgânicos, Lorena, 2012. BOCCHINI, D. A.; PRADO, H. F. A.; LEITE, R. S. R.; FERREIRA, H.; SOUZA, M. M.; SILVA, R.; GOMES, E., Agroindustrial Wastes as Substrates for Microbial Enzymes Production and Source of Sugar for Bioethanol Production. 2011. Disponível em http://cdn.intechopen.com/pdfs-wm/18493.pdf CENTRO DE GESTÃO E ESTUDOS ESTRATÉGICOS, Química verde no Brasil, Brasília, 2010. OGEDA, T. L.; PETRI D. F. S., Hidrólise enzimática de biomassa. São Paulo, 2010.
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