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Temas Integrados em Biomedicina Hepatite A Hepatite A Histórico da Doença 1973: três pesquisadores americanos, Stephen Feinstone, Albert Kapikian e Robert Purcell visualizaram nas fezes (microscopia eletrônica) de pacientes portadores de hepatite infecciosa na fase aguda da doença partículas virais esféricas (27nm); 1975: reportaram com sucesso a infecção de chimpanzés, quando inoculados com concentrados de fezes pertencentes a pacientes infectados pelo vírus da hepatite A; A hepatite A, também conhecida como amarelão ou hepatite infecciosa, é uma inflamação contagiosa que afeta o fígado e é causada por um vírus que, geralmente, é benigno. Incidência Das Hepatites Fonte: https://www.nexojornal.com.br/grafico Hepatite A Etiologia Hepatite A (HAV) Vírus: ácido ribonucleico, icosaédrico, 27 nm; Inativação: Formol, Cloro e temperatura (138 º F); Transmissão: água e alimentos contaminados. Fonte: http://pontobiologia.com.br/hepatite-o-que-e-e-como-prevenir/ Hepatite A Mecanismos Fisiopatológicos Inoculação: via oral Replicação Viral: Via polimerase Resposta Imune: HLA (antígeno leucocitário humano), Linfócitos T CD8+ e Natural Killer. Eliminação: Canalículos biliares e Intestino. Fonte: Cuthbert, Jennifer A. "Hepatitis A: old and new." Clinical Microbiology Reviews 14.1 (2001): 38-58. Hepatite A Sinais e Sintomas: O período de incubação varia de 15 a 50 dias; Nos pacientes sintomáticos, o período de doença se caracteriza pela presença de: Fonte: http://www.drakeillafreitas.com.br/hepatitesvirais Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Imunoensaio/ Imunoenzimático: Ensaio realizado para quantificar um analito por meio de uma reação antígeno- anticorpo (Elisa); Antígeno: Agente estranho ou patógeno; Anticorpo: Proteína produzida pelo sistema imunológico em resposta a um Antígeno. ELISA DIRETO INDIRETO DIRETO Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Materiais Utilizados Kit Elisa HBsAg Lavadora de Elisa Espectrofotômetro de Elisa Hepatite A ELISA Fonte: http://lifesciences.neogen.com/pt/elisa-assay Hepatite A Elisa Direto Fonte: Slide- Profª Tércio Hepatite A Elisa Indireto Fonte: Slide Profª Tércio Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Hemograma; Tempo de Protombina; Albumina; TGO; TGP; Gama GT; Bilirrubinas; Fosfatase Alcalina. Biópsia: Não recomendado. Biologia Molecular: PCR, Hibridização. Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Hemograma Metodologia: Espectrofotometria, Impedanciometria e Desvio de Luz Polarizada; Interferente: Coágulo; Alterações: Plaquetas ↓ Linfócitos ↑ Tubo Material Horas de Jejum Edta Sangue Total 4h Fonte: https://laborimport.com.br/produto/coleta-de- sangue/tubo-edta-a-vacuo/ Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Tempo de Protombina Metodologia: Coagulométrico; Interferentes: Punção Traumática; Quantidade de amostra coletada; Medicamento; Valores de Referência: 12 a 22 segundos; Alterações: ↑ o Tempo de coagulação. Tubo Material Horas de Jejum Citrato Plasma Mínimo 4h Fonte: https://laborimport.com.br/produto/coleta-de- sangue/tubo-citrato-a-vacuo/ Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Albumina Metodologia: Colorimétrico; Interferentes: Amostra Hemolisada; Amostra Ictérica; Amostra Lipêmica; Valores de Referência: 3,5 a 5,20 g/dL; Alterações: ↓ Albumina. Tubo Material Horas de Jejum Gel Separador Soro Não necessário Fonte: http://www.prolab.com.br/material-hospitalar/tubo- vacuntainer/tubo-para-coleta-a-vacuo-tampa-amarela-(gel) Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Diferentes Tipos de Amostras Fonte: www.lacen.saude.pr.gov.br/arquivos/File/Manuais/Manual Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Transaminase Glutâmico Oxalacética (TGO) Metodologia: Cinético; Interferentes: Amostra Hemolisada; Amostra Ictérica; Amostra Lipêmica; Valores de Referência: Mulheres até 31 U/L; Homens até 37 U/L Alterações: ↑ TGO. Tubo Material Horas de Jejum Gel Separador Soro Não se aplica Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Transaminase Glutâmico Pirúvica (TGP) Metodologia: Cinético; Interferentes: Amostra Hemolisada; Amostra Ictérica; Amostra Lipêmica; Valores de Referência: Homens : Até 41,0 U/L; Mulheres : Até 31,0 U/L; Alterações: ↑ TGP. Tubo Material Horas de Jejum Gel Separador Soro Não se aplica Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Gama Glutamil Transferase (GGT) Metodologia: Cinético; Interferentes: Amostra Hemolisada; Amostra Ictérica; Amostra Lipêmica; Medicamentos; Valores de Referência: Homens : Até 60,0 U/L; Mulheres : Até 43,0 U/L; Alterações: ↑ Gama GT. Tubo Material Horas de Jejum Gel Separador Soro Não se aplica Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Bilirrubina Metodologia: Colorimétrico; Interferentes: Amostra Hemolisada; Amostra Lipêmica; *Sem Proteção á Luz; Valores de Referência: Bilirrubina Total : até 1,2 mg/dL; Bilirrubina Direta : até 0,4 mg/dL; Bilirrubina Indireta : até 0,8 mg/dL; Alterações: ↑ Bilirrubina Não Conjugada (Bilirrubina Indireta) Bilirrubina Indireta = Bilirrubina Total – Bilirrubina Direta. Tubo Material Horas de Jejum Gel Separador Soro Não se aplica Fonte: www.splabor.com.br/blog/.../aprende ndo-mais-tubos-para-coleta-de- sangue Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Fosfatase Alcalina Metodologia: Cinético; Interferentes: Amostra Hemolisada; Amostra Ictérica; Amostra Lipêmica; Valores de Referência: 0 - 1a: <= 250,0 U/L; 1 a 12 anos: <= 350,0 U/L; 12a - 13a: <= 350,0 U/L; Feminino Masculino 13a - 14a: <= 280,0 U/L <= 275,0 U/L; 14a - 15a: <= 280,0 U/L <= 275,0 U/L; 15a - 19a: <= 150,0 U/L <= 155,0 U/L; Alterações: ↑ Fosfatase Alcalina. Tubo Material Horas de Jejum Gel Separador Soro Não se aplica Hepatite A Diagnóstico Laboratorial: Sorologias Metodologia: Quimiluminescênciae Elisa; Interferentes: Amostra Hemolisada; Amostra Ictérica; Amostra Lipêmica; Valores de Referência: Reagente (+); Não reagente (-); Valor de Cut- off. Tubo Material Horas de Jejum Gel Separador Soro Não se aplica Hepatite A Fonte: http://www.cjflash.com.br/cace/informes,hepatites-virais-a-b-c-d-e-diagnastico-laboratorial,5.html Hepatite A Diagnóstico Laboratorial Fonte: Secretaria de Vigilância em Saúde/MS Hepatite A Prognóstico: Aproximadamente 85% dos indivíduos infectados com o vírus da hepatite A (HAV) têm recuperação completa em um período de até 6 meses; É raro, mas hepatite A pode causar insuficiência hepática aguda; A letalidade relatada é de 0.6% entre as idades de 5 e 14 anos,0.1% entre as idades de 15 e 39 anos, 0.8% entre as idades de 40 e 59 anos e 1.5% para 60 anos de idade ou mais. Hepatite A Prevenção Você sabe se proteger dos diferentes tipos de hepatite? Vacinação A vacina é a melhor forma de combate à Hepatite? Fonte: http://www.agencia.ac.gov.br/hepatite-uma-doenca-silenciosa Hepatite B Hepatite B Histórico da Doença 1963: geneticista americano Baruch Blumberg estudando anticorpos contra lipoproteínas séricas em pacientes que tinham recebido transfusão de sangue, identificaram no soro pertencente a um aborígine Australiano; A presença de um antígeno que reagia como o soro de dois doentes hemofílicos politransfundidos. Inicialmente, e em decorrência de suas características, foi proposto a denominação de antígeno vermelho; Somente em 1965, a descoberta do antígeno Austrália foi publicada no Journal of the American Medical Association (JAMA). Hepatite B Prince AM, em 1968, isolou outro antígeno no sangue durante o período de incubação de uma hepatite pós-transfusional. O referido antígeno foi denominado de antígeno SH, relativo à hepatite sérica. Posteriormente, comprovou-se que o antígeno SH de Prince AM era o mesmo antígeno Austrália de Blumberg; Finalmente, em 1970, foi demonstrada por microscopia eletrônica em soros positivos para o antígeno Austrália, uma terceira partícula de forma esférica e medindo cerca de 42nm; Em 1971, Almeida e cols caracterizou o que chamaram de partícula de Dane, o pacote viral completo do VHB. Características do agente: Constituía-se de um invólucro externo; Um núcleo; 42nm; Sendo constituída por um ácido nucléico (DNA). Hepatite B Etiologia: Hepatite B (HBV) Vírus: ácido desoxirribonucléico, Hepadnavirus, não citopático, envelopado, hepatotrófico; Envelopamento Externo: 3 Ag de superfície (HBsAg),proteína S, proteína X. Fonte: http://telelab.aids.gov.br Hepatite B Mecanismos Fisiopatológicos Morte dos Hepatócitos: indiretamente; Resposta: apresentação Hospedeiro-Epítopos Virais; Migração: Fígado; Replicação Viral: Lise direta dos hepatócitos infectados, CD8+. Fonte: http://www.medicinanet.com.br/conteudos/acp-medicine/6458/hepatite_viral.htm Hepatite B Sinais e Sintomas: O início dos sinais e sintomas da doença varia de 30 a 180 dias; Na Hepatite B aguda a evolução consiste em três fases: Prodrômica: febre, dores musculares e sintomas digestivos. Eventualmente essa fase pode não acontecer. Ictérica: abrandamento dos sintomas digestivos e surgimento da icterícia sendo as vezes precedido de colúria. A hipocolia pode surgir por prazos curtos as vezes se acompanha de prurido. Convalescença: Desaparece a icterícia surgindo a sensação de bem estar. De 90 a 95% dos casos podem evoluir para cura. Hepatite B Sinais e Sintomas: Hepatite B crônica: Quando a reação inflamatória persiste por mais de 6 meses; Os sintomas quando presentes são inespecíficos predominando: Fadiga Náuseas Mal estar Vômito Hepatite B Diagnóstico Laboratorial Fonte: ministério da saúde Hepatite B Diagnóstico Laboratorial Fonte: http://www.cjflash.com.br/cace/informes,hepatites-virais-a-b-c-d-e-diagnastico-laboratorial,5.html Hepatite B Diagnóstico Laboratorial: Hepatite B aguda Fonte: www.hepcentro.com.br/hepatite_b Hepatite B Diagnóstico Laboratorial: Hepatite B Crônica- Soroconversão Tardia Fonte: www.hepcentro.com.br/hepatite_b Hepatite B Diagnóstico Laboratorial: Hepatite B Crônica- Sem Soroconversão Fonte: www.hepcentro.com.br/hepatite_b Hepatite B Prognóstico Em média, somente 1% dos pacientes diagnosticados com hepatite B aguda morrem por causa da doença; Mas cerca de 5-10% das pessoas não melhoram, nem eliminam o vírus, permanecendo com a hepatite, que agora passa a ser chamada de crônica. Hepatite B Prevenção Você sabe se proteger dos diferentes tipos de hepatite? Vacinação; A vacina é a melhor forma de combate à Hepatite? Fonte: ttp://www.agencia.ac.gov.br/hepatite- uma-doenca-silenciosa/ Fonte: http://tvwin.com.br/noticias/hepatite-b-vacina- disponivel-em-sao-goncalo/ Hepatite C Hepatite C Características do agente 60nm; Revestido de um invólucro lipoprotéico; Genoma constituído de ácido ribonucleico (RNA). 1989: identificaram finalmente o genoma do agente viral responsável por 80 a 90% das hepatites pós- transfusionais. Tal agente foi denominado de vírus da hepatite C. Histórico da Doença Década de 80, estudos experimentais em primatas e desenvolvidos no Centro de Controle de Atlanta EUA, revelaram a presença de um agente infectivo. Hepatite C Etiologia Hepatite C (HCV) Vírus: Flavivirus, ácido ribonucleico, envelopado,cerca de 10 000 nucleotídeos; Transmissão: Exposição sanguínea percutanêa (injeções, drogas injetáveis e intranasais), sexo desprotegido, perinatal, hemodiálise. Fonte: http://telelab.aids.gov.br Hepatite C Mecanismos Fisiopatológicos Resposta Imune: 45% dos pacientes jovens saudáveis desenvolvimento vigorosos da resposta imune, erradicação; Inativação: Muito Pouca, incidência elevada de casos por infecção crônica (T CD4+) e (CD8+), resposta fraca visualizada na infecção aguda; Variabilidade: coinfecção; Dano hepático: Fibrogênese, Cirrose. Fonte: http://saudenocorpo.com/wp-content/uploads/2015/07/Hepatite-C.jpg Hepatite C Sinais e Sintomas: O inicio dos sinais e sintomas clínicos da doença neste hospedeiro varia de 15 a 150 dias; A manifestação é extremamente rara; Quadro semelhante ao das outras hepatites. Hepatite C Diagnóstico Laboratorial Fonte: ministério da saúde Hepatite C Diagnóstico Laboratorial Anti HCV; • Enzimas hepáticas alteradas. HCV- RNA; • Determinação quantitativa. Hepatite C Fonte: http://www.cjflash.com.br/cace/informes,hepatites-virais-a-b-c-d-e-diagnastico-laboratorial,5.html Diagnóstico Laboratorial Hepatite C Diagnóstico Laboratorial Fonte: ministério da saúde Hepatite C Diagnóstico Laboratorial Imunoblot RIBA (Recombinant Immunoblot – Chiron). Western blot Fonte: http://www.ageracaociencia.com/2018/01/03/tecnica-de- western-blot/ Fonte: http://slideplayer.com.br/slide/1531762/ Tiras impregnadas com peptídeos sintéticos e recombinantes (c100, c33, c22 e NS5), aplicados em linhas separadas na 1 fase sólida. Hepatite C Diagnóstico Laboratorial PCR em tempo real: utilizado para quantificação de carga viral Fonte: http://www.fleury.com.br/medicos/educacao-medica/manuais/manual-hematologia/pages/pcr.aspx Hepatite C Diagnóstico Laboratorial RFLP (Restriction Fragments Length Polymorphism); Genotipagem do VHC. Fonte: http://slideplayer.com.br/slide/363408/ Hepatite C Diagnóstico Laboratorial Biopsia: após coletadas, as amostras são analisadas no microscópio para avaliar a presença de alterações nas células. Fonte: http://saude.culturamix.com/dicas/biopsia-do-figado/attachment/biopsia-do-figado-2 Hepatite C Diagnóstico Laboratorial: Biopsia Fonte: http://anatpat.unicamp.br/lamfig1.html Hipertrofia de células de Kupffer Hepatite C Prática clinica: Amostra ictérica Hepatite C Prática clinica: Hepatite C Prática clinica: Hepatite C Prática clinica: Hepatites Diagnósticos automatizados podem ser realizados através de diversos equipamentos: • Advia Centaur Fonte: https://www.healthcare.siemens.com/immunoassay/systems/a dvia-centaur-cp-immunoassay-sys • Architect abbott Fonte: http://www.unimedvaledocai.com.br/exibir- noticia.php?id=108 • WR-5000 Fonte: http://www.wamadiagnostica.com.br/equipamentos/wr-5000/ • Cobas 8000 Fonte: http://www.ipressjournal.pt/novo-sistema-cobas-e-801- da-roche-diagnostics/ Hepatite C Variabilidade genética: O HCV possui grande variabilidade genética; Determinar o genótipo do vírus que infecta um paciente é fundamental para garantir o tratamento adequado. No Brasil, podem ser encontrados os genótipos 1, 2, 3, 4 e 5. As frequências gerais são: 64,9% para o genótipo 1; 4,6% para o genótipo 2; 30,2% para o genótipo 3; 0,2% para o genótipo 4; 0,1% para o genótipo 5 Hepatite C Prognóstico O tratamento tem uma resposta que varia dependendo do genótipo do vírus, sendo positiva em 40% a 50% dos indivíduos infectados com o genótipo 1 depois de 48 semanas de tratamento; Já em indivíduos com o genótipo 2, a resposta é positiva em 70% a 80% dos casos após 24 semanas de tratamento. Enquanto que para o genótipo 4, a resposta positiva é de 65% após 48 semanas de tratamento.; As evidências para o tratamento do genótipo 6 quase não existem, e as que existem são apenas para 48 semanas de tratamento com a mesma dosagem usada nos casos de genótipo 1. Hepatite C Prevenção Você sabe se proteger dos diferentes tipos de hepatite? Vacinação A vacina é a melhor forma de combate à Hepatite? Fonte: https://saude.umcomo.com.br/artigo/como- prevenir-a-hepatite-c-17036.html Caso Clínico MAS, 32 anos, branco, casado, natural e procedente de São Paulo, farmacêutico Paciente relata que apresenta mal-estar geral, associado a náuseas e inapetência, nega febre ou mialgia. Apresenta há um dia alteração da coloração da urina (escurecida). Nega comportamento de risco, uso de drogas, tabagismo e etilismo. Nega viagens recentes, nega contato com água de enchente. Reside em casa com saneamento básico e água encanada, relata ter sido vacinado para Hepatite B. Relata, há 35 dias, acidente com material biológico (picada de agulha após colher sangue de um paciente) e não procurou assistência médica. Exame físico normal, exceto por leve icterícia. Exames laboratoriais demonstram hemograma normal e elevados níveis de transaminases(TGO e TGP). Qual(is) marcadore(s) sorológico(s) deve(m) ser realizado(s) para diagnóstico da doença? Anti HCV Levando em consideração que o paciente é imune a de Hepatite B e o seu histórico, determine a hipótese diagnóstica? Hepatite C Link: Game https://goo.gl/forms/Rk7eDIF7S8qVp3sC3 Perguntas Game Hepatites Virais 1- Em que ano identificaram o genoma da agente viral da hepatite C? A. 1973 B. 1989 C. 1963 D. 1975 2- Qual das hepatites foi uma descoberta acidental? A. Hepatite A B. Hepatite B C. Hepatite C D. Todas as alternativas acima 3- Quais as fases da Hepatite B aguda? A) Fase I, II e II B) A, B, C C) Prodrômica, Ictérica e Convalescença D) Pré Ictérica, Convalescença e Prodrômica 4- A Hepatite A é caracterizada pela presença de: A) Fadiga, Febre e Vomito B) Colúria, Hipocolia Fecal e Icterícia C) Olhos amarelos, cansaço e dores musculares D) Colúria, Fezes escuras e Icterícia 5- Em relação ao vírus das hepatites A e C respectivamente, responda: São vírus RNA e vírus DNA São vírus DNA e vírus RNA São vírus RNA e vírus RNA São vírus DNA e vírus DNA 6- Quais células são danificadas quando se tem hepatite? Epiteliais Tronco Embrionárias Hepatócitos Adiposas 7- Quanto à replicação viral, qual vírus da hepatite possui uma molécula de DNA? Hepatite A Hepatite B Hepatite C Todas as alternativas 8- Qual estrutura viral é composta externamente pelo HBsAg? Hepatite A Hepatite B Hepatite C Todas as alternativas 9- Considere as seguintes informações sobre as hepatites virais. I - A hepatite C pode ser transmitida por sangue contaminado proveniente de procedimentos incisivos como tatuagens, colocação de piercings e manicures. II - As diferentes formas de hepatite viral constituem doenças inflamatórias do fígado que podem ser prevenidas por meio de vacinação. III - Algumas das formas de hepatites virais podem tornar-se crônicas e evoluir para câncer de fígado. Quais estão corretas? Apenas I Apenas II Apenas I e II Apenas I e III I, II e III 10- Paciente de 53 anos apresenta em seu exame, na sorologia para hepatite B, o HbsAg negativo e o anti-HBs positivo. É correto afirmar que ele está? Imune para Hepatite B Na fase aguda da Hepatite B Na fase crônica da Hepatite B Nenhuma das alternativas
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