Relatório Elisa

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ATIVIDADES DE LABORATÓRIO
Acadêmico: Carla Izadora Pagot	RGM: 141.144
	Tema da Aula: Elisa (Indireto)
Data: 26/04/2018
Objetivo(s): Anti vírus para Chikungunya IgM
Material por Grupo
	Quantidade
	Discriminação do Material
	Especificação (se houver)
	8 poços
	Microplaca
	-
	100ul
	Calibrador
	IgM humano
(pronto p/ uso)
	100ul
	Controle Positivo
	IgM humano
(pronto p/ uso)
	100ul
	Controle Negativo
	IgM humano
(pronto p/ uso)
	-
	Conjugado Enzimático
	IgM anti-humano marcado com peroxidase (cabra)
	-
	Tampão de amostra
	IgG/RF
	-
	Tampão de Lavagem
	10x concentrado
	Atividades Realizadas
Foram realizadas as seguintes etapas:
Incubação: Foi transferido 100ul do calibrador, controle positivo e controle negativo nos poços individualmente na microplaca através de pipetagens e coberto com uma película protetora.
Incubação durante 60 minutos, à 37ºC.
O tampão de lavagem foi diluido utilizando uma pipeta e água destilada (1:9)
Para a realização da lavagem foi removida a película protetora e esvaziado os poços, em seguida foi lavado três vezes com tampão de lavagem.
Incubação do conjugado: Pipetagem de 100ul do conjugado enzimático em cada um dos poços e incubado por 30 minutos, em temperatura ambiente.
Lavagem: Remoção da película protetora e esvaziamento dos poços, em seguida foi lavado três vezes com tampão de lavagem, já pronto.
Incubação do substrato: Pipetagem de 100ul da solução cromógeno em cada um dos poços da microplaca e incubado em temperatura ambiente por 15 minutos, com as luzes da sala do laborátorio apagadas.
Parada de reação: Pipetagem de 100ul de solução de parada em cada um dos poços da microplaca na mesma ordem e velocidade que a solução de cromógeno foi indrotuzida.
Leitura: A leitura fotométrica não foi possível no espectofotrometro, entretanto essa foi feita a olho nú.