relatorio de bioquimica

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Relatórios de Bioquimica II Etapa
Maria Imaculada Elias de Jesus
2018
Caracterização dos lipídeos
Introdução
Os lipídios são substâncias orgânicas oleosas ou gordurosas, insolúveis em água. Os ácidos graxos são as unidades fundamentais da maioria dos lipídios. Eles possuem um grupo carboxila único e uma "cauda" hidrocarbonada não-polar. Os lipídios mais abundantes e simples que contém ácidos graxos como unidades fundamentais são os triacilgliceróis ou triglicerídeos. Os triglicerídeos são ésteres do álcool glicerol com três moléculas de ácidos graxos. São, portanto, moléculas hidrofóbicas, não-polares, pois não contém grupos funcionais eletricamente carregados ou altamente polares. Aqueles que contêm apenas um tipo de ácido graxo são chamados de simples os que contêm dois ou três tipos de ácido graxo são chamados de mistos.
Materiais
Reagentes utilizados:
Ácidos: Oleico, acético, palmítico, láurico, esteárico;
Acetona;
Água destilada;
Balança elétrica;
Espátula comum;
Micro espátula;
Papel de pesagem.
Métodos
Procedimento A – Estado físico dos ácidos graxos
Observar e anotar o estado físico dos seguintes ácidos graxos: 
Ácido oleico;
Ácido acético; 
Ácido palmítico;
Ácido láurico;
Ácido esteárico.
Discutir o estado físico destes ácidos graxos em função de suas estruturas químicas.
Numerar 5 tubos de ensaio e adicionar os seguintes componentes, como segue:
	Tubo
	Reagente 1
	Reagente 2
	1
	Ácido Esteárico – 5mg
	Ácido Oleico – 1mL
	2
	Ácido Esteárico – 20mL
	Ácido Oleico – 1mL
	3
	Ácido Esteárico – 40mg
	Ácido Oleico – 1mL
	4
	Ácido Esteárico – 100mg
	Ácido Oleico – 1mL
	5
	Ácido Esteárico – 200mg
	Ácido Oleico – 1mL
Aquecer os tubos diretamente na chama até a fusão dos sólidos. Deixar esfriar e comparar o ocorrido em cada tubo.
Procedimento B – Solubilidade dos ácidos graxos
Numerar 6 tubos de ensaio e adicionar os seguintes componentes, como segue:
	Tubos
	Reagente 1
	Reagente 2
	1
	Ácido Oleico – 1mL
	Água Destilada – 1mL
	2
	Ácido Oleico – 1mL
	Acetona – mL
	3
	Ácido Acético – 1mL
	Água Destilada – 1mL
	4
	Ácido Acético – 1mL
	Acetona – 1mL
	5
	Ácido Esteárico – pouco
	Água Destilada – 1mL
	6
	Ácido Esteárico – pouco
	Acetona – 1mL
Após a adição dos componentes, agitar os tubos e observar o ocorrido. Comparar os resultados dos tubos.
Resultados e Conclusões
Procedimento A – Estado físico dos ácidos graxos
	Tubo
	Reagente 1
	Reagente 2
	Após Aquecimento
	1
	Ácido Esteárico – 5mg
	Ácido Oleico – 1mL
	Amarelo Escuro
	2
	Ácido Esteárico – 20mg
	Ácido Oleico – 1Ml
	Âmbar
	3
	Ácido Esteárico – 40mg
	Ácido Oleico – 1mL
	Amarelo Escuro
	4
	Ácido Esteárico – 100mg
	Ácido Oleico – 1mL
	Amarelo Escuro
	5
	Ácido Esteárico – 200mg
	Ácido Oleico – 1mL
	Âmbar
Um importante procedimento do ponto de fusão dos lipídeos é o tamanho da sua cadeia e a presença de insaturações. Quanto maior sua cadeia, maior o ponto de fusão, e quanto mais insaturações na cadeia, menor o ponto de fusão.
Procedimento B – Solubilidade dos ácidos graxos
	Tubo
	Reagente 1
	Reagente 2
	Após Agitamento
	1
	Ácido Oleico – 1mL
	Água Destilada – 1mL
	Bifásico – óleo por cima
	2
	Ácido Oleico – 1mL
	Acetona – mL
	Homogêneo – amarelo
	3
	Ácido Acético – 1mL
	Água Destilada – 1mL
	Homogêneo – incolor
	4
	Ácido Acético – 1mL
	Acetona – 1mL
	Homogêneo – incolor
	5
	Ácido Esteárico – pouco
	Água Destilada – 1mL
	Homogêneo – Ácido por cima
	6
	Ácido Esteárico – pouco 
	Acetona – 1mL
	Homogêneo – Com formação de precipitado
Os Lipídeos possuem característica apolar, portanto sua solubilidade ocorre em solvente com a mesma característica, quando utilizado solvente polar há formação de misturas heterogêneas (bifásicas)
Isolamento de DNA
Introdução
O ácido desoxirribonucleico é um composto orgânico cujas moléculas contêm as instruções genéticas que coordenam o desenvolvimento e funcionamento de todos os seres vivos e alguns vírus. O seu principal papel é armazenar as informações necessárias para a construção das proteínas e RNA. A molécula de DNA consiste em duas cadeias de nucleotídeos dispostas em hélice em torno de um eixo. As bases púricas e pirimídicas de cada cadeia polinucleotídica situam-se dentro da hélice dupla, em planos paralelos entre si e perpendiculares ao eixo da hélice (JUNQUEIRA & CARNEIRO, 2005).
Objetivo
A extração da molécula de DNA da banana proporcionando assim, a visualização do material genético, completando o conhecimento obtido em sala de aula.
Materiais
Reagentes Utilizados:
Uma caixa de morangos ou banana;
Solução salina – EDTA: NaCL 0,15 M e EDTA 0,1 (pH = 8,0);
SDS 2% (P/V);
Etanol absoluto 95%;
Solução Tris – EDTA (TE): 10 mM Tris CL, 1 mM, EDTA – pH 7,5
Materiais por grupo
1 Tubo Falcon de 15 mL;
2 Tubos de ensaio na estante;
4 Béqueres de 100 mL;
2 Pipetas graduadas de 1 mL;
1 Bastão de vidro;
Papel de filtro;
Funil.
Métodos
Colocar 2 morangos em um tubo Falcon de 50 mL;
Adicionar 10 ml de solução salina EDTA;
Adicionar 3 mL de SDS 2%;
Macerar o morango com auxilio de um bastão de vidro, durante 5 minutos;
Filtrar a solução com gaze para retirar os fragmentos do morango;
Colocar o filtrado em um tubo de ensaio;
Adicionar lentamente, com pipeta, 4 mL de álcool etílico 95% de modo que os dois líquidos não se misturem;
Notar que na interface, forma-se um material insolúvel filamentoso, o DNA.
Resultados e Conclusões
Após adição de todos os reagentes juntamente com a amostra, observou-se a formação filamentosa do DNA em meio à solução aquosa
Fermentação da Levedura
Introdução
À transformação de uma substância em outra, com a ajuda de microrganismos (fungos, bactérias, etc.), dá-se o nome de fermentação. Esta transformação é utilizada em vários processos, produtos que são utilizados no dia-a-dia, desde a massa do pão, fabricação de cerveja, etc. Cada uma das situações o processo que é utilizado é diferente, pois o objetivo também é diferente, no caso da cerveja existe a transformação dos açucares das plantas (malte) em álcool e CO2. Já na fabricação do pão, os fermentos consomem o açúcar vindo do amido da massa, libertando CO2, o que faz com que o volume da massa aumente. A fermentação destina-se à obtenção de energia, e ocorre com a perda da glicose (ou outros substratos como o amido) formando piruvato, que por sua vez, seguidamente, é transformado noutro produto, álcool etílico ou acido láctico, definindo a fermentação alcoólica e a fermentação láctica, respectivamente. A fermentação não ocorre na presença de oxigénio.
Materiais
Reagentes utilizados
Fermento biológico em pó;
Solução de glicose 20%;
Solução de NaCL 20%;
Água destilada gelada;
Água deslilada na temperatura aproximada de 50° C;
Balões de aniversario;
2 béquers de 250 mL;
Balança;
Espatola para pesagem;
2 bastões de vidro
Materiais por grupo
4 Tubos de ensaio na estante;
4 Pipetas graduadas de 10 mL;
4 Balões de aniversario
Métodos
	Tubo
	A
	B
	C
	D
	E
	Temperatura
	50°C
	Ambiente
	Ambiente
	Ambiente
	Ambiente
	Fermento
	2X
	2X
	1X
	2X
	2X
	H2O
	5mL
	5mL
	5mL
	5mL
	5mL
	Aguardar
	15 min
	Não
	Não
	Não
	Não
	Açucar
	1mL
	1mL
	1mL
	Não
	Não
	Agitar
	Sim
	Sim
	Sim
	Sim
	Não
Resultados e conclusões
Tubo A: Produziu pouco gás (CO2) pela fermentação;
Tubo B: Ocorreu fermentação e produziu CO2;
Tubo C: Ocorreu fermentação e produziu Co2;
Tubo D: Não produziu CO2;
Tubo E: Não produziu CO2.
Justificativa
Para que ocorra a fermentação e consequentemente produção de gás CO2 é necessário fornecer à levedura um substrato, que no caso desse experimento é representado pela glicose, portanto, nos tubos em que não houvedisponibilidade de glicose a levedura não conseguiu promover a fermentação.
Pesquisa de constituintes do leite
Introdução
O leite é o produto da secreção da glândula mamária dos mamíferos, e constitui o único alimento na primeira fase de vida. É caracterizado por uma solução coloidal de proteínas em emulsão com gorduras e uma solução de vitaminas e minerais, peptídeos e outros componentes. (Philippi S.T., Pirâmide dos Alimentos, 2008. É rico em nutrientes sendo, considerado um alimento quase completo, largamente comercializado e consumido pela população, principalmente crianças e idosos. Por ser de origem biológica, ele pode apresentar variação nos seus componentes. O leite é um alimento composto aproximadamente por 87,0% de água, 3,6% de gordura, 3,6% de proteínas, 4,5% de lactose e 0,8% de vitaminas e sais minerais, sendo que a porcentagem de cada elemento pode variar conforme a espécie, raça, individualidade, alimentação, tempo de gestação, intervalos entre ordenhas, “stress” ou ação de drogas medicamentosas. Desse modo, o leite possui um valor nutritivo importante na alimentação humana. 
Materiais
Reagentes utilizados:
Leite;
Ácido acético 5%;
Água destilada.
Materiais por grupo:
2 Erlenmeyers de 125 mL;
2 Béqueres de 100 ml e 2 de 250 mL;
5 Pipetas graduadas de 2 mL;
5 Tubos de ensaio em estante;
2 Provetas de 50 mL;
Pinça de madeira
Estante de madeira com tubos de ensaio;
Filtro de papel.
Métodos
Extrações:
Adicionar 50 mL de água destilada morna a 50 mL de leite em béquer de 250 mL. Acrescentar ácido acético a 5% (ou HCL 5%) gota a gota, com agitação lenta, até que o leite se coagule (queijo). Deixar em repouso por cerca de 5 minutos. Descartar o líquido sobrenadante sobre uma gaze, recolhendo o filtrado no erlenmeyer de 125 mL;
Transferir o filtrado acima para o béquer de 250 mL. Aquecê-lo diretamente na chama (sobre a tela de amianto) até ebulição. Baixar a chama e deixar fervendo até reduzir o volume a mais ou menos 40 mL. Soprar sobre a superfície quando houver formação de espuma.
Filtrar e deixar esfriar. Esta solução será utilizada para os testes de alguns constituintes químicos.
Pesquisa de açúcares redutores:
Colocar 2,0 mL do reagente de Benedict em um tubo de ensaio;
Adicionar 1 mL do filtrado obtido acima;
Aquecer até ebulição e observar a mudança de coloração do reagente 
Pesquisa de fosforo:
Colocar 2,0 mL do filtrado em 2 tubos de ensaio;
Adicionar 1 mL da solução de molibidato de amônio 5% em 1 dos tubos. Misturar;
Observar o aparecimento de cor comparando com o tubo controle.
Pesquisa de cálcio:
Colocar 2,0 mL do filtrado em um tubo de ensaio;
Adicionar o reativo de Sulkowitch gota a gota (4 gotas) até aparecimento de uma turvação ou precipitado branco.
Pesquisa de cloretos:
Colocar 2,0 mL do filtrado em um tubo de ensaio;
Adicionar de 2 a 3 gotas de HNOᶾ 5% até o aparecimento de turvação ou precipitado branco.
Resultados e Conclusões.
 II. Pesquisa de açúcares redutores.
Após ebulição observou-se uma mistura bifásica de coloração verde em cima e amarelo mostarda em baixo
III. Pesquisa de fosforo.
Tubo controle- Límpido (transparente)
Tubo com molibidato: Turvo (esbranquiçado)
IV. Pesquisa de cálcio
Branco e turvo – Cálcio precipitou.
Sulkowitch – Contém oxalato de amônia que em presença de cálcio irá formar oxalato de cálcio. É insolúvel e branco, se o teor de cálcio estiver baixo notta-se apenas uma ligeira turvação.
V. Pesquisa de cloretos.
O aparecimento de turvação ou precipitação branca resulta do AgCL. Devido ao cloro reagir com AgNO.