TRANSCRIÇÃO E PROCESSAMENTO DE RNA

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TRANSCRIÇÃO E PROCESSAMENTO DE RNA
O DNA pode sofrer tanto processo de duplicação como também transcrição em uma molécula menor e de fita simples chamada de RNA.
O DNA é transcrito em “transcrito primário” que é o equivalente ao mRNA nos procariotos. Nos eucariotos, o DNA é transcrito em pré-mRNA o qual é um precursor do mRNA
O que diferencia um dNTP de um rNTP é a pentose e uma das bases pirimidinas. O carbono 2 da pentose de um dNTP é ligado a um H, enquanto em um rNTP é um grupo OH. As bases possíveis de um dNTP são adenina, guanina, timina e citosina, enquanto em um rNTP são adenina, guanina, uracila e citosina.
O RNA, diferentemente do DNA, é um polímero unifilamentar.
Os RNAs se subdividem em 5 tipos: mRNAs (Especificam polipeptídeos), tRNA (adaptadores entre aminoácidos e códons), rRNA (componentes estruturais e catalíticos dos ribossomos), snRNA (componentes estruturais dos espliceossomos) e miRNA (envolvidos na expressão gênica).
A cadeia de DNA que contém o gene e que será transcrita, pode estar em qualquer uma das duas fitas de DNA.
- Síntese de RNA: Para serem formados, dependem de ribonucleotídeos (rNTP) como precursores e apenas uma das fitas de DNA servirá como molde em um determinado segmento (gene), e por consequência, a cadeia de RNA formado será semelhante à fita não molde (Só que com uracilas e riboses tbm, obviamente). Pode ser iniciada sem o auxilio de um primer como guia.
	A síntese ocorre de 5’->3’.
- RNA polimerase ou holoenzima: constituída de 4 subunidades: duas (montagem do cerne tetramérico no promotor/ligação a fatores de transcrição), (sítio de ligação aos rNTP), ’ (sítio de ligação ao DNA molde) e (início da transcrição (reconhecer e ligar a RNA polimerase ao sítio promotor)).
As transcrições realizadas pelas RNA polimerases se iniciam em regiões do DNA denominadas de promotores. Mas antes de se associar aos promotores, a subunidade reconhece as sequências de consenso -35 (sequência de reconhecimento) e -10 (auxilia no deserenrolamento). Essas regiões também fazem parte dos promotores...
- Transcrição em procariotos: A subunidade reconhece a região do promotor no DNA e liga a RNA polimerase a ela, iniciando uma nova cadeia de RNA (fase chamada de iniciação). Após isso há a continuação da síntese com a adição de rNTPs à cadeia de RNA recém formada (Alongamento). E por último, há a finalização da síntese seguida da liberação da molécula de RNA (terminação).
	 
Unidade transcricional: promotor + região codificante + terminador
O término da transcrição ocorre quando a RNA polimerase recebe um sinal de término e com isso o complexo de transcrição se dissocia do DNA. Há duas formas de sinalizar o término: com terminadores independentes de rô e os dependentes. Este necessita de uma proteína auxiliar conhecida como fato rô, e aquele não depende da proteína e sua finalização é realizada quando se tem repetições invertidas na transcrição fazendo com que o RNA se dobre em uma estrutura semelhar a um grampo causando a parada da RNA polimerase.
 
- Em células eucarióticas, há cinco tipos de RNAs polimerases que sintetizam diferentes tipos de RNAs, diferentemente dos procariotos que só possuem uma RNA polimerase. Quantos às RNAs polimerases em eucariotos, elas são: RNA polimerase I (transcrição de rRNA 5, 8S, 18S e 28S), RNA polimerase II (Transcrição de todos os genes que codificam proteínas), RNA polimerase III (transcrição de tRNA, rRNA 5S e outros pequenos RNAs nucleares) e, por último, RNA polimerase IV e V (Transcrição de pequenos RNAs em vegetais). As RNAs polimerases em eucariotos são mais complexas que as em procariotos, contendo pelo menos 10 subunidades em cada uma delas.
- As RNAs polimerases precisam do auxilio de outras proteínas denominadas fatores de transcrição. Fatores de transcrição são denominados TFIIX (transcription fator X for RNA polymerase II) em que o X identifica o fator que desempenhará determinada função.
O início da transcrição se baseia numa sequência de associações de TFIIX até formar no complexo necessário para transcrição. A primeiro fator de transcrição a se associar é denominado TFIID. Ele se associa a uma sequencia de consenso chamada de TATA box a qual, nesse caso, será o cerne do promotor (ela tá situada a -25 do startpoint – onde ocorre o início da transcrição) e posiciona o sítio ativo da RPII de modo que ela inicie a transcrição no local correto. Após a associação da TFIID, a TFIIA se junta ao complexo e, logo após, a TFIIB (tem papel na seleção do startpoint) também se junta. A RPII, previamente associada com a TFIIF, unem-se também ao complexo de iniciação. Depois, unem-se também TFIIE, TFIIH e TFIIJ. A TFIIH é uma proteína quinase que tem o papel de fosforilar a cauda da RPII causando a sua ativação.
- Processamento do transcrito primário
- Adição da 7-metil guanosina: A adição desta proteína ajuda a proteger o RNA primário da degradação. E também ajuda no reconhecimento do códon de iniciação na tradução de RNA.
- Splicing: processo de remoção dos íntrons (começa com uma sequência GU e termina com uma AG) e junção dos exons. O spliceossomo que realiza essa função. A tradução do mRNA só é realizada utilizando os exons.
- Poliadenilação: adição de uma cauda poli(A) realizada proferida pela poli A polimerase. Com isso, têm-se o aumento da estabilidade do RNA. Esse processo também é importa para o transporte/movimentação do mRNA no meio intracelular.
- Termino da transcrição – A clivagem do RNA pré formado ocorre em um sítio localizado de 11 a 30 nucleotídeos da sequência final AAUAAA. Após a clivagem que ocorre a poliadenilação.
Tanto a poliadenilação quanto a clivagem são catalisados pelo complexo multimérico.