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BIOFÍSICA L4 - LISTA DE EXERCÍCIOS – MÉTODOS BIOFÍSICOS 1. A técnica de espectrofotometria de absorção é utilizada para o estudo qualitativo e quantitativo de soluções, nesta técnica um feixe de luz monocromática é incidido sobre uma solução e sua absorção é correlacionada com a composição daquela solução. Responda: a) Como podemos definir a composição de uma solução utilizando esta técnica? b) Ao ser submetida ao espectro luminoso, uma substância mostrou a seguinte relação entre comprimento de onda e absorção. Qual o comprimento de onda que você usaria para dosar esta substância? (nm) 410 420 430 440 450 460 470 480 490 500 ABS 0,05 0,08 0,60 0,20 0,05 0,05 0,08 0,25 0,08 0,05 = comprimento de onda ABS = absorbância 2. Explique o fundamento da técnica de “Western blot” e cite um exemplo de aplicação desta técnica no diagnóstico clínico. 3. A enzima girase é um tetrâmero composto por duas subunidades de massa molecular de 110 kDa e duas subunidades de 90 kDa. Uma amostra da girase pura é analisada em um gel de poliacrilamida desnaturante. Qual é o perfil de bandas esperado no gel? (a) Uma banda de 200 kDa (b) Duas bandas: 200 e 400 kDa (c) Duas bandas: 90 e 110 kDa (d) Uma banda de 400 kDa. 4. Explique o fundamento da técnica de “Western blot” e cite um exemplo de aplicação desta técnica no diagnóstico clínico. 5. Como ocorre o fracionamento de proteínas nas cromatografias de peso molecular, troca iônica e afinidade?