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* * CINÉTICA DO PROCESSO FERMENTATIVO Aula 6 Livro: Biotecnologia Industrial – Schmidell, Lima, Borzani - Vol 2-Cap. 6 * * Cinética de Bioprocessos: Avaliar a evolução dos valores de concentração de um ou mais componentes, do sistema de cultivo em função do tempo de fermentação; Componentes do sistema Microorganimos (biomassa) – X Produto(s) do metabolismo – P Nutriente do substrato que compõem o meio de cultivo - S * * Curva de ajuste dos resultados de uma experiência idealizada de fermentação * * Parâmetros para determinação da Cinética Dentre os produtos formados, escolhe-se o produto de interesse econômico; Quanto ao substrato, adota-se o denominado substrato limitante: o conhecimento dos perfis de variação do substrato, produto e biomassa representam o ponto de partida para a descrição quantitativa de uma fermentação. * * Informações Importantes: Identificação da duração do processo (geralmente baseada nos instantes em que X e P apresentam valores máximos (Xm e Pm); Possibilita a transposição de um experimento de laboratório para escala industrial; A cinética também possibilita uma comparação quantitativa entre as diferentes condições de cultivo (pH, T); Parâmetros para determinação da Cinética: * * Medida do Crescimento Microbiano Crescimento: Aumento ordenado de todos os componentes celulares (aumento da BioMassa); Multiplicação: Aumento do número de indivíduos de uma população; * * Acompanha-se o crescimento de uma cultura de Microorganimos * * Curva de Crescimento Microbiano lnX vs tempo * * Cálculo da Velocidade específica de Crescimento µ: velocidade específica de crescimento da população microbiana * * * * * * * * Formas de medir o crescimento microbiano * * Parâmetros de Transformação: Velocidades instantâneas de transformação (inclinação das tangentes às respectivas curvas): Crescimento e Reprodução dos microorganimos: Consumo de substrato: Formação de Produto: * * Velocidades Específicas de Transformação: Como a concentração do agente microbiano X aumenta durante o processo contínuo e descontínuo, é mais lógico analisar os valores das vel. instantâneas com relação à referida concentração microbiana, ou seja, especificando-as com respeito ao valor de X em uma dado instante. Velocidade específica de Crescimento Microbiano: Velocidade específica de Consumo de substrato: Velocidade específica de formação de produto: * * Classificação dos Processos Bioquímicos Quanto à Cinética do Processo CLASSIFICAÇÃO DE GADEN Considera a associação da formação do produto com o crescimento microbiano; Consumo de substrato; Crescimento do microorganismos; Formação do produto; * * CLASSIFICAÇÃO DE GADEN Classificação dos processos quanto à formação do produto: Crescimento Associado (Tipo 1) Crescimento Semi-Associado (Tipo 2) Crescimento Não- Associado (Tipo 3) * * Tipo 1: Produção associada ao Crescimento Microbiano Compostos produzidos simultaneamente à síntese de células microbiana na fase de crescimento A formação do produto está diretamente associado a formação da biomassa no reator e ao consumo de substrato “COMEU EXCRETOU” Exemplo: Fermentação alcóolica, Produção de aminoácidos, enzimas * * Tipo 1: Produção associada ao Crescimento Microbiano Variação das concentrações em função do tempo – fermentação alcoólica * * Tipo 1: Variação das velocidades específicas em uma fermentação alcoólica Formação do metabólito está diretamente associado às reações do metabolismo ou decomposição do substrato. * * Tipo 2: Produção Semi-Associada ao Crescimento Microbiano No início ocorre a formação de produto de forma intracelular; A célula fica intoxicada e começa a expulsar o produto; Só libera o produto quando todo o substrato for consumido; Ex: Fermentação cítrica * * Tipo 2: Produção Semi-Associada ao Crescimento Microbiano * * Tipo 2: Observa-se 2 fases distintas: 1ª: a velocidade específica de consumo de substrato está diretamente relacionada ao crescimento dos microorganimos, não havendo praticamente formação do produto. 2ª fase: há uma boa semelhança entre os perfis das 3 velocidades. * * A formação do produto não está diretamente relacionada à razão de crescimento das células. Usualmente o produto se acumula durante o período de limitação dos nutrientes que segue a fase ativa de crescimento. O produto só aparece na fase estável do cultivo celular. Tipo 3: Produção Não associada ao Crescimento * * Tipo 3: A produção é lenta associado a produção de moléculas complexas O microorganismo só libera para o meio o produto quando sofre um fator de stress Ex: falta de nutrientes Ex: produção de antibióticos * * Tipo 3: A máxima velocidade específica de formação de produto ocorre quando as demais velocidades sofreram uma redução significativa: No começo da fermentação predominam transformações produtoras de energia com formação de biomassa, sendo que o antibiótico é formado quando o metabolismo oxidativo se encontra atenuado * * A escolha do tipo do reator também depende da classificação do processo microbiano: TIPO 1- Permite regime contínuo e batelada; TIPO 2 – Preferencialmente regime batelada; TIPO 3 – Preferencialmente regime batelada;
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