Relatório Toxico Triagem de urina por ccd

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA
CAMPUS GOVERNADOR VALADARES
FACULDADE DE FARMÁCIA
DISCIPLINA: TOXICOLOGIA ANALÍTICA
Prof.: Leonardo Meneghin
RELATÓRIO TRIAGEM DE FÁRMACOS EM URINA POR CCD
Clarisse Lima 
Maiara Salvador
Máyra Fonseca
Paloma Carvalho
Governador Valadares
2017
INTRODUÇÃO
A identificação de substâncias de interesse toxicológico em amostras biológicas representa um desafio significativo, considerando a grande e crescente quantidade de substâncias potencialmente presentes, bem como a complexidade das matrizes e, freqüentemente, a disponibilidade de quantidades limitadas de amostra.
A cromatografia em camada delgada é uma técnica popular para identificação de substâncias em toxicologia analítica devido à sua velocidade, confiabilidade e baixo custo. Além de permitir a separação dos compostos, através da variação tanto da fase estacionária quanto da fase móvel, a facilidade de aplicação de diferentes reagentes cromogênicos proporciona a obtenção de dados adicionais. 
Os testes cromatográficos de urina tornaram-se os métodos mais empregados como triagem para avaliar o uso de drogas pois são testes são realizados de forma rápida e com sensibilidade adequada.
RESULTADOS
A primeira placa foi feita para o padrão das substâncias a serem testadas. O Rf da cafeína foi Rf = 0,25 e do AAS foi Rf = 0,05. O eluente utilizado foi o clorofórmio.
Figura 1. Placa dos padrões utilizando clorofórmio
Na placa 1 que teve como solvente também o clorofórmio somente dois Rfs puderam ser identificados, pois o eluente ultrapassou a linha de retenção prejudicando a leitura das corridas. A cafeína obteve Rf = 2,5, como indicava o padrão utilizando a mesma fase móvel, e a amostra biológica obteve Rf = 2,3. Por terem o Rf semelhante pode-se dizer que existe a presença de cafeína na amostra.
Figura 2. Corrida com clorofórmio
Na placa 2 a nicotina e a cafeína obtiveram Rf= 8,4; como pode ser visto na Figura 3. Enquanto a nafazolina obteve Rf=2,7. A amostra biológica revelou Rf=8,4 indicando a possível presença das duas substâncias, nicotina e cafeína, na urina. O teste cromatográfico com o branco também revelou Rf semelhante às amostras de nicotina e cafeína, o que não deveria ter acontecido, pode ter ocorrido devido a um erro de contaminação durante a realização do teste.
Figura 3. Corrida com metanol
QUESTIONÁRIO
Quais amostras podem ser utilizadas para análise de triagem de fármacos?
As amostras podem incluir urina, sangue e lavado gástrico.
Quais cuidados devem ser tomados com a amostra em relação à sua conservação e estabilidade da análise?
A urina deve ser analisada em até 2 horas após a coleta, se for necessário mais tempo de espera a amostra pode ser refrigerada.
Qual a finalidade da análise realizada?
Teve como objetivo a identificação de substâncias nesta matriz. Pode ser utilizada para indicar o uso de uma droga de abuso ou um fármaco por um indivíduo.
Qual o fundamento do método?
O método se baseia na separação de compostos pela afinidade das substâncias pela fase móvel ou pela fase estacionária. As diferenças de mobilidade de cada substância determinam seu fator de retenção, que funciona como uma característica de cada substância.
Descreva a reação envolvida na utilização de cada agente cromogênico, e o grupo química que estes agentes são capazes de revelar.
O reagente de Dragendorff trata-se de uma solução de iodeto de bismuto e potássio. O nitrato de bismuto reage com iodeto de potássio em solução ácida (normalmente através do uso de ácido acético ou ácido tartárico) e forma um sal com cor laranja – K[BiI4].
Bi(NO3)3 + 4 KI → K[BiI4] + 3 KNO3
Capaz de revelar a maioria dos compostos orgânicos nitrogenados, como os alcaloides. Assim como compostos ácidos, neutros e alcalinos.
O cloreto férrico faz revelação de fenóis e compostos enolizáveis.
FeCl3 + XY FeX + 3YCl
Qual a justificativa para a realização de dois tipos de extração, ácida e alcalina?
Para que aconteça a extração, o composto deve estar em pH que favoreça o processo. Por isso usa-se meio ácido para compostos ácidos e meio alcalino para compostos alcalinos.
Justifique a utilização de dois sistemas solventes diferentes, como os utilizados na prática.
Os diferentes solventes são utilizados para avaliar a afinidade dos compostos pela fase móvel. A velocidade de corrida do composto é influenciada pela polaridade da molécula e do solvente utilizado.
Cite outros métodos utilizados para a realização da triagem de fármacos em urina, e descreva vantagens e desvantagens de cada um deles.
Além de CCD a triagem pode ser feita utilizando CG, CLAE e associação com Espectrometria de Massas. Porém a CCD é mais técnico e versátil.
Qual a forma de apresentação dos resultados?
Os resultados podem ser observados de acordo com as manchas na placa que vão indicar o Rf de cada substância.
3.10 Realize uma análise crítica da técnica executada, e identifique possíveis modificações para otimização.
Apesar de ser uma técnica econômica e prática, às vezes pode ser necessário testes complementares para confirmação dos resultados. Além de não quantificar a substância. Pode-se modificar a fase móvel dos testes para otimização.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Goulart, D.S. Aplicações das técnicas de cromatografia no diagnóstico toxicológico. Seminário apresentado à disciplina Seminários Aplicados, em nível de doutorado, Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, UFG, Goiânia- GO, 2012. 24 abr. 2013.
LINI, R. S., et al. Caracterização de fármacos por cromatografia em camada delgada. Revista Brasileira de Farmácia. v. 95, n. 1, 2014.