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Roteiro de Estudos Tabela Útil: Desoxirribose Adenosina Trifosfato Guanina Adenina Guanosina Guanosina Difosfato Citosina Fosfato Citidina Desoxitimidina Monofosfato Uracila Uridina Trifosfato Roteiro de Estudos Timidina Timina Para responder a 1: As bases nitrogenadas são classificadas em dois grupos: purinas e pirimidinas. As purinas tem 2 cadeia heterocítricas, as pirimidinas tem apenas 1. Base nitrogenada com uma pentose e um fosfato são nucleotídeos. Um nucleosídeo é um nucleotídeo sem o grupo fosfato. 2 funções dos nucleotídeos: armazena informação genética e produzem energia(como ATP). Como se forma os ácidos nucléicos? São formados por nucleotídeos(base nitrogenada + açucar + grupo fosfato) porém o nucleosídeo não tem o grupo fosfato. Quais os átomos de carbono do resíduo de açúcar que estão conectados por ligações fosfodiéster? A ligação fosfodiester ocorre entre nucleotídeos. Com o carbono 3’ e o carbono 5’. Desenhe as estruturas da desoxirribose, guanina e do fosfato e classifique suas solubilidades relativas em água. Estruturas na tabela, a solubilidade fica: Fosfato>Desoxirribose>Guanina. Como essas solubilidades influenciam na estrutura da fita dupla do DNA? As três estruturas são polares e se ligam a açucares da parte externa da dupla hélice do dna, quando em meio aquoso. Então as bases hidrofóbicas da dupla hélice ficam no interior do dna. Dada a seqüência de bases de um segmento de DNA (5’)GTCAATCG(3’): (a) O que (5´) e (3´) significa? São os carbonos presentes nas extremidades da fita de DNA. b) Qual o grupo químico encontrado na porção terminal 5’ da cadeia de DNA? E na porção terminal 3’? 5’ vem do grupo hidroxila e 3’ do grupo fosfato. Roteiro de Estudos c) Qual a seqüência complementar? Ver esse vídeo para entender:https://www.youtube.com/watch?v=3voSMs3X_8Q A só se liga com T e vice-versa, e o C só se liga com o G e vice-versa. (A=T e C=G) Então fica CAGTTAGC. Descreva o modelo tridimensional da estrutura do DNA proposto por Watson e Crick. Dupla hélice(2 polímeros), que têm um esqueleto de açúcar e fosfato e bases nitrogenadas planares e empilhadas. Quais interações moleculares são importantes para manter essa estrutura? Pontes de hidrogênio(não-covalente, hidrogênio com elemento eletronegativo). Mostre as interações de ponte de hidrogênio entre A-T e C-G. Adenina e Timina fazem 2 ligações ponte de hidrogênio e Citosina e Guanina fazem 3 ligações ponte de hidrogênio. Amostras de DNA isoladas de bactérias de duas espécies não identificadas continham 32% e 17 % de adenina, respectivamente, do total das bases. Assumindo que as duas espécies possuem genoma de DNA fita dupla, quais proporções relativas de guanina, timina e citosina você esperaria encontrar? DNA de qual espécie desnaturaria com maior facilidade quando aumenta a temperatura? Cada genome tem 3,2 bilhões de pares de bases nitrogenadas em cada célula. Adenina e Guanina são maiores e tem mais de um anel, então estariam em proporções maiores. Timina e Citosina são menores e compostas apenas por um anel então estão em proporções menores. O que desnatura é a quebra das pontes de hidrogênios entre as bases nitrogenadas. Então quanto mais bases, mais pontes e mais desnaturação. O que são histonas? São proteínas com carga positiva, que enovelam o DNA, compactando-o, formando a estrutura denominada nucleossomo, que são os blocos construtores dos cromossomos. A maioria do DNA nas células eucarióticas está empacotada em nucleossomo. Roteiro de Estudos Replicação de DNA ‘Replicação do DNA é semiconservativa.” Explique essa frase. A síntese semiconservativa do DNA vai ocorrer de modo a formar uma nova cadeia complementar à cadeia da molécula mãe que lhe serve de molde. E a cada novo DNA sintetizado, metade do DNA antigo é conservado. Considerando que as duas fitas de DNA são antiparalelas e que as DNA polimerases só adicionam nucleotídeos à extremidade 3’ da cadeia em crescimento, como é possível duplicar as duas fitas simultaneamente seguindo a forquilha de replicação? De forma descontínua, ou seja, em sentidos opostos. Sendo assim, uma fita tem replicação de forma contínua, e outra por em fragmentos (fragmentos de Okasaki) DNA polimerases podem apresentar atividades de exonucleases além de catalisar a formação da ligação fosfodiéster. Para que serve essas atividades de exonucleases? A atividade de exonuclease da DNA polimerase I tem uma função de revisão na polimerização e podem aumentar a precisão da replicação. Qual é a função de telomerase? A telomerase é uma enzima capaz de realizar a transcrição reversa, pois sintetiza curtos segmentos de DNA a partir de uma molécula-molde de RNA, um de seus principais componentes. O que é uma sequência consenso? São sequências que diferem geralmente em não mais que uma ou duas bases. Transcrição Descreva semelhanças e diferenças entre o processo de replicação do DNA e a transcrição. A replicação do DNA se inicia com a quebra das ligações de hidrogênio que une as bases nitrogenadas do DNA. Nesse momento, outros nucleotídeos aproximam-se de cada fita-molde e inicia o pareamento entre A-T e G-C, resultando em duas novas moléculas de DNA, que são idênticas à molécula inicial. É desse modo que o DNA é replicado. A transcrição ocorre quando um RNA se forma a partir do DNA. Roteiro de Estudos Replicação Transcrição DNA polimerase RNA polimerase Fita Dupla Fita Simples A-T, G-C A-U, G-C 5’-3’ 5’-3’ O que é promotor? Dê exemplos. É a região que vai determinar o local de início da transcrição na fita e a incorporação do 1º nucleotídeo na posição +1. TATA BOX, CAAT BOX E GC BOX. O que são os fatores de transcrição? São proteínas que ajudam a encontrar a RNA polimerase a encontrar o ponto de início da transcrição. O TFIID(Transcription factor iid) reconhece o local de início. A TBP (TATA Binding Protein) vai reconhecer o TATA box. Tem o fator 2 de transcrição que ajuda a RNA 2 polimerase a sintetizar RNA mensageiro, e o fator basal que auxilia a RNA polimerase a se aderir ao promotor e ao sítio de ligação. O que é transcrito primário? É o RNA resultante da transcrição. Quais processamentos acontecem no transcrito primário para produzir mRNA? Remoção das sequências intercalares não traduzidas (íntrons), que paralisam a sequência codificante. O que é splicing alternativa? Certos exons podem ser deixado de fora o mecanismo de splicing pode reconhecer os pontos alternativos para os introns. Cite duas diferenças entre a transcrição em procarioto e em eucarioto. Nos eucariotos ocorrem no citoplasma, tem outros fatores, que vão reconhecer o capacete 5’ e vai ligar no mRna. Qual é a principal diferença entre procarioto e eucarioto em relação ao mecanismo de controleda expressão gênica? Genes eucariotos não se organizam em operons, os procariotos sim. Roteiro de Estudos Como a histona acetilase pode regular a expressão gênica? Remove o grupo acetil da histona, fazendo com que a molécula ganhe força novamente, condensando o DNA. O que é PCR? Como essa técnica pode ser utilizada nas práticas médicas? PCR é reação em cadeia da polimerase. Pode ser usada para fazer DNA in vintro. As afirmações falsas. A transcrição se refere ao processo de síntese de RNA mensageiro (mRNA), único tipo de molécula de RNA presente nas células eucarióticas.Falsa pois não é o único tipo de RNA Na transcrição, mRNA é sintetizada na direção de 3´-5´, enquanto que na replicação a fita nova de DNA é sintetizada na direção de 5´- 3´. Sempre de 5’-3’ Tanto RNA polimerase quanto DNA polimerase usam desoxirribonucleotídeos como o substrato para síntese de novas moléculas. Falsa. Só o DNa usa. DNA polimerase catalisa a formação de ligação fosfodiéster, enquanto que RNA polimerase catalisa a formação de ligação ribonucleotídica. As duas fazem ligação fosfodiester. Se houver deleção do promotor de um gene, a transcrição deste gene será altamente estimulada, uma vez que o deslizamento de RNA polimerase ao longo do gene vai ser mais rápido. Sem o promotor a ligação não fica mais rápida. Tem dificuldade até pra começar Fatores de transcrição são moléculas de DNA onde RNA polimerase se liga para iniciar a transcrição. Fatores de transcrição são proteínas presentes nos eucariontes e elas se ligam no promotor RNA polimerase Tanto em procariotos quanto em eucariotos, a molécula de RNA recém-sintetizada sofre diversas modificações pós-transcricionais. Só nos eucariotos. Eucariotos: CAP, Cauda poli A, Splicing Alternativo. No processamento de RNA, a cauda poli A é adicionada na extremidade 5’, enquanto o CAP (7-metilguanosina) é adicionado na extremidade 3’. É ao contrárioJ os íntrons dos genes procarióticos são transcritos, porém removidos posteriormente pelo processo de splicing. 14. Após o término da transcrição, RNA polimerase e o complexo de transcrição se dissociam, porém as duas fitas DNA permanecem separadas. Os procariontes não tem splicing Transcrição reversa se refere ao processo de síntese de RNA no sentido contrário da fita codificadora.Falsa, Transcrição reversa. RNA vira DNa(vírus) Assinale falso ou verdadeiro e corrija as afirmativas falsas. ___ Nucleotídeos são monômeros constituintes de ácidos nucléicos e Roteiro de Estudos são formados de pentose, fosfato e ácido nítrico.Isso são as bases Nitrogenadas ___ Os nucleotídeos servem somente para síntese de ácidos nucléicos. ele também é cofator, molécula emergente e de sinalização. ___ Em ácidos nucléicos, a ligação que une os nucleotídeos é a glicosídica. É fosfodiester e ponte de hidrogênio. ___ Única diferença entre RNA e DNA é a presença de grupo fosfato no carbono 5´de pentose. desoxirribose e ribose ___ DNA presente no nosso organismo possui uma estrutura de dupla hélice, sendo que uma das interações mantêm as duas fitas de DNA unidas é a ponte de hidrogênio entre grupo fosfato e açúcar. essa é feita nas bases ___ Catalisar a formação da ligação fosfodiester é a única atividade enzimática que DNA polimerase consegue exercer. ela adiciona nucleotídeos e verifica ___ As helicases tem como função romper pontes de hidrogênio entre o grupo fosfato e açúcar.rompe entre as bases ___ A DNA polimerase catalisa a formação da ligação fosfodiester, adicionando nucleotídeos na extremidade 5´ do primer. é na 3’
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