5 - Meios de Cultura

Prévia do material em texto

14/09/2014
1
MEIOS
DE 
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
DE 
CULTURA
ProfªProfª Juliana de Andrade CintraJuliana de Andrade Cintra
MEIOS DE CULTURA
• Material nutriente.
• Preparado em laboratório.
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
• Para a multiplicação de micro-organismos.
• Meios de cultura:
– CULTURA.
CULTURA DE 
MICRO-ORGANISMOS
CRITÉRIOS DEVERÃO SER CONSIDERADOS 
PARA O MEIO DE CULTURA
• Deverá conter:
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
Deverá conter:
– Nutrientes corretos para a multiplicação do MO.
– Quantidade de água necessário para a multiplicação
do MO.
– pH ajustado para o crescimento do MO.
CULTURA DE 
MICRORGANISMOS
CRITÉRIOS DEVERÃO SER CONSIDERADOS 
PARA O MEIO DE CULTURA
• Deverá ter a quantidade específica de O2:
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
– Sua ausência.
• Meio de cultura deverá ser estéril:
– Não conter MO vivos.
• Cultura deverá:
– Incubada na temperatura adequada para o
crescimento do MO.
TIPOS DE MEIOS DE CULTURA
MEIO QUIMICAMENTE DEFINIDO
• Composição química exata é conhecida:
– Sintéticos.
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
MEIO COMPLEXO
• Apresentam:
– Componentes químicos conhecidos ou não.
• Origem vegetal, animal ou de MO:
– Extrato de levedura, de carne, de plantas ou de
produtos da digestão protéica destas ou de outras
fontes.
TIPOS DE MEIOS DE CULTURA
Meio Sintético
• Cultivo de Escherichia coli
• NH4H2PO4...................1,0g
Meio Complexo
• Ágar nutriente
• Extrato de Carne......3,0g
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
• Peptona......................5,0g
• NaCl............................5,0g
• MgSO4.7H2O...............0,2g
• K2HPO4.......................1,0g
• Água destilada.......1000mL
• Peptona.....................5,0g
• Ágar.........................15,0g
• Água destilada.....1000mL
14/09/2014
2
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
DE ACORDO COM SUA APLICAÇÃO OU 
FUNÇÃO
MEIO DE ENRIQUECIMENTO
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
• Contém em sua composição:
– Sangue, soro ou extratos de tecido animal ou vegetal,
e se presta para o isolamento de bactérias.
• Normalmente:
– Metodologia é empregada.
• Amostras de fezes, solo, urina, água, carne, ovos, dentre
outras.
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
DE ACORDO COM SUA APLICAÇÃO OU 
FUNÇÃO
MEIO DE ENRIQUECIMENTO
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
• Geralmente é um meio líquido:
– Contêm todos os nutrientes.
• Multiplicação de bactérias de interesse.
– Está em baixo nível.
– Tornando possível sua detecção.
• Agar Sangue:
– Streptococcus.
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
Caldo LST Ágar Sangue
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
DE ACORDO COM SUA APLICAÇÃO OU 
FUNÇÃO
MEIO SELETIVO E DIFERENCIAL
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
• Na microbiologia clínica ou de saúde pública:
– Necessário a determinação de MO específico.
– Associados com doenças ou com condições de pouca
sanidade.
• Para se atingir esse objetivo:
– Utiliza-se meios de cultura seletivo ou diferenciais.
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
DE ACORDO COM SUA APLICAÇÃO OU 
FUNÇÃO
SELETIVO
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
• Contêm em sua composição:
– Substâncias químicas específicas destinadas a
facilitar o crescimento de determinado grupo de
bactérias.
• Baird Parker + Telurito:
– Staphylococcus
• Ágar Sabouraud Dextrose
• Ágar Batata Destrose:
– Fungos
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
Ágar Baird Parker Ágar Batata Destrose
14/09/2014
3
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
DE ACORDO COM SUA APLICAÇÃO 
OU FUNÇÃO
DIFERENCIAL
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
DIFERENCIAL
• Utilizado:
– Identificação da colônia da bactéria de
interesse.
• Quando há outras bactérias crescendo no mesmo
meio de cultura.
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
DE ACORDO COM SUA APLICAÇÃO OU FUNÇÃO
DIFERENCIAL
• Contém reagentes ou substâncias:
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
– Permitem após inoculação e incubação.
• Distinção de certos tipos de bactérias.
– Agar Sangue:
» Bactérias hemolíticas e não hemolíticas.
OUTROS MEIOS
• Específicos para dosagem, contagem, estocagem ou
manutenção.
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
Ágar Sangue
Bactérias Hemolíticas e Não Hemolíticas
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
DE ACORDO COM SEU ESTADO FÍSICO
MEIO SÓLIDO
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
• Contém ágar em sua composição:
– 1,5 a 3,0%.
• Ágar Sabouraud.
• Ágar Nutriente.
• Ágar Verde Brilhante.
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
DE ACORDO COM SEU ESTADO FÍSICO
MEIO SEMI-SÓLIDO
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
• Contém ágar em baixas concentrações em sua
composição:
– 0,5 a 1,0%.
– Tioglicolato.
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
DE ACORDO COM SEU ESTADO FÍSICO
MEIO LÍQUIDO
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
• Não contém ágar em sua composição:
– Caldo Nutriente.
– Caldo Verde Brilhante.
– Caldo EC.
– Caldo LST.
14/09/2014
4
PREPARO DOS MEIOS DE CULTURA
• Tipo Caldo e Ágar:
– Preparados pela reunião dos ingredientes
individuais requeridos.
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
• Podem ser encontrados comercialmente
desidratados:
– Necessitam apenas da adição de água.
– Quantidade estabelecida .
– Relação ao peso.
ESTERILIZAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
• Após o preparo:
– Acondicionamento adequado.
• Esterilização.
– Erlenmeyer., balões volumétricos ou tubos de ensaio.
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
Erlenmeyer., balões volumétricos ou tubos de ensaio.
– Cuidadosamente limpos.
• Esterilização:
– Realizado em autoclave.
– Temperatura de 121ºC.
– 15 a 30 minutos.
ESTERILIZAÇÃO DOS MEIOS DE 
CULTURA
• Eficiência da esterilização:
– Incuba-se os meios:
• 37ºC por 24H
RABELO, R. N. RABELO, R. N. 
37 C por 24H.
– Meio está pronto para ser utilizado.
– Armazena:
• 4ºC por tempo determinado.
• 7 dias.
RABELO, R. N. RABELO, R. N.