relatorio 1 extracao dna

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Introdução
 Dna
	A molécula de DNA (dupla hélice) foi descoberta em 1953 por Francis Crick e James Watson, porém o estudo só veio ganhar destaque em 1957, quando os cientistas demonstraram que o DNA se auto-replica. Essa descoberta foi um marco na história da medicina, pois revolucionaram a investigação científica ligada às ciências da vida.
	O DNA pode ser descrito como uma complexa cadeia de polímeros (ou macrocélulas), polímeros tecidos de forma dupla através de pontes de hidrogênio. A estrutura do DNA é complexa a partir dos pares de nucleotídeos, formando histonas, nucleossomos e os cromatídeos que formam os cromossomos.
	O DNA é o ácido desoxirribonucleico responsável de conter toda a informação genética de um indivíduo ou ser vivo, informação que é única e irrepetível em cada ser, pois a combinação de elementos é construída de maneira única. Este ácido contém, além disso, os dados genéticos herdados de geração em geração, de modo que sua análise e compreensão são de grande importância para realizar qualquer tipo de investigação científica para tratar da identidade ou das características de um indivíduo.
	O DNA pode ser detectado no núcleo (centro) de qualquer célula de um organismo, dentro de pequenos pacotes genéticos chamados cromossomos, com exceção das células vermelhas do sangue (hemáceas). Essas células não têm núcleo e, portanto, não têm DNA. Assim, o DNA das células brancas do sangue é exatamente igual ao DNA das células da pele, dos tecidos, da raiz do cabelo, dos ossos, do sêmen, da saliva, dos músculos, das células contidas na urina. "O DNA é formado no momento da concepção e jamais mudará, mesmo depois da morte". 
Extração do DNA
	A extração do DNA é necessária para várias aplicações na biologia molecular como PCR, digestão com enzimas de restrição. Assim como análises de amostras forenses, amostras clinicas, amostras de solos e ambientais. Existem vários kits comerciais disponíveis para extração e purificação do DNA e para cada um desses kits já foi demonstrado por PCR que a sensibilidade de detecção é diferente. A escolha do kit correto é crucial para aperfeiçoar a execução do experimento.
	A extração das moléculas de ácidos nucleicos é uma técnica básica. Existe uma grande variedade de motivos para isolar e purificar ácidos nucleicos tais como para um diagnóstico, atividades de pesquisa, na identificação de um corpo e em testes de paternidade. No entanto, para ser analisado ou manipulado são necessários isolá-los e separá-los dos demais componentes celulares. Isso deve ser feito de tal modo a conseguir grau adequado de pureza, integridade e quantidade, pois esses fatores influenciarão nos procedimentos seguintes.
	Dependendo do organismo do qual os ácidos nucleicos serão extraídos, haverá variações no protocolo. No entanto, os fundamentos desta técnica são os mesmos para qualquer amostra biológica.
Os passos envolvidos na extração do DNA consistem em:
Lise celular - O primeiro passo envolve a quebra da célula para acessar o DNA. Isto pode ser feito utilizando método físicos ou químicos.
Remoção dos lipídeos - Remoção ou separação da membrana lipídica e restos celulares. Isto normalmente é feito utilizando detergentes como SDS e por centrifugação.
Desproteinação do extrato celular - A desnaturação proteica é feita utilizando proteases como pronases e proteinases K. Após a desnaturação as proteínas são separadas do extrato celular.
Remoção do DNA - A remoção do DNA é feita adicionando uma RNAs que rapidamente degrada RNA em subunidades ribonucleotídeas. Esse passo normalmente é opcional na maioria dos kits.
Precipitação/Agregação
Eluição do DNA - Eluição – por fim ocorre a liberação dos ácidos nucléicos (DNA/ RNA) da membrana. Isto proporciona o DNA purificado pronto para ser utilizado em diferentes aplicações.
Objetivos do Experimento
	Esse experimento tem como objetivo a extração das moléculas de DNA do morango e aplicando os conhecimentos adquiridos em sala sobre o DNA, compreendendo os conceitos de genética básica e demonstrando como podemos identificar e extrair o DNA do morango, como um bom modelo para esse tipo de estudo e atividade prática.
Material Utilizado
	*Gral com pistilo 
	* Balança
	* Pipeta pasteur
	* Proveta
	* Bastão de vidro
	* Gase
	* Funil
	* Tubo de ensaio
	* Espátula
	* Papel toalha
	* 2 morangos
* Água destilada
* Sal
* Detergente
	* Álcool 100%
Metodologia
	 Foram retirados os cabos verdes de todos os morangos e em seguida foram adicionados no gral e com o pistilo foi feito o maceramento vagarosamente de cada um para que evitar o aparecimento de espuma. Quanto mais os morangos forem macerados, melhor será, pois maior será sua superfície de contato com a solução que fará a lise, melhorando a ação da solução sobre as células. Com o auxílio de uma espátula foi coletado 5 gramas de sal e colocado no béquer, para resultados mais eficazes foi necessário o uso da balança para pesagem.
	Em uma proveta foi medido 50 mililitros de água destilada. Sempre que utilizado a proveta se basear pela linha do menisco para medidas exatas. Logo após, a água destilada medida foi adicionado no béquer com sal e misturada até dissolver todo o conteúdo. Depois deste processo foi acrescentado com a ajuda da pipeta descartável 5 mililitros de detergente no béquer e misturamos vagarosamente para evitar a formação de espuma.
	Com a solução de lise já pronta, ela foi adicionada no gral e misturada com os morangos. Onde ficará em repouso por aproximadamente 30 minutos, porém é importante misturar de 5 em 5 minutos o conteúdo do gral para melhor ação nas células dos morangos. Esta etapa é de incubação, onde irá ocorrer a lise (quebra) celular, ou seja, a parede celular (presente somente em células vegetais) e a membrana plasmática será quebrada através do uso do detergente que promoverá a desestruturação das moléculas das membranas e liberando todo material que estava presente nas células, incluindo proteínas e o DNA, que será dissociado (separado) pelo sal que foi acrescentado, das outras moléculas das células. Passado os 30 minutos, em um funil foi colocado 2 gases abertas para servir como uma barreira para as partículas maiores da solução, coando somente a parte líquida da mistura diretamente em um béquer, foi coletado 20 mililitros da mistura. 
	Com uma pipeta descartável coletamos do béquer a substância filtrada e divivimos em 4 tubos de ensaio o valor de 2 mililitros em cada. Acrescentamos 2 volumes de 2 mililitros de álcool a 100% gelado vagarosamente pela parede do tubo de ensaio, totalizando 4 mililitros de álcool em cada tubo. Utiliza-se o álcool a 100% pois ele será mais potente na preciptação (separação) do DNA. Ele tornará possível a visualização das moléculas que irão se agrupar formando um emaranhado. O DNA é formado por proteínas que não se dissolvem com a utilização do álcool, podendo ser utilizado sem risco.
	Em dois tubos visualizamos rapidamente o emaranhado de DNA, mas nos outros dois tubos restantes, demorou cerca de 5 minutos para precipitação. Manuseamos o emaranhado com o auxílio de um bastão de vidro, ficando cada vez mais nítido e aumentando gradativamente a precipitação do DNA. A partir deste período de repouso no tubo de ensaio, o DNA ali presente será separado de outras soluções através da ação do álcool a 100% e irá começar a ir para parte superior da solução, já que ele é menos denso que a água e a mistura aquosa dos restos celulares, formando um emaranhado de DNA de todas as células que estavam presentes na solução.
Discussão
	Sempre observar se a bancada está limpa ( utilizar água e álcool a 70% antes do uso e após o uso para desinfecção), limpar todo o material utilizado.
	O morango precisa ser macerado para que os produtos químicos utilizados para a extração cheguem mais facilmente em todas as suas células. 
	Os detergentes são normalmente empregados para dissolver gorduras ou lipídios. Como a membrana celular tem em sua composição química uma grande quantidadede lipídios, sob a ação do detergente, estes se tornam solúveis e são extraídos junto com as proteínas que também fazem parte das membranas 
	O sal de cozinha ou NaCl (cloreto de sódio) fornece íons que são necessários para a fase de precipitação do DNA.
	O DNA extraído das células do morango encontra-se na fase aquosa da mistura, ou seja, dissolvido na água. Na presença de álcool e de concentrações relativamente altas de Na+ (fornecidas pelo sal de cozinha) o DNA sai de solução, isto é, ele é precipitado. O precipitado aparece na superfície da solução, isto é, na interface entre a mistura aquosa e o etanol. 
	A molécula de DNA pode ser extremamente longa, mas seu diâmetro é de apenas 2 nanômetros, visível apenas em microscopia eletrônica. Assim sendo, o que se vê após a precipitação é um emaranhado formado por milhares de moléculas de DNA.
	O processo se resume em: 
	Ruptura do tecido
	Lise das células
	Soltura de várias moléculas (inclusive DNA) na solução.
	Separação do DNA de todas as células das outras moléculas ali presente, onde o mesmo poderá ser analisado minuciosamente.
Resultado
	Os resultados obtidos na experiência foram satisfatórios à todos, pois em cada etapa realizada, desde a masseração do morango à extração do DNA, observamos com riqueza de detalhes acontecer o que era realmente esperado. Vimos a destruição da parede celulósica que envolve a célula vegetal, a atuação do detergente rompendo a membrana citoplasmática e a liberação do DNA no suco, que após cuado e adicionado o álcool absoluto foi visto a preciptação e separação da molécula de DNA, uma amostra viscosa, consistente e esbranquicida, separando-se totalmente na superfície da solução do suco e álcool absoluto.
Conclusão
	Com este experimento podemos concluir que todos os organismos vivos apresentam DNA e que podem ser extraídos de forma simples e sem complexidades. Podendo ser visto o emaranhado a olho nu, comprovando assim váriaos dados científicos que existem em relação ao DNA . Também podemos observar a importância que o DNA tem para a vida de todos os seres vivos existentes, expandindo cada vez mais nosso conhecimento teorico e prático sobre o tema, que tem vital importância para nossa graduação. Nos sentimos extremamente agradecidos por está experiência fantástica que tivemos no laboratório.
Referências Bibliográficas
* Paiva, Gustavo Pulze, Extração de DNA do Morango, Pontociência, São Paulo. 2011 http://www.pontociencia.org.br/experimentos/visualizar/extracao-do-dna-do-morango/360 acessado em 15/08/2018.
* Autor Desconhecido, Extração de DNA - Aplicação, http://www.kasvi.com.br/a-extracao-de-dna/, acessado em 14/08/2018.
* GRIFFITHS, A. J. F.; WESSLER, S. R.; LEWONTIN, R. C.; GELBART, W. M; SUZUKI, D. T.; MILLER, J. H. Introdução à Genética. 8ª. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2006.
Sumário
1- INTRODUÇÃO...................................................................................................... 01
2- EXTRAÇAO DE DNA........................................................................................... 02
3- OBJETIVOS DO EXPÊRIMENTO....................................................................... 03
4- MATERIAIS UTILIZADOS.................................................................................. 03
5- METODOLOGIA................................................................................................... 04
6- DISCUSSÃO.......................................................................................................... 05
7- RESULTADO......................................................................................................... 06
8- CONCLUSÃO........................................................................................................ 06
9- REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS................................................................... 07