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17/07/2017 1 Ciências Moleculares e Celulares Aula Prática 2 Efeito Tampão Profa. Dra. Priscila Cassolla Reconhecer o emprego dos principais materiais de laboratório. Executar corretamente a técnica de pipetagem. Determinar pH com uso de indicador. Demonstrar o efeito do tampão biológico. Objetivos de aprendizagem Procedimento 1: Utensílios e equipamento de laboratório. � Identificação das vidrarias e utensílios para conter ou medir volumes e os principais auxiliares. Instruções de procedimentos Procedimento 2: Técnicas de pipetagem. � Uso de pipetadores em pipetas graduadas e volumétricas (manuseio, cuidados gerais e atenção ao menisco). � Uso de pipetas automáticas: micropipetadores e ponteiras (manuseio, cuidados gerais e atenção aos pontos do botão de pipetagem). Instruções de procedimentos Procedimento 3: Escala de pH e Efeito tampão. � Preparo da escala padrão de pH com Indicador Universal (mistura de indicadores) de 3 a 10. � Analisar efeito do tampão fosfato (pH 7) na adição de base (e posterior adição de CO2) e na adição de ácido. Instruções de procedimentos 17/07/2017 2 Procedimento 1: Utensílios e equipamentos de laboratório. � Identificação das vidrarias e utensílios para conter volumes. � Identificação das vidrarias e utensílios para medir volumes. � Identificação das principais vidrarias e utensílios auxiliares. � Apresentação de equipamentos de laboratório (função) e de segurança. Desenvolvimento da prática Vidrarias e Equipamentos de Laboratório AULA PRÁTICA 2 VÍDEO 1 Procedimento 2: Técnicas de pipetagem. � Uso de pipetadores (Pêra e Pipump) em pipetas graduadas e volumétricas: manuseio, cuidados gerais e atenção ao menisco. � Uso de pipetas automáticas (micropipetadores ou micropipeta e ponteiras): manuseio, cuidados gerais e atenção aos pontos do botão de pipetagem. Desenvolvimento da prática Técnicas de Pipetagem AULA PRÁTICA 2 VÍDEO 2 Procedimento 3: Escala de pH e Efeito tampão. � Preparo da escala padrão de pH com Indicador Universal (mistura de indicadores): soluções tampão com pH de 3 a 10. � Analisar efeito do tampão fosfato (pH 7) na adição de base (NaOH 0,1 N) e posterior acidificação por dissolução de CO2 (expiração de ar). � Analisar efeito do tampão fosfato (pH 7) na adição de ácido (HCl 0,1 N) e capacidade tamponante. Desenvolvimento da prática ESCALA DE ph E EFEITO TAMPÃO AULA PRÁTICA 2 VÍDEO 3 17/07/2017 3 Procedimento 1 – Utensílios e equipamentos de laboratório. Resolução Comentada Precisão da vidraria define a função: conter ou medir Conter: larga Medir: marca estreita Material auxiliar: manipulações específicas Equipamentos: processos específicos Procedimento 2 – Técnicas de pipetagem: Pipetas de vidro. Resolução Comentada Procedimento 2 – Técnicas de pipetagem: Pipetas de vidro. Resolução Comentada Procedimento 2 – Técnicas de pipetagem: micropipeta. Resolução Comentada Procedimento 3 – Escala de pH e Efeito tampão. Resolução Comentada Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Água Água Tampão Tampão NaOH NaOH HCl HCl CO2 CO2 HCl ≅10 gotas Procedimento 3 – Escala de pH e Efeito tampão. Resolução Comentada Tubo 2 Tubo 4 Tampão Tampão NaOH HClCO2 HCl ≅10 gotas 17/07/2017 4 CAPA INTRODUÇÃO MATERIAL E MÉTODOS RESULTADOS (Valores de pH em cada etapa da adição de base e de ácido) DISCUSSÃO (Explicar as mudanças ou inalterações dos valores de pH) CONCLUSÃO REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS Relatório da Aula Prática Aluno acompanhou com atenção a identificação e compreendeu as funções dos utensílios e equipamentos de laboratório. Aluno manuseou o pipetador (Pêra ou Pipump) e micropipeta corretamente. Aluno executou pipetagem tomando todos os cuidados, identificou o menisco nas pipetas de vidro e os dois pontos do micropipetador. CHECKLIST – TUTOR – Parte 1 Aluno colocou em prática a técnica de pipetagem ao preparar a escala de pH e as amostras para estudar o efeito tampão. Aluno executou adição de base, expiração de ar e adição de ácido corretamente, com cuidado, e de modo organizado. A prática de Escala de pH e Efeito tampão foi realizada dentro da capela com exaustor de ar ligado. CHECKLIST – TUTOR – Parte 2
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