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Atividade de água e estabilidade dos alimentos Aula 3 – Microbiologia de Alimentos Prof.ª Clelia Picinin Atividade de água e estabilidade dos alimentos • Atividade de água (Aw ou Aa): - Conceito e importância - Transformações em alimentos - Alterações microbianas - Crescimento microbiano e Aw • Levantamento e aplicação de isotermas; Atividade de água • Conceito e importância A atividade e água (Aw) , ao contrário do conteúdo de umidade de um alimento, é que indica a disponibilidade de água para ocorrência de reações deteriorantes, como: escurecimento, oxidação, hidrólise, crescimento de microrganismos, etc. Apenas o conhecimento do teor de umidade não é suficiente para predizer a estabilidade de um alimento. Atividade de água • Conceito e importância A disponibilidade da água para a atividade microbiológica, enzimática ou química é que determina a vida de prateleira de um alimento, e isso é medido pela Aw ou Aa. A Aw de uma forma quantitativa é representada como sendo proporcional à umidade relativa do ar em equilíbrio com o produto. Atividade de água • Conceito e importância A Aw é definida como “a razão da pressão de vapor da água no alimento e a pressão de vapor saturada da água na mesma temperatura” Aw = P Po Onde: P = pressão de vapor do alimento Po = pressão de vapor da água Atividade de água Quando todos os pontos estão (estatisticamente) ocupados por água absorvida, o teor de umidade é chamado de valor de monocamada de BET (Brunauer-Emmett-Teller) (Fennema, 1996), esse valor representa o teor de umidade no qual o alimento está mais estável. Aw / m(1- Aw) = 1/m1C + (C -1 / m1C ).Aw Onde: Aw = atividade de água m = teor de umidade m1 = valor da monocamada de água C = constante Atividade de água • Conceito e importância Em teores de umidade abaixo do valor da monocamada de BET, existe uma maior taxa de oxidação de gorduras. E em teores mais altos, ocorre o escurecimento por Maillard e atividades enzimáticas e microbiológicas são estimuladas. Atividade de água Atividade de água • Classificação dos alimentos em função da Aw Uma boa parte dos alimentos tradicionais, preservados pela redução da Aw, são desidratados, e encontram-se em uma faixa de Aw baixa. Em alguns casos a desidratação até baixos níveis, induz mudanças drásticas irreversíveis nos constituintes e estruturas do material, o que resulta em um alimento cujas características físicas e sensoriais não são aceitáveis pelo consumidor. Atividade de água • Classificação dos alimentos em função da Aw Outros exemplos de operações unitárias, menos drásticas, que reduzem a disponibilidade de água em alimentos são: evaporação, liofilização ou concentração por congelamento e aqueles que imobilizam a água no alimento pelo uso de umectantes em alimentos de umidade intermediária. Atividade de água • Classificação dos alimentos em função da Aw Os processos mais brandos produzem alimentos com Aw mais elevada e implicam na combinação de outros fatores para a preservação do alimento e contenção do desenvolvimento microbiológico. Esta classe de produtos é conhecida como alimentos de umidade intermediária, onde a atividade de água é um dos fatores que influem (combinada com outros como pH, conservantes, frio, etc.) na sua preservação. Atividade de água • Classificação dos alimentos em função da Aw Alimentos com Aw < 0,85 e até 0,60 Refere-se a alimentos como melaço, geléias, farinha, mel, frutas secas, caramelo, suco cítrico concentrado, goiabada, coco ralado, pescado salgado e outros. Não há crescimento de bactérias patogênicas, alguns bolores micotoxigênicos são xerófilos (capazes de crescer em Aw<0,85), embora não haja menções da produção de micotoxinas em Aw<0,80. Atividade de água • Classificação dos alimentos em função da Aw Alimentos com Aw<0,60 Estes são microbiologicamente estáveis, sem possibilidade de crescimento microbiano, a não ser que sejam hidratados devido ao armazenamento inadequado. A sobrevivência de células vegetativas de bactérias e de bolores e leveduras é variável, podendo estender-se de dias a meses, mas os esporos bacterianos podem permanecer viáveis durante anos. Aw e transformações em alimentos • Crescimento microbiano; • Atividade enzimática. • Conservação de alimentos por redução da Aw Crescimento microbiano • Cada microrganismo tem Aw máxima, ótima e mínima • Bactérias + exigentes, seguidas dos bolores e leveduras • Aw <0,60: cessa atividade microbiana, mas não implica em destruição dos mesmos Classificação dos Microrganismos quanto à Aw Halófilos: Necessitam de Aw reduzida para o crescimento e presença de sal. Extremos: 13 -15% NaCl. Xerófilos: Preferem ambientes secos, falta de água. Osmófilos: Preferem pressões osmóticas elevadas (< 0,65). Altas concentrações de açúcar. Halotolerantes: Toleram redução da Aa, mas preferem a ausência do soluto. Valores mínimos de Aa que permitem a multiplicação de MO que alteram alimentos Grupos de microrganismos Valores mínimos de Aa Maioria das bactérias 0,91 Maioria das leveduras 0,88 Maioria dos bolores 0,80 Bactérias halofílicas 0,75 Fungos xerofílicos 0,65 Leveduras osmofílicas 0,60 Multiplicação de microrganismos em função da Aa Crescimento microbiano • Bactérias deterioradoras: faixa Aw 0,90-0,98 - Gram negativas: Pseudomonas spp: 0,96; Enterobacteriaceae: 0,93. - Gram positivas: - não esporogênicas: maior tolerância: Lactobacillaceae mínimo Aw=0,94; Micrococaceae crescem até Aw abaixo de 0,90. - bactérias esporogênicas: Bacillus spp, Aw de 0,94 a 0,89; limite mínimo mais frequente 0,90 - 0,91. Crescimento microbiano • Bactérias patogênicas: faixa Aw 0,92-0,97 • Staphylococcus aureus: - Crescimento: 0,86; - Produção de toxina: 0,93 • Clostridium botulinum tipo E: 0,97 • Salmonella spp, Yersinia enterocolítica: 0,95 Crescimento microbiano Crescimento microbiano • Bolores: 0,77-0,93 • Leveduras : 0,62-0,90 • Bactérias halofílicas: 0,75 • Leveduras osmofílicas: 0,60 • Fungos xerofílicos: 0,60-0,65 Crescimento microbiano 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 Atividade de água Valores de atividade de água para alguns alimentos Aa Tipos de alimentos >0,98 carnes e pescados frescos, leite, frutas e hortaliças; 0,93 a <0,98 leite evaporado, concentrados de tomate, carnes e pescados curados, sucos de frutas, queijos, pão e embutidos; 0,85 a <0,93 leite condensado, salame, queijos duros, marmeladas; 0,60 a <0,85 geleias, farinhas, frutas secas, pescado salgado; <0,60 doces, chocolate, mel, batatas fritas, ovos e leite em pó. Atividade de água de alguns alimentos Efeito de baixa atividade de água no crescimento dos microrganismos • Perda de água para o ambiente • Aumento da fase LAG • Diminuição da taxa de crescimento (aumento do tempo de geração) e contagem final dos microrganismos • Afeta a produção de substâncias como a enterotoxina B de S. aureus sem afetar tanto o crescimento dele. Relação entre atividade de água (Aw) e a deterioração de alimentos Conteúdo de água x Aw x estrutura da água e estabilidade dos alimentos - conteúdo de água não é suficiente para predizer a estabilidade do alimentos; - Estrutura da água: 1 – interações hidrofóbicas 2 – interações hidrofílicas (Mohamed M., 2001) Conteúdo de água x Aw x estrutura da água e estabilidade dos alimentos • Estrutura da água: 1 – interações hidrofóbicas -ocorre devido a grupos apolares: metil; -hidrofobicidade de algumas proteínas podem originar estabilidade das emulsões. 2 – interações hidrofílicas - íons: imobilizam várias camadas de hidratação. Conteúdo de água x Aw x estrutura da água e estabilidade dos alimentos Conclusões • Conhecer a natureza e concentração de diferentes componentes e a estrutura da água são importantes para entender porque alguns alimentos são estáveis e outros não a mesma Aw. • A mobilidade da água e sua disponibilidade para reações bioquímicas depende do tipo de interação com solutos. Aw e transformações em alimentos • Atividade enzimáticas - Baixa atividade a baixa Aw: baixa mobilidade (difusão de enzimas e substratos) 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 Atividade de água Redução da atividade de água no alimento sal • adição de soluto açúcar glicerol • remoção da água congelamento desidratação Exemplos de alimentos conservados por redução na Aw Levantamento e aplicação de isotermas As isotermas são a representação gráfica da umidade relativa de equilíbrio ou da pressão parcial de vapor de um produto em função de seu teor de umidade a uma determinada temperatura. Elas podem ser de adsorção ou de desorção, segundo a determinação da umidade do produto tenha sido feita ao longo de um processo de umedecimento ou secagem. Levantamento e aplicação de isotermas É muito comum haver diferenças entre as isotermas de adsorção e de desorção para um mesmo produto e em condições idênticas de determinação, sendo este fenômeno conhecido como histerese. Figura 1. Histerese em processo de sorção de umidade em produtos biológicos Levantamento e aplicação de isotermas Vale destacar que o teor de umidade do produto que apresenta histerese é sempre menor no equilíbrio por adsorção do que na desorção. Figura 2. Isoterma de adsorção e desorção de umidade de banana desidratada em cilindro rotativo. Levantamento e aplicação de isotermas Existe uma série de produtos em que o levantamento de suas isotermas torna-se uma tarefa muito difícil, devido à possibilidade de ao longo das determinações o produto, ou seus componentes, sofrerem mudanças de fase. Essas mudanças de fase dependem da presença de água e são muito comuns em substâncias mais puras, como por exemplo, os açucares e sais. Levantamento e aplicação de isotermas A Figura ilustra esse tipo de fenômeno no levantamento da isoterma de sacarose. Pode-se verificar que a sacarose cristalina adsorve muito pouca umidade até atingir uma atividade de água próxima de 0,8, quando então se inicia o processo de dissolução. A sacarose amorfa apresenta uma isoterma completamente diferente da cristalina, pois reterá muito mais umidade. Isto se deve à maior área interna disponível para adsorção de umidade na sacarose amorfa, como também à maior facilidade da água penetrar na estrutura de pontes de hidrogênio. Levantamento e aplicação de isotermas As isotermas de adsorção de umidade em alimentos tem inúmeras aplicações. Por exemplo, na concentração e desidratação de alimentos elas são importantes para o desenho do processo e dos equipamentos, uma vez que a maior ou menor facilidade de remoção de água do produto depende de sua pressão parcial de vapor e da energia de ligação da água no produto. Levantamento e aplicação de isotermas Na Figura 4 apresenta-se esquematicamente a dependência do calor total de adsorção em relação a atividade de água, podendo-se verificar que abaixo do nível 0,4 de atividade de água, os valores se elevam até atingir um máximo aproximadamente a 0,10 – 0,15 de atividade de água, valores estes que correspondem à monocamada de água ligada em locais específicos do alimento. Este fato explica a necessidade de um maior dispêndio de energia ao final dos processos de secagem. Figura 4. Calor total de adsorção em função da atividade de água de materiais biológicos. Levantamento e aplicação de isotermas A aplicação de isotermas pode ser útil também em misturas de diferentes materiais para preparação de um produto final, como, por exemplo, balas recheadas, misturas de frutas desidratadas, sopas desidratadas e outras. A isoterma de cada um dos componentes individuais da mistura permite prever o que ocorrerá após algum tempo da mistura, no que tange à migração de umidade de um componente para outro. Levantamento e aplicação de isotermas Como por exemplo, na preparação de sopas desidratadas é possível prever a condição final da atividade de água do produto após equilíbrio, de uma forma aproximada, pela utilização das isotermas de cada componente. Este método procura utilizar as partes lineares das isotermas dos componentes. Figura 5. Representação gráfica de isotermas utilizada no cálculo de atividade de água de misturas. Levantamento e aplicação de isotermas Conforme esquematizado na Figura 5, calcula-se a atividade de água da mistura pelo uso da seguinte equação: Aw= aw1S1W1 + aw2S2W2 + ..........awnSnWn S1W1 + S2W2 + ..........+SnWn Onde: aw1….awn = atividade de água dos componentes S1......Sn = inclinação das retas das isotermas dos componentes W1....Wn = peso de sólidos dos componentes Shelf life e controle da umidade Efeitos da umidade na estabilidade do alimento. SABADINI et ali estudou as alterações da Aw e da cor da carne no processo de elaboração da carne salgada desidratada nos processos da salga seca e úmida nas temperaturas de 20oC e 10oC. Tanto a Aw como a diferença de cor da carne processada pode ser correlacionada com o teor de sal e são úteis no controle de qualidade do produto. Pelos resultados obtidos, sugere-se que no processamento industrial, a atividade de água venha a ser utilizada como parâmetro de definição dos produtos “jerked-beef’ e charque. Considerações finais • Importante conhecer Aw e estrutura da água = mobilidade reagentes = estabilidade do alimento • O conhecimento da Aw crítica, ou aquela em que as reações de degradação são mínimas é de grande utilidade em termos de conservação de alimentos, na orientação dos processos de desidratação e na predição de embalagens.