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29/08/2018 1 Micologia Fungos filamentosos e Leveduras Eliane Brolazo 2S-2018 MICROBIOLOGIA Fungos Até 1969, os fungos eram considerados vegetais. Atualmente constituem o reino Fungi, pois apresentam um conjunto de características próprias que permitem sua diferenciação das plantas: ✓ não sintetizam clorofila ✓ não tem celulose na parede celular. São eucariotos e heterotróficos, obtendo nutrientes e energia a partir da matéria orgânica: ✓ inanimada (saprófitas) ✓ proveniente de seres vivos (parasitas). Fungos Fungos Podem ser pluricelulares ou unicelulares dependendo da espécie e/ou condições de crescimento. Fungos Mofos/bolores: deterioração alimentos e outros materiais Fungos do ambiente natural: importância na degradação matéria orgânica (saprófitas)/fertilidade solo. Fungos Mofos/bolores: deterioração alimentos e outros materiais Fungos do ambiente natural: importância na degradação matéria orgânica (saprófitas)/fertilidade solo. Cogumelos: fungos comestíveis, boa fonte proteica. Fungos patogênicos: infecções superficiais (pele e mucosas) e sistêmicas Fungos envolvidos na fermentação: produção alimentos, bebidas, álcool e medicamentos (hormônios/antibióticos) 29/08/2018 2 Fungos Habitat: Os fungos têm grande poder de adaptação às variações ambientais, espécies capazes de crescer em diversas condições: ✓ Altas concentrações de açúcar ✓ Baixa atividade de água ✓ pHs de 2,0 a 9,0 ✓ ampla faixa de temperatura (0ºC a 60ºC). Amplamente disseminados na natureza Fungos Morfologia Os fungos dividem-se em 2 grandes grupos: 1-Fungos filamentosos: também conhecidos como bolores. 2- Leveduras: unicelulares Fungos 1-Fungos filamentosos: também conhecidos como bolores. Pluricelulares constituídos por corpos de frutificação, a parte visível e o micélio que são vários filamentos, em que cada um é denominado de hifa. Fungos HIFAS (conjunto de células), que agrupadas formam o corpo vegetativo ou MICÉLIO e a porção reprodutiva (corpo de frutificação), onde se formam os ESPOROS. Fungos As hifas podem ser cenocíticas, possuem um citoplasma plurinucleado. Alguns fungos mais complexos apresentam hifas septadas (divididas), onde cada septo pode ter um (monocariótica) ou dois núcleos (dicariótica). Alguns fungos têm parede rica em quitina (N-acetil glicosamina), outros possuem complexos polissacarídios e proteínas. Fungos Hifas cenocíticas, com citoplasma plurinucleado. hifas septadas monocariótica ou dicariótica 29/08/2018 3 Fungos Reprodução assexuada e/ou sexuadamente. A reprodução assexuada pode ser: (i) brotamento (unicelulares) (ii) fragmentação do micélio, onde um micélio se fragmenta originando muitos outros (iii) esporulação, acima dos corpos de frutificação estão os esporângios que produzem os esporos, estruturas imóveis e resistentes a ambientes desfavoráveis. Fungos Na reprodução sexuada ocorre fusão de duas hifas haploides. Quando não ocorre fusão, originam-se hifas geneticamente distintas denominadas dicários. Fungos 1- Zigomicetos: vida livre, parasitas de plantas e animais ou simbiontes. Vida livre - no solo ou sobre restos de matéria orgânica, e em associações simbióticas com raízes de plantas, formam endomicorrizas. Apresenta forma levedura ou hifas asseptadas que formam estolões que ao tocar o substrato, formam rizóides para sua fixação Fungos Zigomicetos: Podem causar infecções graves em humanos e animais Importante decompositor de alimentos, podendo contaminar frutas e vegetais estocados. Ex.Rhizopus stolonifer conhecido como bolor negro por formar massas cotonosas nas superfícies úmidas de alimentos ricos em carboidratos. Os representantes da ordem Entomophthorales são parasitas de insetos e estão sendo utilizados no controle biológico desses animais. Fungos Ascomicetos – formam o asco, estrutura produtora de esporos. O principal modo de reprodução assexuado. Brotamento nos unicelulares e esporulação nos pluricelulares, que na extremidade das hifas formam-se os conidióforos, estruturas que formam esporos denominados conídios. Nesse grupo, encontram-se os fungos que produzem a penicilina, alguns desses associam-se às algas formando os líquens. Fungos Líquens: associação entre fungos e algas Fungos secretam ácidos que dissolvem minerais das rochas e solos, disponibilizando-os para as algas. Algas sintetizam compostos orgânicos (carboidratos) utilizados pelos fungos. Estabeleceu-se, assim, uma parceria, e os fungos encerraram as algas nos seus tecidos. 29/08/2018 4 Fungos Líquens: Como adaptação em habitats extremos, os líquens produzem mais de 500 compostos químicos, que tem funções como: ✓ controlar a exposição à luz, repelir herbívoros ✓ eliminar outros microrganismos ✓ Inibir crescimento vegetal (competição com plantas por espaço e luz) Pigmentos utilizados desde a antiguidade, na indústria têxtil, substâncias com propriedades antibióticas, utilizadas na produção de fármacos Fungos Os líquens funcionam como esponjas , tomando quase tudo o que vem ao seu encontro, incluindo a poluição atmosférica. Utilizados como bio-indicadores. Apresentam diferenças de coloração e manchas escuras quando em ambientes poluídos Ocorre acumulação de poluentes e morte celular, degradação da clorofila e redução fotossíntese A variedade e presença ou ausência de espécies mais sensíveis também são indicativas da qualidade do ar http://www.ugr.es/~mcasares/Utilidades/liquenes.htm Fungos Basidiomicetos – cogumelos e orelhas-de-pau, alguns são comestíveis, entretanto outros contêm substâncias alucinógenas. Alguns atacam vegetais causando a doença denominada ferrugem. Embora possam se reproduzir assexuadamente, a reprodução sexuada é a mais frequente, onde duas hifas diploides fundem-se e formam hifas dicarióticas que crescem e formam o corpo de frutificação (chapéu), chamado basidiocarpo. Fungos Deuteromicetos – tb chamados imperfeitos, pois reprodução sexuada não é conhecida Reprodução por conídios (semelhante aos ascomicetos). Provavelmente muitos são ascomicetos que ou perderam a fase ascógena (sexual) ou não encontramos a fase ascógena. Apresentam parassexualidade, intercâmbio genético sem reprodução sexual. Fungos Deuteromicetos – Grupo artificial, pois as características da reprodução sexuada não são conhecidas ou não podem ser utilizadas para classificação. Grande importância econômica: ✓ Doenças às plantas como as antracnoses ✓ Em humanos causam dermatoses (tinhas, pé-de-atleta) ✓ Espécies produtoras de micotoxinas que crescem em alimentos estocados. Fungos Importância Econômica ✓ na indústria alimentícia (ex. Penicillium roqueforti) ✓ indústria têxtil e controle biológico de outros fungos Ex. Trichoderma (solos) produz enzimas que degradam celulose, utilizadas para produzir jeans o aspecto lavado (stone-washed). As mesmas enzimas são adicionadas na remoção da sujeira e também na agricultura para controle biológico de outros fungos que atacam culturas e árvores florestais. ✓ Indústria farmacêutica Ex. Penicillium notatum (penicilina) 29/08/2018 5 Leveduras Não são um grupo dentro do Reino Fungi, mas sim uma forma de crescimento unicelular que ocorre principalmente em ascomicetos, seguidos pelos basidiomicetos e zigomicetos. São economicamente importantes: Produção de bebidas, etanol, panificação Algumas leveduras podem ser patogênicas para humanos, Responsáveis por infecções como candidíase (sapinho) e Criptococose (pulmonar) Leveduras Fungos que permanecem na forma unicelular. Crescem mais rapidamentedo que filamentosos Tem parede celular rígida e na coloração de Gram são vistos como G+ (não são classificados pelo Gram) São amplamente distribuídos na natureza (grande número de espécies saprófitas e algumas parasitas/patogênicas). Reprodução assexuada por gemulação (maioria) ou por fissão binária (semelhante às bactérias). Leveduras Fungos Cultivo: semelhante ao das bactérias heterotróficas (nutrientes em meio sólido, pH mais ácido p/ tornar meio seletivo). Crescimento mais lento, principalmente dos fungos filamentosos (pluricelulares), que podem levar 5 a 7 dias para crescer no meio de cultura Fungos Patogênicos Podem ser Filamentosos e/ou leveduriformes Alguns fungos patogênicos são dimórficos, ou seja, crescem no ambiente na forma filamentosa (vida livre) e quando esporos deste tipo de fungo conseguem penetrar no organismo hospedeiro crescem na forma de levedura Forma filamentosa- temperatura ambiente Forma levedura – temperatura do hospedeiro 37ºC Ex: Criptococcus neoformans Paracoccidioides brasiliensis Fungos – identificação espécies Fungos filamentosos: Baseada na morfologia do micélio vegetativo e corpo de frutificação (bolores). Além dos aspectos macroscópicos da colônia crescida em placa de cultura contendo meios específicos para fungos, para observação dos aspectos microscópicos é necessário o cultivo em lâmina de microscopia para observação de estruturas – microcultivo a identificação das espécies é mais complicada (micologistas treinados) 29/08/2018 6 Microcultivo Fungos Semear o fungo em um pequeno bloco de ágar colocado sobre lâmina em uma câmara de cultivo (placa de petri forrada com papel úmido e ambiente estéril) Cultivar por 7 dias, corar e montar lâmina p/ observação. Permite observar estruturas intactas. Fungos – identificação espécies Leveduras - CLASSIFICAÇÃO TAXONÔMICA É baseada no metabolismo de açúcares (denominada zimologia ou zimograma) e aspectos morfológicos das células (microcultivo, à fresco e coradas) Exame direto - Leveduras Identificação Laboratorial Produção de cogumelos comestíveis https://www.youtube.com/watch?v=4WNWxRt7G64 https://www.facebook.com/BrainspaceMagazine/videos/130549 9616178434/ 29/08/2018 7 Aula prática Fungos 1-Escolher uma área para coleta. Ex: sala de aula, corredor, estacionamento, laboratório, banheiro, etc... Deixar a placa de Petri contendo meio PDA (para crescimento de fungos) aberta no local por 10 min Fechar a placa, identificar a placa (nome grupo e data) e levar ao laboratório para incubação (temperatura ambiente – 7 dias.
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