Crescimento Microbiano

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Crescimento Microbiano 
Francine Padilha – LBMAT 8824-2575 
Bruno Humia – LBMAT 9191-0680 
 
Sumário 
• Condições de Crescimento 
 
• Tipos de Meios de Cultura 
 
• Crescimento Bacteriano 
 
• Técnicas de Semeadura 
 
• Controle de Crescimento 
Crescimento Microbiano 
• Número; 
 
 Colônias ou populações. 
 
• Tamanho celular; 
 
 Não considerado. 
 
• Fatores de Crescimento. 
 
 Fatores Físicos; 
 
 Fatores Químicos. 
 
Fatores Físicos 
• Temperatura; 
 
 Termófilos; 
 
 Mesófilos; 
 
 Psicrófilos. 
 
• pH; 
 
 Acidófilas. 
 
• Pressão Osmótica. 
 
 Halofílicas extremas; 
 
 Halofílicas obrigatórias; 
 
 Halofílicas Facultativas. 
 
Escala pH 
Fatores Físicos - Temperatura 
• Curva de Crescimento Característica. 
Shewanella Vibrio cholerae Thermus aquaticus 
Fatores Físicos - Temperatura 
• Faixas de Crescimento; 
 
 Temperatura mínima; 
 
 Temperatura ótima; 
 
 Temperatura máxima. 
 
• Organismos Psicotróficos; 
 
 Faixa 0°C – 30°C; 
 
 Crescimento Ótimo 20 – 30°C; 
 
 Degradação de Alimentos; 
 
 Micélio → Fungos. 
 
• Bactérias Patogênicas 
Fatores Físicos - Temperatura 
• Faixas de Temperaturas. 
Fatores Físicos - pH 
• Faixas de Crescimento; 
 
• Conservação de Alimentos; 
 
 Repolho azedo, picles, queijo; 
 
 Ácidos → Fermentação. 
 
• Meios de Cultura 
 
 Tampões; 
 Peptona e Aminoácidos; 
 
 Sais de fosfato. 
 
• Bactérias Acidófilas. 
 
 Tolerância a acidez; 
Fatores Físicos – Pressão Osmótica 
• Célula → 80 – 90% água; 
 
• Meio Hipotônico; 
 
 Parede celular; 
 
 Ausência de rompimento. 
 
• Meio Hipertônico 
 
 Plasmólise; 
 
 Inibição do Crescimento; 
 
 Bacalhau, mel, leite condensado. 
Fatores Físicos – Pressão Osmótica 
• Condições de Crescimento; 
Fatores Químicos 
• Água; 
 
• Fonte de Nutrientes; 
 
 Carbono; 
 
 Nitrogênio; 
 
 Enxofre; 
 
 Fósforo; 
 
• Oxigênio; 
 
 Aeróbios 
 
 Anaeróbios 
 
• Fatores de Crescimento. 
 
Meio de cultura tradicionais 
Fatores Químicos - Nutrientes 
• Fonte de Carbono; 
 
 
 Químio-heterotróficos; 
 
 Quimioautotróficos. 
 
• Nitrogênio; 
 
 Síntese de Proteínas; 
 
 Síntese de DNA e RNA; 
 
 Síntese de ATP. 
 
• Fonte de Nitrogênio; 
 
 Grupo amino. 
 
 Íons amônia (NH4
+), Nitratos; 
 
 Fixação atmosférica. 
 
Proteínas Carboidratos 
CO2 
Rhizobium 
Fatores Químicos - Nutrientes 
• Enxofre; 
 
 
 Síntese de aminoácidos e vitaminas; 
 
 Tiamina e Biotina. 
 
• Fonte de Enxofre; 
 
 Íons sulfato. 
 
• Fósforo; 
 
 Síntese de DNA, RNA e ATP; 
 
 Síntese de fosfolipídeos. 
 
• Fonte de Fósforo. 
 
 Íon fosfato. 
 
SO4
2- 
PO4
3- 
Fatores Químicos - Oxigenação 
• Aeróbicos Estritos; 
 
 
 Maior produção de energia; 
 
 Oxigênio → dissolução ineficaz em água; 
 
• Anaeróbicos Facultativos; 
 
 Aeróbicos capazes de crescer sem O2; 
 
 Respiração anaeróbia ou fermentação; 
 
 Bactérias do TGI – E. coli. 
 
• Anaeróbicos Obrigatórios; 
 
 Não utilizam o oxigênio molecular; 
 
 Gás diretamente tóxico; 
 
 Gênero Clostridium. 
 
Fatores Químicos – Toxicidade do Oxigênio 
• O2 Molecular; 
 
 
 Células fagocitárias; 
 
 Extremamente reativo. 
 
• Radicais Livres; 
 
 Formados durante a respiração; 
 
 Superóxido dismutase (SOD); 
 
O2
- + O2
- + 2H+ → H2O2 + O2 
 
• Peróxido de Hidrogênio; 
 
 Ânion peróxido O2
-2; 
 
 Catalase X Peroxidase; 
 
 2H2O2 → H2O + O2 
 
Fatores Químicos - Oxigenação 
• Anaeróbicos Aerotolerantes; 
 
 
 Toleram a presença do oxigênio; 
 
 Não utiliza O2 para seu crescimento; 
 
 Fermentação → Carboidrato – Ácido Lático; 
 
 Lactobacilo – SOD. 
 
• Microaerófilos; 
 
 Organismos aeróbicos; 
 
 Baixas concentrações de oxigênio; 
 
 Sensibilidade a radicais superóxidos. 
 
Fatores Químicos - Oxigenação 
• Resumindo. 
Fatores Químicos – Fatores de Crescimento 
• Incapacidade de Síntese; 
 
 
 Adicionados ao meio de cultura; 
 
 Vitaminas - Coenzimas; 
 
 Aminoácidos, purinas, pirimidinas; 
Meio Mueller-Hinton 
Meio de Cultura 
• Nutrientes; 
 
 
 Promover o crescimento de microorganismos; 
 
 Água suficiente; 
 
 pH ajustado; 
 
 Quantidade suficiente de oxigênio; 
 
 Meio estéril; 
 
 Incubação em temperatura adequada. 
 
• Agente solidificante; 
 
 Ágar – polissacarídeo complexo; 
 
 Obtido a partir de algas marinhas; 
 
 Agente espessante – geleia e sorvete. 
 
Meio de Cultura 
• Ágar; 
 
 
 Degradação nula por microorganismos; 
 
 Banho maria a 50°C; 
 
 Não causa dano quando adicionado ao inóculo; 
 
 Pode ser incubado até 100°C; 
 
• Tubos de ensaio; 
 
 Posição inclinada – ágar inclinado; 
 
 Posição vertical – ágar em coluna; 
 
• Placas de Petri. 
 
 Menor chance de contaminação. 
 
Meio de Cultura - Tipos 
• Meio Definido Quimicamente; 
 
 
Composição conhecida; 
 
 Fontes de nutrientes específicas; 
 
 Organismos “Fastidiosos” - Lactobacillus → Teste microbiológico. 
Meio Definido Quimicamente para crescimento de E. coli 
Componentes Quantidade 
Glicose 5,0g 
Fosfato monobásico de amônia 1,0g 
Cloreto de sódio 5,0g 
Sulfato de Magnésio 0,2g 
Fosfato dibásico de potássio 1,0g 
Água 1 L 
Meio de Cultura - Tipos 
• Meio Complexo; 
 
 
Bactérias e fungos heterotróficos; 
 
 Extrato de levedura, carne ou planta - Vitaminas; 
 
 Componente proteico – fonte de C, N e S – Peptona. 
• Meio Complexo - Líquido; 
 
 
 Caldo nutriente; 
 
 
• Meio Complexo - Sólido; 
 
 
 Ágar nutriente; 
 
 
Meio para crescimento Bactérias Heterotóficas 
Componentes Quantidade 
Peptona 5,0g 
Extrato de carne 3,0g 
Cloreto de sódio 8,0g 
Ágar 15,0g 
Água 1 L 
Meio de Cultura - Tipos 
• Meio de Cultivo Seletivo; 
 
 
 Utilização em testes diagnósticos; 
 
 Bactérias de interesse; 
 
 Impede crescimento inespecífico; 
 
• Ágar sulfeto de bismuto; 
 
 Salmonella typhi; 
 
 Inibe o crescimento de Gram positivas; 
 
• Meio Löwenstein Jensen; 
 
 Base de ovos integrais; 
 
 Crescimento de Mycobacterium tuberculosis; 
 
 Satisfatório ao teste da Niacina 
Meio de Cultura - Tipos 
• Ágar Sabouraud dextrose; 
 
 
 Crescimento de fungos; 
 
 Baixo pH – inibe crescimento bacteriano; 
 
 
• Ágar verde brilhante; 
 
 Inibe o crescimento de Gram positivas; 
 
 Isolamento seletivo de Salmonella sp. 
 
 
• Meio Semi-Seletivo YM; 
 
 
 Isolamento de Xanthomonas campestris; 
 
 Extrato de leveduras (Yeast) e Malte; 
Meio de Cultura - Tipos 
• Meio de Cultivo Diferenciais; 
 
 
 Fácil identificação da colônia de interesse; 
 
 Crescimento de mais de um tipo bacteriano; 
 
 Alterações específicas no meio. 
 
• Ágar Sangue; 
 
 Eritrócitos; 
 
 Evidências de hemólise; 
 
 Bactérias b-hemolíticas; 
 
 a e g-hemolíticas. 
Meio de Cultura - Tipos 
• Meio azul de metileno eosina (EMB); 
 
 
 Inibe Gram positivas; 
 
 Centro Preto – Lactose positivo; 
 
 E. coli – coloração verde metálica. 
 
• Ágar Pseudomonas P; 
 
 Inibe bacterias gram + e – (exceto Pseudomonas); 
 
 Produção de piocianina; 
 
 Colônias com pigmentos azul-esverdeado; 
 
 Odor de uva. 
Meio de Cultura - Tipos• Meios Seletivos e Diferenciais; 
 
 
 Une características específicas de grupos bacterianos; 
 
• Ágar Sal 7,5% - Manitol; 
 
 Staphylococcus aureus; 
 
 Tolerância a salinidade; 
 
 Fermentação do manitol - ácido; 
 
 Indicador de alteração de pH. 
S. aureus 
S. epidermidis 
Meio de Cultura - Tipos 
• Ágar MacConkey; 
 
 
 Sais biliares e cristal violeta; 
 
 Inibição de Gram positivas; 
 
 Lactose – Fermentadoras X Não fermentadoras; 
 
 E. coli, Klebsiela sp., Salmonella. 
Klebisiela sp. 
Lactose positiva Lactose negativa 
Meio de Cultura - Tipos 
• Ágar SS; 
 
 
 Salmonella-Shygella; 
 
 Sais biliares, verde brilhante e citrato de sódio; 
 
 Inibe Gram positivos; 
 
 Produção de H2S – Tissulfato de sódio; 
 
 Lactose – Fermentadores X Não fermentadores. 
 
 
• Ágar Thayer Martim Chocolate; 
 
 Isolamento de N. meningitidis e N. gonorrhoeae; 
 
 Antibióticos – Neisserias saprofíticas. 
Meio de Cultura - Tipos 
• Meios de Enriquecimento; 
 
 
 Bactérias em pequeno número; 
 
 Meio de cultura líquido - caldos; 
 
 Bactérias que metabolizam o fenol. 
 
• Caldo tetrationato; 
 
 
 Inibe Gram positivos; 
 
 Sais Biliares; 
 
 Iodo – Inibe flora intestinal normal; 
 
 Enriquecimento de Salmonella sp. 
Meio de Cultura - Tipos 
• Ágar Mueller Hinton. 
 
 
 Condição de crescimento das principais bactérias; 
 
 Avaliação de resistência a antimicrobianos; 
 
 Enterobactérias, não fermentadores, Staphylococcus e Enterococcus. 
 
Meio de Cultura - Tipos 
• Meios para Transporte; 
 
 
 Manter a bactéria viável; 
 
 Carência de Fonte de Nitrogênio – Inibição da Multiplicação; 
 
 Fonte de nutrientes – Sobrevivência. 
• Meios Stuart; 
 
 
 Transporte e conservação de patogênicos; 
 
 Haemophilus spp., Pneumococcus. 
 
• Salina tamponada. 
 
 
 Meio líquido tamponado; 
 
 Mantém a bactéria viável – Fezes. 
 
Isolamento Microbiano 
• Amostras Biológicas; 
 
 
 Solo, água, pus, escarro, fezes, etc... 
 
 Grande variedade de microorganismos; 
 
 Técnicas de Isolamento. 
• Colônias; 
 
 Origem – esporos, grumos ou cadeias. 
 
 Características morfológicas distintas. 
 
• Distribuição Uniforme. 
 
 
 Visualização de colônias em placas; 
 
 Obtenção de culturas puras. 
 
Isolamento Microbiano 
• Semeadura por Esgotamento em Estrias; 
 
 
 Colônias puras isoladas; 
 
 Tubo – Meio nutriente; 
 
 Cultura pura – 1 tipo de bactéria. 
Isolamento Microbiano 
• Semeadura por Disseminação; 
 
 
 Alça de Drigalsky; 
 
• Técnica pour-plate; 
 
 
 Isolamento e Quantificação; 
Fases do Crescimento Microbiano 
• Fase Lag; 
 
 Pouca ou nenhuma divisão - Latência; 
 
 Síntese de DNA e enzimas. 
 
• Fase Log; 
 
 Tempo de geração constante; 
 
 Estágio industrial. 
 
• Fase Estacionária 
 
 Morte celular = Divisão binária. 
 
• Fase de Morte Celular; 
 
Morte celular > Divisão binária 
Quantificação Direta do Crescimento 
• Parâmetros; 
 
 Número; 
 
 Massa; 
 
 Concentração; 
 
 Atividade microbiana. 
• Contagem em placa; 
 
 Quantificação de células viáveis; 
 
 1 colônia → 1 bactéria de origem; 
 
 Inóculo original – Homogêneo; 
 
 Ausência de agregação; 
 
Diluição 
Seriada 
Pour Plate 
Espalhamento em placa 
X 
Quantificação Direta do Crescimento 
• Filtração; 
 
 Número pequeno de bactérias; 
 
 Volume de 100 mL; 
 
 Contagem de coliformes. 
 
• Câmara de Neubauer; 
 
 Contagem direta – sem incubação; 
 
 Células mortas; 
 
 Resultados Imediatos. 
 
• Contadores eletrônicos. 
 
 Contadores Coulter; 
 
 Método rápido. 
Quantificação Indireta do Crescimento 
• Turbidimetria; 
 
 Turbidez da cultura; 
 
 Espectrofotômetro; 
 
 Medida de absorbância. 
 
• Metabolismo; 
 
 Produto metabólico; 
 
 Ácido, CO2; 
 
• Peso Seco. 
 
 Crescimento de fungos; 
 
 Filtração do fungo, secagem e pesagem. 
Controle do Crescimento Microbiano 
• Esterilização; 
 
 Destruição de todas formas de vida; 
 
 Esterilização comercial; 
 
 Alimentos – Endosporos de C. botulinum. 
 
• Desinfecção; 
 
 Destruição de organismos nocivos; 
 
 Patógenos vegetativos – não formam esporos; 
 
 Superfícies ou substâncias inertes. 
 
• Anti-sepsia. 
 
 Tratamento em tecidos vivos; 
 
 Anti-sépticos. 
X 
Controle do Crescimento Microbiano 
• Degerminação; 
 
Remoção mecânica de organismos; 
 
 Álcool – Não necessariamente morte; 
 
 
• Sanitização; 
 
 Redução de contagem microbiana; 
 
 Níveis de segurança em saúde; 
 
• Bactericida X Bacteriostático; 
X 
Ação de Agentes Antimicrobianos 
• Alteração de Permeabilidade; 
 
 Lesão aos lipídeos e proteínas; 
 
 Agentes Químicos e antimicrobianos; 
 
 
• Danos às Proteínas; 
 
 Forma tridimensional; 
 
 Pontes de H e Pontes dissulfeto; 
 
 Rompimento - Calor ou agentes químicos. 
 
Amônio Quaternário 
• Danos á Ácidos Nucleicos; 
 
 Dano letal para a célula; 
 
 Radiação, calor, agentes químicos. 
 
 
Métodos Físicos - Calor 
• Histórico; 
 
 Preservação de alimentos; 
 
 Secagem, uso de sal, calor; 
 
 
• Calor; 
 
 Alimentos enlatados, materiais hospitalares; 
 
 Ponto de Morte Térmica – Temperatura → morte em 10 min.; 
 
 Tempo de Morte Térmica – Tempo de morte de todas as bactérias; 
 
 Tempo de Redução Decimal – Tempo de morte de 90% de bactérias. 
 
Métodos Físicos - Calor 
• Calor Úmido; 
 
 Coagulação ou desnaturação proteica; 
 
 Rapidamente em presença de água. 
 
 
• Fervura 100°C; 
 
 Formas Vegetativas – 10 min.; 
 
 Resistência de Endosporos e alguns vírus; 
• Autoclave; 
 
 Aquecimento acima da água fervente; 
 
 Elevada Pressão; 
Métodos Físicos - Calor 
• Autoclave - Princípio; 
 
 Maior pressão = Maior Temperatura; 
 
 Organismos em contato com o vapor. 
Pressão X Temperatura 
Pressão (psi) Temp (°C) 
0 100 
5 110 
10 116 
15 121 
Perguntas Valendo 0,1 (cada) 
• Por que é necessário mais tempo para esterilizar sólidos? 
 
• Por que não deve-se usar papel alumínio para embalar 
materiais a serem autoclavados? 
 
• Pode-se esterilizar óleos ou vaselina em autoclaves? Por que? 
 
Métodos Físicos - Calor 
• Pasteurização; 
 
 Aquecimento leve 63°C – 30 min.; 
 
 Leite pasteurizado – M. tuberculosis. 
 
 Teste da fosfatase. 
 
• Pasteurização HTST; 
 
 Alta temperatura e curto tempo; 
 
 72°C – 15 seg. 
• Temperatura Ultra elevada (UHT). 
 
 Armazenado sem refrigeração; 
 
 74°C – 140°C – 74°C em 5 seg. 
Métodos Físicos - Calor 
• Tratamento UHT. 
Métodos Físicos - Calor 
• Calor Seco; 
 
 Efeito da oxidação; 
 
• Chama direta; 
 
 Esterilização de alça em laboratórios; 
 
 Aquecimento – Brilho vermelho. 
• Incineração 
 
 Papeis, sacos, bandagens contaminados; 
• Ar quente 
 
 170°C por 2 h. ou mais - Forno; 
 
 Meio seco – Transferência lenta de calor. 
Métodos Físicos - Filtração 
• Utilização; 
 
 Componentes sensíveis ao calor; 
 
 Meios de cultura, vacinas, enzimas. 
 
• HEPA – Filtro de Partículas de ar de 
alta eficiência; 
 
 Salas de cirurgia, ala de queimados; 
 
 Microorganismos maiores que 0,3 mm. 
• Filtros de Membrana 
 
 Ésteres (acetato) de celulose ou polímeros; 
 
 Uso industrial e laboratorial; 0,01 mm – 0,45 mm. 
Métodos Físicos - Frio 
• Refrigeração; 
 
 Redução das reações químicas - bacteriostático; 
 
 Conservação – alimentos, drogas. 
 
• Congelamento; 
 
 Rápido congelamento - -50°C e -95°C; 
 
 Conservação de culturas microbianas. 
• Liofilização 
 
 Remoção de água – ↑ vácuo e ↓temperaturas; 
 
 Conservação prolongada de culturas. 
Métodos Físicos – Oferta de Água 
• Ressecamento; 
 
 Ausência de metabolismo - bacteriostático; 
 
 Organismos viáveis? Depende! 
 
 N. gonorrhoeae X M. tuberculosis; 
 
 Vírus e endosporos – Resistentes – pus, fezes, muco. 
 
• Pressão Osmótica; 
 
 Altas concentrações de soluto – sais, açucares; 
 
 Conservação alimentos; 
 
 Meio hipertônico – Plasmólise; 
 
 Fungos e bolores – ambientes de baixa umidade. 
Métodos Físicos – Radiação 
• Radiação Ionizante; 
 
 Comprimento de onda mais curto – ↓ 1 nm; 
 
 Maior energia – Radiação eletromagnética; 
 
 
• Atividade; 
 
 Ionização da água – radicais hidroxila → DNA celular. 
 
 “Golpes” em porções vitais - Mutação; 
 
 Penetração profunda – ação lenta. 
 
• Utilização; 
 
 Esterilização de materiais médicos; 
 
 Seringas, cateteres, luvas cirúrgicas. 
 
 
Métodos Físicos – Radiação 
• Feixes de elétrons de alta energia; 
 
 Baixo poder de penetração; 
 
 Alguns segundos de exposição; 
 
• Raios g; 
 
 Emitidos pelo cobalto radioativo; 
 
 Penetração profunda – ação lenta. 
 
• Raios X; 
 
 Similar a produção de feixes de elétrons; 
 
 Natureza similar aos raios g. 
 
 
Métodos Físicos – Radiação 
• Espectro de radiação; 
Métodos Físicos – Radiação 
• Radiação Não-Ionizante; 
 
 Comprimento de onda maior; 
 
• Luz Ultravioleta (UV); 
 
 Comprimento 260 nm → DNA celular; 
 
 Ligação entre timinas; 
 
 Replicação incorreta da célula. 
 
• Utilização; 
 
 Controle de micróbios no ar – Lâmpada UV; 
 
 Sala de hospitais, enfermarias; 
 
 Necessidade de exposição direta do organismo. 
 
 
Métodos Químicos de Controle 
• Características; 
 
 Usado em tecidos vivos e inanimados; 
 
 Apenas redução da população. 
 
 Níveis de segurança ou formas vegetativas. 
 
• Desinfecção Efetiva; 
 
 Grupo de organismos; 
 
 Natureza do material; 
 
 Superfície de contato com o organismo. 
 
• Escolha do Desinfetante; 
 
 Teste de Diluição; 
 
 Técnica do Papel Filtro 
 
Métodos Químicos - Tipos 
• Fenóis; 
 
 Raramente utilizado - Irritante; 
 
 Baixa ação antimicrobiana - ↓ 1%; 
 
 Hexaclorofeno – Gram + → Infecção de pele. 
 
• Atividade; 
 
 Lesão de membrana; 
 
 Inativação de enzimas; 
 
 Desnaturação de proteínas. 
 
• Cresóis; 
 
 Ativo em compostos orgânicos, estáveis; 
 
 Desinfetar pus, fezes, saliva. 
 
Métodos Químicos - Tipos 
• Halogênios; 
 
 Isoladamente ou em compostos; 
 
• Iodo (I2); 
 
 Bactérias, endosporos, fungos e vírus; 
 
 Combinação a tirosina – Função proteica; 
 
 Iodóforo – Tratamento de feridas. 
 
• Cloro (Cl2); 
 
 Cl2 + H20 → HOCl + Cl
+ + H+; 
 
 Agente oxidante – enzimas; 
 
 Descontaminar água, equipamentos, doméstico. 
 
 
Métodos Químicos - Tipos 
• Álcoois; 
 
 Efetivos – Fungos e bactérias; 
 
 Não efetivo – Vírus envelopados e endosporos. 
 
• Atividade; 
 
 Rompimento de membrana; 
 
 Dissolução de lipídeos; 
 
• Álcool 70%; 
 
 Desnaturação requer água; 
 
 Remoção de poeira, microorganismos e óleos; 
 
 Não efetivo quando aplicados a feridas. 
 
 
Métodos Químicos - Tipos 
• Metais Pesados; 
 
 Ação Oligodinâmica – íons; 
 
 Íons metálicos + Grupos sulfidrila = desnaturação. 
 
• Nitrato de Prata; 
 
 Prevenção da gonorreia oftálmica neonatal; 
 
 Nanopartículas de prata; 
 
 Purificação de água 
 
• Mercúrio; 
 
 Efeito bacteriostático; 
 
 Tóxico, corrosivo; 
 
Métodos Químicos - Tipos 
• Surfactantes; 
 
 Reduz a tensão entre moléculas de líquidos; 
 
 Sabões e Detergentes. 
 
• Atividade; 
 
 Baixo valor antí-séptico; 
 
 Remoção mecânica – pó, suor, óleo; 
 
 Emulsificação – Rompe filme oleoso. 
 
 
Micela 
Métodos Químicos - Tipos 
• Aldeídos; 
 
 Antimicrobianos mais efetivos; 
 
 Inativação de Proteínas. 
 
 Ligações cruzadas (-NH2, -OH, -COOH) 
 
• Formaldeído; 
 
 Conservação de amostras biológicas; 
 
 Inativação de vírus e bactérias em vacinas. 
 
 
• Glutaraldeído; 
 
 Menos irritante – Instrumentos hospitalares; 
 
 Solução 2% - Bactericida, viricida (10min), esporicida 3 – 10h). 
 
 Agente químico esterilizante.