bioquimica relatorio

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Bruna Caprioli
Luiz Henrique Baeta Neves
Marcia Maria dos Anjos
Aulas Bioquímica Clínica 1- Determinação de Glicemia em soro de pacientes em jejum
Bioquímica Clínica 2- Determinação de hemoglobina glicada em sangue total
Bioquímica clínica 
Universidade são Judas Tadeu
Faculdade de Ciências Biológicas e da Saúde
Curso Farmácia
São Paulo 
2018
Bruna Caprioli RA:818112946
Luiz Henrique Baeta Neves RA: 201404969
Marcia Maria dos Anjos RA: 201411995
FAR4AN- MCA
Aulas Bioquímica Clínica 1- Determinação de Glicemia em soro de pacientes em jejum
Bioquímica Clínica 2- Determinação de hemoglobina glicada em sangue total
Orientador:
Prefº. Sérgio Mengardo
 
Trabalho realizado para a disciplina de Bioquímica Clínica, curso de Farmácia, da Universidade São Judas Tadeu, como parte dos requisitos necessários ás avaliações parciais da disciplina.
Universidade são Judas Tadeu
Faculdade de Ciências Biológicas e da Saúde
Curso Farmácia
São Paulo 
2018
Sumário.
	Introdução............................................................................. ...................3
	Objetivos...................................................................................................4
	Determinação de glicemia em soro de pacientes em jejum.......................5
	Determinação de hemoglobina glicada em sangue total..........................5
	Materiais e métodos...................................................................................6
	Determinação de glicemia em soro de pacientes em jejum......................6
	Determinação de hemoglobina glicada em sangue total...........................7
 4Resultados....................................................................................................8
 4.1 Determinação de glicemia em soro de pacientes em jejum.........................9
 4.2 Determinação de hemoglobina glicada em sangue total.............................9
 5 conclusão....................................................................................................10
	Introdução
 Glicose é um carboidrato mais importante para o sistema biológico, pois as células utilizam como fonte de energia e um intermediário no metabolismo. As moléculas de glicose são transportadas para dentro das células, através da insulina, que é produzida pelo pâncreas.
 Pacientes que são portadores de diabetes tem o nível de glicose plasmática entre 70-99 mg/dl, enquanto os pré-diabéticos são considerados até 126 mg/dl e o diabético estará maior que 126 mg/dl.
 As analises bioquímicas realizadas em diabetes mellitus são realizadas para estabelecer um diagnóstico e controle, sendo eles: Glicemia de jejum; glicemia pós-Prandial e teste de tolerância a glicose (diagnóstico) e glicemia em jejum; hemoglobina glicada, frutosamina, insulinemia, peptídeo C e microalbuminúrica. 
	Objetivos
Este trabalho tem como objetivo realizar as análises e determinar as condições dos pacientes em relação a glicemia em soro em jejum e a glicemia glicada em sangue total.
	Determinação de glicemia em soro de pacientes em jejum
Método realizado para esta análise foi o de glicemia oxidase, no qual é um método enzimático, onde a amostra coletada de soro sofrerá a ação da enzima glicose oxidase, na presença de oxigênio, produzindo assim peróxido de hidrogênio, que juntamente ao reativo de corcom, formará um complexo róseo avermelhado. Adequando se a temperatura em banho maria, a amostra deve ser colocada no espectrofotômetro, realizando assim a leitura das substancias, para obter a concentração de glicose no soro.
	Determinação de hemoglobina em sangue total
A determinação de hemoglobina glicada está indiretamente relacionada aos níveis de glicose no período de glicolisação, indicando a monitoria e terapêutica do paciente diabético.
	Materiais e métodos 
	Determinação de glicemia em soro de pacientes em jejum
Materiais utilizados:
• 3 tubos de ensaio;
• Espectrofotômetro e cubetas;
• 1 micropipeta de 1,0mL;
• 1 micropipeta de 10μL;
• 5 ponteiras para micropipeta;
• 1 banho maria a 37°C;
• Soro humano recente;
• Luvas descartáveis;
• Reagente de cor.
O método utilizado foi o da glicose oxidase, em que se adiciona glicose em tampão de fosfato em pH 7.4contendo glicose oxidase, peroxidase, 4-Aminoantipirina e p-Hidroxibenzoato. Formando as seguintes reações:
Glicose + O2 + H2O GOD 》Ácido Glucônico + H2O2
2H2O2 + 4AAP POR 》 4-Antipirilquinonimina + 4 H2O
O resultado será uma coloração rósea avermelhada e sua intensidade é proporcional à concentração de glicose na solução. A cor rósea foi medida em espectrofotômetro com comprimento de onda em 505nm. Foi feito 3 amostras, sendo cada uma acondicionada no tubo de ensaio, cada tubo foi identificado e continha estas substâncias:
• 1° tubo: solução branco contém somente 1mL do reativo de cor
• 2° tubo: solução teste contém 10 μL soro e 1 mL reativo de cor
• 3° tubo: solução padrão contém 10 μL padrão e 1 mL reativo de cor
A solução padrão é de concentração já conhecida com 100mg/dL. Após a montagem das amostras todas foram levadas à banho maria por 5 minutos à 37°C, após banho maria levou-se as amostras ao espectrofotômetro para medir a absorbância de cada amostra. Para medir a absorbância das amostras teve que ajustar o espectrofotômetro em comprimento de onda de 505nn, após transferiu-se o conteúdo do tubo com a solução em branco em uma cubeta para zerar o aparelho e assim poder medir corretamente as respectivas absorbâncias.
 
3.2. Determinação de hemoglobina glicada em sangue total
Materiais utilizados na aula foram: 
• 1 micropipeta de 500μL; 
• 1 micropipeta de 100 μL;
 • 1 micropipeta de 20 μL; 
• ponteiras descartáveis para as micropipetas;
 • 1 pipeta graduada de 5,0 mL;
• 1 estante com 2 tubos de ensaio;
• Sangue coletado com anticoagulante EDTA;
• 1 frasco com hemolisante;
• 1 conjunto de tubo com resina e separador;
• Luvas descartáveis;
• Sangue total;
• Homogeneizador hematológico;
• Espectrofotômetro;
• Cubetas de espectrofotômetro.
 Primeiramente foi realizado o preparo do hemolisado a partir do sangue total colhido com anticoagulante EDTA. Onde homogeneizou-se a amostra e com auxílio de uma micropipeta dispensar 500μL do hemolisante em um tubo de ensaio, após acrescentar 100μL de amostra, e por fim deixar repousar por 5 minutos à temperatura ambiente.
O segundo passo foi a separação da hemoglobina glicada (HbA1), onde pegou-se o tubo com a resina e separador em que a resina deve estar homogeneamente suspensa no tampão, inverter o tubo 10x antes de adicionar o hemolisado; acrescentar 100μL do hemolisado ao tubo contendo resina; inserir o separador ao tubo, posicionando-o 1 cm acima da resina; misturar durante 6 minutos o conteúdo do tubo no homogeneizador hematológico. Após a homogeneização deixar em repouso por 3 minutos; empurrar o separador contar a resina até o ponto em que compactada contra o fundo do tubo passe a oferecer resistência, a solução penetrará na cânula plástica. Por fim transferir a solução para a cubeta de leitura. Após o preparo do hemolisado e da separação da hemoglobina glicada deve-se levar ao espectrofotômetro e fazer a leitura das absorbâncias de HbT (hemoglobina total) e HbA1 (hemoglobina glicada) em 405nm, antes de fazer cada leitura deve acertar o zero do aparelho com água destilada; a coloração final (vermelha) das amostras permanecerá estável por 3 horas, à temperatura ambiente.
	Resultados 
	Determinação de glicemia em soro de pacientes em jejum
A solução medida foi à contendo soro resultando em 1.149, entre uma medição e outra utiliza-se a solução em branco para zerar o aparelho, a solução contendo solução padrão resultou em 0.660
Calculo de concentração do soro: 1.449/0.660 = 2195 x 100 = 219,5 mg /dl.
	Determinação de glicemia glicada em sangue total
A solução contendo hemoglobina total teve uma leitura de 0.907, com hemoglobina 1 em 1.021. Iniciando a leitura deve se utilizar solução em branco para zeraro aparelho e entre as leituras.
Calculo de concentração HbA1 : 0.907 / 1,021 = 1,125 x 6,9 = 7,76% - 8%.
	Conclusão 
Através dos resultados concluiu -se que o paciente, a partir de seu soro coletado em jejum, resultou em 219,5 mg/dl, é um paciente diabético. E o resultado da amostra de HbA1 foi de 8%.
Comparando os resultados pode-se concluir que a glicemia em jejum do paciente é diabética, e de acordo com a HbA1 também se conclui que o paciente é diabético.