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UNIVERSIDADE FEDERAL DOS VALES DO JEQUITINHONHA E MUCURI FACULDADE DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE DEPARTAMENTO DE FARMÁCIA- DEFAR PRÁTICA- DOSAGEM DE CREATININA E UREIA Disciplina: Fundamentos de Bioquímica Clínica. Discentes:Iasmin Quirino, Hailla Beatriz, Isis Silva e Thais Fernanda. Docente: Valéria Gomes de Almeida. Diamantina-MG 2023 METODOLOGIA (ureia) Nesta prática realizou-se o exame de ureia, inicialmente foi preparado o reagente de trabalho sendo quatro volumes do reagente 1 e 1 volume do reagente 2. Em seguida o frasco foi identificado com data de expiração, o mesmo fica estável durante 2 dias na temperatura entre 15-25ºC e 28 dias entre 2-8ºC quando não houver contaminação química ou microbiana e o mesmo deve ser evitado a exposição à luz solar direta. Esse reagente de trabalho deve estar em condições de aproximadamente 37,5 ºC do fotômetro e em um comprimento de onda de 340 nm. Primeiramente acertamos o zero do aparelho com água deionizada e em seguida pipetamos em um tubo de ensaio devidamente identificado como teste ou padrão e colocamos 1,0 mL do reagente de trabalho (preparado previamente) e incubados à temperatura de trabalho durante 1 minuto. Adicionamos 0,01 mL da amostra fornecida pelo técnico do laboratório, homogeneizamos e transferimos imediatamente para a cubeta termostatizada a 37ºC e em seguida acionamos o cronômetro. Por fim, anotamos a absorbância aos 30 e 90 segundos, sendo que a diferença de absorbância (A) entre os dois tempos (A-A) de 30 a 90 para calcular os resultados. RESULTADOS E DISCUSSÃO Para calcular a concentração de uréia na amostra, é utilizada a seguinte equação: Ureia(mg/dL)= ΔA Amostra / ΔA Padrão x 70 Foram obtidos os seguintes resultados de absorbância em 30s e 90s: Padrão Amostra Absorbância 30s 0,848 0,841 Absorbância 90s 0,825 0,834 Dessa forma, podemos substituir os valores na equação e obter a concentração de uréia na amostra: Ureia = (0,841 - 0,834)/(0,848 - 0,825) x 70 ⇔ Ureia= 0,007/0,023 x 70 ⇔ Ureia= 21,30 mg/dL Os valores de referência para adultos em amostras de soro são: 15 a 45 mg/dL, logo, o resultado está dentro da faixa de referência. METODOLOGIA (creatinina) Nesta prática foi realizado o exame de creatinina sem desproteinização. Inicialmente foi preparado o reagente de trabalho sendo quatro partes do conteúdo do frasco de tampão (1) com uma parte de ácido píerico (2) e em seguida o mesmo foi homogeneizado. Esse reagente de trabalho deve estar em condições de aproximadamente 37,5 ºC em um comprimento de onda de 510 nm. Primeiramente acertamos o zero do aparelho com água destilada e em seguida pipetamos em um tubo de ensaio devidamente identificado 1,0 mL do reagente de trabalho (preparado previamente) e 0,1 mL da amostra fornecida pelo técnico do laboratório. Homogeneizamos e transferimos para uma cubeta termostatizada a 37ºC e em seguida acionamos o cronômetro. Por fim, anotamos a absorbância aos 30 e 90 segundos, respectivamente da A1 e A2, sendo que a diferença entre as leituras é proporcional à concentração da creatinina da amostra. RESULTADOS E DISCUSSÃO Para calcular a concentração de creatinina na amostra, é utilizado a seguinte equação: Creatinina(mg/dL)= ΔA Amostra/ ΔA Padrão x 3 Foram obtidos os seguintes resultados de absorbância em 30s e 90s: Padrão Amostra Absorbância 30s 0,1830 0,1596 Absorbância 90s 0,1195 0,1514 Dessa forma, podemos substituir os valores na equação e obter a concentração de creatinina na amostra: Creatinina= (0,1596 - 0,1514)/(0,1830 - 0,1195) x 3⇔Creatinina= 0,0082/0,0635 x 3 ⇔ Creatinina= 0,13 x 3⇔Creatinina= 0,39 mg/dL Os valores de referência para dosagem de creatinina são: ● Adultos do sexo masculino: 0,9-1,3 mg/dL ● Adultos do sexo feminino: 0,6-1,1mg/dL Logo, o valor obtido na prática está abaixo do valor de referência, os valores baixos da creatinina podem indicar quadros de desnutrição ou perda de massa muscular.
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