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Secreções e líquidos corporais Marília M. Araújo Biomédica Secreção Amostras • Orofaringe • Nasofaringe • Ouvido • Pele • Genitais • Escarro • Aspirados BAL e ATT • Fluidos \líquidos Secreção de orofaringe e nasofaringe Materiais o 2 swabs descartáveis (1 para nariz e 1 para garganta) o 2 tubos com meio de cultura Amies (com carvão para Corynebacterium diphtheria ) ou suwab com algodão alginatado. o 1 abaixador de língua descartável o Etiqueta para identificação dos tubos 1 Nariz (N) outro garganta (G), mais a identificação do paciente. * O meio de transporte deve ficar armazenado em geladeira, mais no momento da coleta deve está em temperatura ambiente. Secreção de orofaringe e nasofaringe Coleta Nariz : introduzir o swab ultrafino flexível e estéril na narina do paciente até encontrar resistência na parede posterior da nasofaringe. Realizar movimentos rotatórios; o O mesmo swab para as duas narinas . Garganta : com auxílio de um abaixador de língua, pressionar a língua para baixo e com swab estéril; o Fazer a coleta no redor da superfície da garganta, passando o swab pelas amídalas, úvula e toda a parede da garganta. o Enviar o meio com semeio, ao laboratório dentro de 24 h acondicionado dentro de saco plástico assim como a requisição preenchida dentro de isopor. *Imediatamente após a coleta, introduzir o swab no meio de transporte de Amies com carvão, para qualquer uma das coletas acima descritas. Secreção de orofaringe e nasofaringe Secreção de orofaringe e nasofaringe Processamento da amostra Gram\ Ziel Nielsen Semeio • Semear em Ágar sangue e Ágar Mac Conkey ou Teague. Incubação • 35 ̊à 37 ̊ C por 24 à 48 h em estufa (tensão ATM normal) para Agar sangue e agar Mc Conkey. Secreção de ouvido Coleta Secreção de Ouvido médio • Em caso de rompimento da membrana do tímpano, o fluído pode ser colhido com swab fino. • Antes do procedimento de coleta, limpar o ouvido externo com antiséptico seguido de lavagem com solução fisiológica estéril. *Amostras colhidas por aspiração não devem ser enviadas ao laboratório como secreção de ouvido e sim como secreção obtida por timpanocentese. Secreção de ouvido Coleta Secreção de Ouvido esterno • Limpar o canal do ouvido com anti-séptico seguido de lavagem com solução fisiológica estéril; aguardar alguns minutos e colher com “swab”, pressionando bem. Secreção de ouvido Processamento da amostra Gram Semeio • Ágar sangue e Ágar Mac Conkey. Incubação • 35 ̊ à 37 ̊ C por 24 à 48 h em estufa (tensão ATM normal) para Ágar sangue e Ágar Mc Conkey. Secreção de Pele • Tipos de lesão Lesão aberta (abscessos e exsudatos) Abscesso fechado (Pústula e vesícula) Ferida de queimadura • Abscesso : bolsa de “pus” que se acumula em tecidos ,órgãos e espaços do corpo. • Exsudatos :líquido com proteínas e leucócitos(pus). • Pústulas : pequeno tumor de pele com supuração (líquido) • Vesículas: estrutura cutânea de pequena dimensão com líquido. Secreção de Pele Pele (abscessos e exsudatos) Coleta Lesão aberta • Descontaminar as margens e a superfície da lesão com solução fisiológica, solução de povidona-iodo ou clorexidina a 0,2% solução aquosa, dependendo do tipo de lesão. • Proceder nova limpeza com solução fisiológica estéril. • Coletar o material purulento localizado na parte mais profunda da lesão utilizando, de preferência, seringa e agulha de insulina. • Se não for possível a coletar utilizando swab com meio de transporte. *Não é recomendado cultura de lesões secas ou crostas. Secreção de Pele Pele Coleta Abscesso fechado (Pústula e vesícula) • Abscesso fechado é o local ideal para a coleta. • Fazer anti-sepsia com produto adequado. • Aspirar o exsudato com agulha e seringa. Ferida de queimadura • A coleta deve ser realizada após desbridamento e descontaminação da lesão (enfermeiro ou técnico). • Coletar com swab estéril com meio de transporte. • Amostra da superfície da lesão normalmente representa colonização. Secreção de Pele Processamento da amostra Gram Semeio • Semear em Ágar sangue e Ágar Mac Conkey ou Teague Incubação • 35 à 37 C por 24 à 48 h em estufa (tensão ATM normal) para Agar sangue e agar Mc Conkey ou Teague. Secreção genitais Coleta Feminina Recomendações • Não estar menstruada ƒ • Evitar ducha e cremes vaginais na véspera da coleta ƒ • Três dias de abstinência sexual Secreção vaginal e endocervical. • Colher utilizando espéculo e swab endocervical, removendo previamente a secreção e colher secreção por rotação do swab . • Usar meio de transporte específico. • A lâmina para gram já pode ser confeccionada neste momento. • Sendo importante utilizar um swab para lâmina outro para material de cultura. Exame direto • Fazer exame à fresco de secreção vaginal para pesquisa de Trichomonas; ƒ • Diluir secreção em 1 gota água destilada ou soro (solução fisiológica); • Observar ao microscópio. Secreção genitais Processamento da amostra ƒ Gram Semeio Neisseria gonorrhoeae • Ágar-Chocolate ou Thayer Martin chocolate. Para demais pesquisas • Ágar sangue e ágar Mc Conkey ou Teague. Incubação • 35 à 37 C por 24 à 48 h em estufa (tensão ATM normal) para Agar sangue e agar Mc Conkey ou Teague. • 35 à 37 C por 24 à 48 h para agar chocolate usar jarra de tensão de CO2. Secreção genitais Processamento da amostra ƒColeta Masculina \uretral • Solicitar ao paciente para retrair o prepúcio; • Limpar a secreção emergente com gaze estéril; • Introduzir o swab, com haste de alumínio, cerca de 4 centímetros no canal uretral; girar o swab delicadamente de 8 a 10 vezes para obter o maior número de células epiteliais possíveis; • Fazer um esfregaço fino e homogêneo na lâmina própria de clamídia; • Encaminhar diariamente ao laboratório (lâmina em porta lâminas\ swab em tubo estéril com solução salina tamponada ou meio de transporte de escolha). Feminina : afastar os labios vaginais e seguir os mesmos procedimento de coleta acima descritos (masculino\homens). Secreção genitais Processamento de amostra Gram\Ziel Nielsen Semeio Neisseria gonorrhoeae • Ágar-Chocolate ou Thayer Martin chocolate. Para demais pesquisas • Ágar sangue e ágar Mc Conkey ou Teague. Incubação • 35 à 37 C por 24 à 48 h em estufa (tensão ATM normal) para Agar sangue e agar Mc Conkey ou Teague. • 35 à 37 C por 24 à 48 h para agar chocolate usar jarra de tensão de CO2. Secreção genitais Escarro Coleta de escarro • Colher, de preferência, a primeira amostra da manhã; • Orientar o paciente para enxaguar previamente várias vezes a boca com água para remover a flora bacteriana superficial dessa região ; • Colher a amostra obtida após tosse profunda, diretamente em um frasco de boca larga; • Explicar ao paciente a diferença de uma amostra obtida após tosse profunda e saliva, para se obter um material de melhor qualidade; • Paciente incapaz de expectorar – colher escarro induzido após nebulização com solução fisiológica estéril . Escarro Processamento da amostra Ziel Nielsen Semeio • Semear com a alça calibrada na placa de Ágar chocolate. • Semear com a alça calibrada de nas placas de Ágar sangue e Mac Conkey\Teague . Incubação • Ágarchocolate a 35ºC em atmosfera adequada (jarra) e estufa 24 à 48h. • Incubar em estufa Ágar sangue e Mac Conkey\Teague em 35 a 37 C de 24 à 48h. Outras secreções Todos coletados por médico,enfermeiro ou fisioterapeuta intensivista. Lavado bronco alveolar (BAL) • Homogeneizar o material. • Imergir a alça calibrada na amostra de forma vertical e semear na placa de Ágar chocolate. • Repetir o mesmo procedimento acima com alça calibrada, semeando na placa de Ágar sangue e Mac Conkey\Teague . Incubação • Ágar chocolate a 35ºC em atmosfera adequada (jarra) e estufa 24 à 48h. • Incubar em estufa Ágar sangue e Mac Conkey\Teague em 35 a 37 C de 24 à 48h. Outras secreções Aspirado traqueal (AT) ou transtraqueal (ATT) • Se necessário diluir 1:10 com solução fisiológica 0,9% (0,1 mL da amostra + 0,9 mL de sol. Fisiológia a 0,9%); • Semear com a alça calibrada na placa de Ágar chocolate. • Semear com a alça calibrada nas placas de Ágar sangue e Mac Conkey\Teague . • Incubar Ágar chocolate a 35 ̊C em atmosfera adequada (jarra) e estufa 24 à 48h. • Incubar em estufa Ágar sangue e Mac Conkey\Teague em 35 ̊ a 37 ̊ C de 24 à 48h. Fluidos \ líquidos estéreis o Pleural, Ascítico, Biliar, de Articulações e Líquor Todos coletados por médico. • Centrifugar a amostra a 4500-5000 rpm por 15 minutos; • Semear em meios apropriados por esgotamento; • Semear com a alça calibrada na placa de Ágar chocolate(guando convir). • Semear com a alça calibrada nas placas de Ágar sangue e Mac Conkey\Teague . • Incubar Ágar chocolate a 35 ̊C em atmosfera adequada (jarra) e estufa 24 à 48h. • Incubar em estufa Ágar sangue e Mac Conkey\Teague em 35 ̊ a 37 ̊ C de 24 à 48h. Antibiograma Teste de sensibilidade a antibióticos • Método de difusão em disco • Ágar Mueller Hinton ou A. sangue • Discos de antibióticos • Semear amostra direta ou de colônia a ser analisada (podendo fazer diluição em salina caso convir). • Adiciona se discos de antibióticos • Incuba a 35 à 37 C por 24 à 48 h em estufa bacteriológica . • Observar e medir halos de inibição. Obrigada!!! Exercício 1.Quais os passos para processamento de amostra bacteriológica? 2.Quais os cuidados devemos ter no momento da coleta? 3. Como é feita a coleta de secreção vaginal? 4. Como é feita a cultura de urina? 5. Quais bactérias semeamos em ágar chocolate? 6. Quais diferenças entre coleta de secreções onde temos feridas abertas e nódulos? 7. Qual o intuito ( porque ) em médico solicitar uma hemocultura? Descreva a técnica de hemocultura ,bem como o meio utilizado? Bom estudo!!!