2o RELATÓRIO DE BIOLOGIA - EXECUÇÃO DA TÉCNICA DE COLORAÇÃO DE GRAM E ANÁLISE DA MORFOLOGIA DE BACTÉRIAS PRESENTES EM IOGURTES

Prévia do material em texto

UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO
FACULDADE DE ARQUITETURA, ENGENGARIA E TECNOLOGIA- FAET
ENGENHARIA SANITÁRIA E AMBIENTAL 
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA DE BIOLOGIA APLICADA
EXECUÇÃO DA TÉCNICA DE COLORAÇÃO DE GRAM E ANÁLISE DA MORFOLOGIA DE BACTÉRIAS PRESENTES EM IOGURTES 
Cuiabá – MT
2018
	
	TALITA TELES CAVALCANTE
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA DE BIOLOGIA APLICADA
EXECUÇÃO DA TÉCNICA DE COLORAÇÃO DE GRAM E ANÁLISE DA MORFOLOGIA DE BACTÉRIAS PRESENTES EM IOGURTES
Relatório de aula prática elaborado sob a orientação do Profª. João Batista de Lima, referente a disciplina de Biologia Aplicada para avaliação referente ao 2º semestre do curso de Engenharia Sanitária e Ambiental da Universidade Federal do Mato Grosso.
Cuiabá – MT
2018
OBJETIVO
Execução da Técnica de Gram, para coloração de bactérias, e análise microscópica da morfologia das bactérias presentes nas culturas de iogurte.
 
MATERIAIS UTILIZADOS
Microscópio óptico
02 Lâminas para microscopia
Culturas bacteriológicas
Bateria de Gram
Palito de Dente
Suportes para coloração
Algodão
Bico de Bunsen e Óleo de imersão.
MÉTODOS 
Preparação e observação das bactérias presente no leite fermentado.
Deu-se inicio ao procedimento da seguinte maneira:
Esterilizou-se a lâmina na chama azul do bico de Bunsen;
Com auxílio de um palito de dentes realizou-se o esfregaço bacteriano sobre a lâmina em movimentos cadenciados longitudinalmente sempre no centro da lâmina, conforme demonstração;
Com auxílio de uma pipeta de Pasteur individual para cada produto adicionou-se na sequência: 
Uma quantidade da violeta de genciana sobre o esfregaço e aguardou-se por aproximadamente minuto para que o corante secasse. Inclinou-se a lâmina para que o excesso fosse escorrido;
Uma quantidade de Lugol sobre o esfregaço e aguardou-se por aproximadamente minuto para que o corante fosse fixado. Inclinou-se a lâmina para que o excesso fosse escorrido;
Uma quantidade de álcool/cetona sobre o esfregaço e inclinou-se a lâmina para que o excesso de corante fosse escorrido. Repetindo esse passo até que todo o excesso fosse removido, e as bactérias Gram negativas pudessem ser “descoloridas” como esperado, em seguida lavou-se em um filete de aguá corrente;
Uma quantidade de Fucsina sobre o esfregaço e aguardou-se por aproximadamente 30 segundos para que o corante fosse fixado. Inclinou-se a lâmina para que o excesso fosse escorrido.
Logo após adicionou-se água para retirar o excesso de corante. Repetindo esse passo até que todo o excesso fosse removido
Após secar no bico de Bunsen, colocou-se a lâmina sobre a mesa de observação e utilizando o chariot a lâmina foi posicionada onde a luz do microscópio a atravessasse e atingisse o esfregaço bacteriano;
Ajustou-se então a intensidade da luz e o foco da imagem através do macrômetro e micrômetro.
RESULTADOS
Com os procedimentos citados anteriormente observou-se individualmente as lâminas das amostras de culturas bacteriológicas na ocular com a objetiva de cor amarela (4x) onde foram ampliadas em 40 vezes maior que o seu tamanho real. 
No segundo momento girou-se o revólver do microscópio, podendo visualizar a imagem através da objetiva de cor verde (10x) que tem capacidade de aumentar vista das amostras de culturas bacteriológicas em 100 vezes maior que o seu tamanho real.
No terceiro momento girou-se o revolver novamente, até chegar à objetiva de cor azul (40x) aumentando assim 400 vezes o tamanho das amostras de culturas bacteriológicas. 
No quarto momento girou-se o revolver novamente, até chegar à objetiva de cor amarela, para que fosse possível adicionar o óleo de imersão sobre o esfregaço para que fosse possível distinguir e observar os bacilos presentes na amostra de “Chamyto”. Novamente girou-se o revolver, porém dessa vez no sentido anti-horário para chegar à objetiva de cor branca (100x) tendo vista da amostra em 1000 vezes maior que seu tamanho real. Como mostrado nas imagens a seguir:
CONCLUSÃO
As bactérias encontradas nas culturas bacteriológicas dos iogurtes puderam sem classificadas como: Bacilos.
Os Lactobacilos encontrados no “Chamyto” são gênero de bactérias, geralmente Gram Negativas, anaeróbias facultativas ou microaerofílicas (que exigem baixíssimas concentrações de oxigênio para seu desenvolvimento), em forma de bastonete, que podem ser encontrados na microbiota intestinal.
O uso do microscópio possibilitou a visualização de tais estruturas invisíveis a olho nu.