Fatores Limitantes de Crescimento Microbiano

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Métodos de Coloração 
 Coloração Simples: 
 
 Coloração Diferencial: 
 Coloração Álcool-Ácido resistente: 
 Coloração de Gram 
 
 Colorações Especiais: 
 
 Endosporo 
 Cápsula 
 Flagelo 
 
 Coloração Simples 
  Solução aquosa ou alcoólica de um único corante 
 básico 
 
  Utilizada para tornar visíveis as formas e os 
 arranjos celulares 
 
 * Um mordente pode ser utilizado para auxiliar 
 na fixação do corante ao material (iodo) 
 
 Exemplos: azul de metileno, violeta de genciana e 
 safranina 
 
 
 Coloração Diferencial- Gram 
 Coloração Diferencial 
 (resistência ao álcool-ácido Ziehl-Neelsen) 
Bactérias:Mycobacterium 
Presença de uma parede celular atípica 
 Substituição do LPS: ácido micólico (ceroso) 
 
 Coloração Diferencial 
 (resistência ao álcool-ácido Ziehl-Neelsen) 
Bactérias:Mycobacterium 
 
Esfregaço 
(aquecer por 5 min); 
 fucsina de Ziehl; 
solução álcool-ácido; 
 azul de metileno 
 
Bactérias álcool- ácido 
resistentes: 
 * coram de rosa 
 
 Colorações Especiais: Endosporo 
 Esfregaço; verde 
de malaquita 
(aquecer por 5 
min); 
Solução de 
safranina 
(0,25%) 
 
 
 Colorações Especiais: Cápsula e 
 Flagelo 
 
CRESCIMENTO BACTERIANO 
– Fonte de carbono 
– pH 
– Oxigênio 
– Temperatura 
– Nutrientes (macro e micronutrientes) 
Crescimento microbiano: refere-se ao número e não ao 
tamanho 
– colônias: grupos de células, aumentando o número e 
se acumulando 
 
 
Fatores limitantes do crescimento microbiano 
 Estrutura de uma holoenzima 
Fatores físicos e químicos 
• Temperatura: divisão em grupos, considerando 
variações na temperatura 
 
• Psicrófilos: (temp. baixas; 0-20º C) 
• Mesófilos: (temp. moderadas; 25-40 º C) 
• Termófilos: (temp.; 50- 60 º C) 
 
pH concentração de H+ na solução 
• Maioria dos microrganismos: próximo a 
neutralidade, 6,5-7,5 
• Meios ácidos: pH: 4,0 (repolho azedo, picles, 
queijos) ácidos produzidos durante a 
fermentação 
• pH:1,0 bactérias encontradas, em águas de drenagem 
de minas de carvão 
• Fungos e leveduras: pH ótimo, 5-6 
• Meios básicos: alcalinidade inibe o crescimento 
• Tamponamento dos meios de cultura: 
manutenção do pH 
Pressão osmótica 
• 80-90% do conteúdo celular é água 
• água presente dentro da célula, pode ser 
removida por elevações na pressão 
osmótica 
• Célula em meio hipotônico: Turgescência 
• Célula em meio hipertônico: Plasmólise 
• Importância: inibição de crescimento ( membrana 
plasmática separa-se da parede celular) 
– adição de sais ou outros solutos pode ser utilizada 
na preservação de alimentos 
Pressão osmótica 
• Meio hipertônico (sal, açúcar) remove 
água do interior da célula, impedindo 
crescimento 
 
– Halofílicas extremas  altas 
concentrações 
– Halofílicas obrigatórias de sais (30%) 
 
– Sthaphylococcus aureus ( cavidade nasal) 
* Superoxido Dismutase: SOD e Catalase 
Oxigênio: pode causar a morte 
Meios de cultivo especiais: (tioglicolato de sódio) 
Jarras especiais (tubos e placas de Petri) 
Capelas: manipulação 
Cultivo de anaeróbicos 
Recepiente para cultivar 
bactérias anaeróbicas 
em placas de Petri 
Influência de Fatores Químicos 
• Carbono: síntese de 
todos os compostos 
orgânicos 
– Quimio-heterotróficos 
( proteínas, 
carbohidratos, lípidios) 
– Quimíoautotrófico e os 
fotoautotróficos: (CO2) 
• Oxigênio: 
• Nitrogênio, enxofre e 
fósforo: síntese de 
material celular, 
DNA,RNA, ATP, 
enzimas,aminoácidos
, etc. 
Meio de Cultura 
• Material nutriente para o crescimento 
microbiano em laboratório 
• Nutrientes, água, pH, quantidade de O2 
(presença ou ausência) 
• Adição de agente solidificante (ágar) 
• Estéril 
• Inoculação 
• Temperatura 
Meio Quimicamente Definido 
• Meio deverá conter a fonte de carbono, 
nitrogênio, enxofre, fósforo 
• Composição química exata 
 
• Meios complexos 
• Extratos de leveduras 
• Peptonas: digestão parcial proteica 
Meios de Cultivo 
Meios de Cultivo 
• SELETIVO: favorece o crescimento de bactéria 
de interesse, impedindo o crescimento de 
outros. Ex: Ágar MacConkey, inibe gram +, 
cresce Gram - 
• DIFERENCIAL: fácil identificação da colônia da 
bactéria de interesse 
• Ex: Ágar-Sangue: Lise das células sanguíneas, 
formação de halo, Streptococcus pyogenes 
 Ágar MacConkey: bactérias fermentadoras 
de lactose, Escherichia coli 
 
Hemólise Total: Streptococcus pyogenes; 
Streptococcus hemolyticus 
 
Hemólise Parcial: Streptococcus viridians; 
Streptococcus pneumoniae 
 
 
 
Gama Hemólise - Sem atividade hemolítica