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Laboratório de biologia: microscopia óptica Ana Paula Monteiro Ana Silvia Tino Eduarda Saraiva Passare Jeane de Oliveira Souza do Nascimento Raphaela Beltrame Daquila Olian Thaís Ingrid Bordin Araçatuba 2017 Laboratório de biologia: microscopia óptica Trabalho apresentado à disciplina de Biologia Celular do curso de Farmácia - Centro Universitário Católico Salesiano Auxilium - Araçatuba Prof.a Roseli Biondo Araçatuba 2017 SUMÁRIO 1 INTRODUÇÃO..............................................................................................................4 1.1 O microscópio .............................................................................................................4 1.2 Componentes de um microscópio................................................................................5 2 OBJETIVOS...................................................................................................................7 3 MATERIAIS E MÉTODOS...........................................................................................7 3.1 Focalizações ao microscópio ótico..............................................................................7 3.2 Observações de células epiteliais da mucosa bucal.....................................................7 4. RESULTADOS ............................................................................................................8 5. CONCLUSÃO ..............................................................................................................8 6. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS..........................................................................9 1 INTRODUÇÃO O microscópio é o mais importante instrumento no estudo da biologia celular. A microscopia óptica, ou de luz, permite que enxerguemos estruturas de observação impossível a olho nu, através da incidência de luz, e de lentes objetivas. Há vários tipos de microscópio: microscópio ultravioleta, microscópio de fluorescência, microscópio de contraste de fase, microscópio de polarização, microscópio eletrônico, microscópio eletrônico de varredura (MEV) e microscópio eletrônico de transmissão (MET). Acredita-se que o microscópio foi inventado em 1591 por Zackarias Janssen e seu pai, Hans Janssen, dois holandeses fabricantes de óculos. Eles descobriram que duas lentes de vidro, montadas apropriadamente nas extremidades de um tubo, ampliavam as imagens e permitiam observar objetos muito pequenos, invisíveis a olho nu. Tudo indica, porém, que o primeiro estudioso a empregar um microscópio na investigação da natureza foi o holandês Antonie Van Leeuwenhoek. 1.1 O microscópio A imagem do microscópio pode ser formada por meios ópticos, acústicos ou eletrônicos e recebida por reflexão, processamento eletrônico ou por uma combinação dos dois métodos. O microscópio é composto por uma parte óptica, formada por três sistemas de lentes (objetivas, ocular e condensador), pelo diafragma e por uma fonte de incidência de luz. É composto também por uma parte mecânica, que garante o suporte para a visualização. A visualização no microscópio se dá da seguinte forma: o condensador é responsável pelo ajuste de luminosidade e pela projeção de um cone de luz em um espelho, passando pela lâmina até que chegue às objetivas. O microscópio óptico possui objetivas de 4, 10, 40 e 100, que proporcionam uma visão panorâmica de aumento aproximado de 40x, 100x, 400x e 1000x, respectivamente, sendo que para a visualização de estruturas com aumento de 1000x é necessária utilização de óleo de imersão para que a lâmina não seja danificada. Nas lentes objetivas a imagem é ajustada pelo seu limiar de resolução, que proporciona uma maior riqueza de detalhes; e logo é projetada às lentes oculares, que farão novamente o aumento da imagem, finalizando o processo de visualização. Por fim, a parte mecânica do microscópio é composta pelas seguintes estruturas: base, braço, revólver (que permite a troca da objetiva a ser utilizada), platina (haste metálica onde é inserida a lâmina), charriot (possibilita o movimento da platina para melhor focalização da lâmina), canhão ou tubo (onde se localizam as lentes oculares), e parafusos micrômetro e macrômetro (responsáveis pela focalização). Componentes de um Microscópio Um microscópio óptico típico é constituído por partes mecânicas e ópticas: Base: é o suporte do microscópio, peça que sustenta todas as outras. Braço ou estativa: é a peça que liga a base até a parte superior do microscópio e onde se deve segurar o microscópio para ser transportado. Fonte de luz: normalmente uma lâmpada ou, em modelos mais antigos, um espelho, que se apoia na base do microscópio. Diafragma (Filtro de luz): se liga a uma alavanca que permite sua abertura ou fechamento, levando ao controle da passagem total ou parcial da luz. Condensador: situado entre a platina e a base, o condensador converge os raios luminosos provindos da lâmpada e projeta-os como um cone de luz sobre o material que está sendo examinado. Platina: é uma placa de metal com um orifício no centro, por onde passa a luminosidade. O objeto que vai ser observado é colocado sobre uma lâmina de vidro e está, sobre a platina, exatamente em cima do orifício. Charriot: Localizado acessória e superficialmente à platina, é formado por uma presilha, dois botões giratórios e dois trilhos que têm a função de movimentar a lâmina no plano e assim permitir a observação de toda a sua área. Lentes objetivas: são lentes que projetam uma imagem aumentada e invertida do objeto nas oculares e inserem-se no revólver. Toda objetiva traz gravado o número do aumento que proporciona. A objetiva de 100X é também chamada objetiva de imersão e é somente utilizada com óleo especial, o qual permite maior refração da luz para dentro da objetiva, corrigindo a pouca luminosidade nas observações feitas em grandes aumentos. Revólver: peça encontrada abaixo do canhão na qual se inserem as lentes objetivas. É dotado de um movimento de rotação que permite posicionar a objetiva desejada para a observação do material a ser analisado. Canhão: parte mais superior do microscópio, contém um conjunto de espelhos que projetam a imagem em direção às oculares nele encaixadas. Lente ocular: aumenta a imagem do objeto após o aumento já proporcionado pela objetiva. É através desta lente que o observador vê a imagem do objeto. Toda ocular traz gravado o número de aumentos que proporciona. Par saber-se em que aumento vemos um objeto ao microscópio, basta multiplicar o número do aumento dado pela objetiva pelo número do aumento dado pela ocular. Por exemplo, se a objetiva usada aumenta 5X e a ocular aumenta 10X, o objeto está sendo observado com um aumento total de 50X. Macrométrico e micrométrico: na parte lateral da estativa existem 2 parafusos encaixados um no outro. O maior deles é o macrométrico, que permite grandes avanços ou recuos da platina em direção à objetiva, enquanto o micrométrico permite pequenos avanços ou recuos. Esse movimento da platina leva à focalização do material observado em diferentes aumentos. OBJETIVOS Conhecer os componentes de um microscópio; Manusear o microscópio óptico; Preparar lâminas a fresco; Calcular a ampliação dos materiais biológicos observados ao microscópio óptico; Examinar e observar as células da mucosa bucal. 3 MATERIAIS E MÉTODOS Microscópio óptico; Lâminas; Lamínulas; Um conta gotas; Azul de metileno; Células da mucosa bucal; Um palito de madeira, para coleta. Focalizações ao microscópio ótico Iniciou-se com a observação dos componentes presentes no microscópio, com o foco das lâminas prontas nos aumentos de 4x, 10x e 40x. 3.2 Observações de células epiteliais da mucosa bucal Coletou-se amostras da mucosa interna da boca de todos os integrantes do grupo, e com o auxílio de uma espátula, depositou-se o material sobre a lâmina, pingou-se uma gota de azulde metileno sobre o material e cobriu-se com a lamínula. Em seguida, cada integrante observou ao microscópio em aumento de 4x, 10x e 40x os resultados e concluiu-se com anotações das imagens visualizadas. 4 RESULTADOS As imagens permitiram a perfeita visualização das células da mucosa bucal de uma participante do grupo (Thaís), a tintura do azul de metileno corou o citoplasma das células e o núcleo ficou evidente com uma coloração azul mais escura, como é permitido observar nas imagens obtidas pelo grupo: 5 CONCLUSÃO Por meio desta prática desenvolvida no laboratório de biologia, foi permitida a visualização do microscópio, suas partes e suas funções. As atividades desenvolvidas permitiram a interação, a aprendizagem e o manuseio do equipamento, assim como a noção real de uma célula, seu tamanho, forma e a visualização de seu núcleo. A pratica ajudou a entender, visualizar e a ter uma vivência com a teoria passada em aulas anteriores, possibilitando um maior aprendizado. 6 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS MELO, Aline; COSTA, Caroline; SCHIMITT, Leticia; DEGGERONE, Sharlyne; CRUZ, Vanessa. Microscopia. Disponível em: <http://www.ebah.com.br/microscopia-pptx-a20532.html>. Acesso em 02/05/2017 GOLDENSTEIN, Hélio. Microscopia ótica. Disponível em: <http://www.ebah.com.br/ microscopia-otica-pdf-pdf-a666.html>. Acesso em 02/05/2017 TEODORO, Thassia. Microscopia óptica. Disponível em: <http://www.biomedicinaemacao.com.br/2012/02/microscopia-optica.html?m=1> Acesso em 02/05/2017 LACERDA, Guilherme Araújo. Introdução ao trabalho de microscopia. Disponível em: <http://abcdafarmacobotanica.blogspot.com.br/2013/05/microscopia.html>. Acesso em 05/05/2017 AUGUSTO, Luis. Saiba quais são os tipos de microscópios existentes. Disponível em: <http://www.prolab.com.br/blog/saiba-quais-sao-os-tipos-de-microscopios-existentes/>. Acesso em 05/05/2017 DE SOUSA, Amanda S. Microscopia e Exame de Material Direto ao Microscópio. Disponível em: <https://www.passeidireto.com/arquivo/28495263/relatorio-microscopio>. Acesso em 18/05/2017
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