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Tradução 2/092/09 Tradução Síntese de um polipeptídio dirigida pela seqüência de RNA A grande maioria dos genes codificam mRNA cuja função é servir com o intermediário na sínteses do produto gênico final , a proteína. RNA t e RNA r: (RNA funcionais) importantes na síntese das proteínas T.Reverse tRNA: São os adaptadores. Traduzem o códon de três nts no mRNA no aa correspondente . Tradução Uma molécula de tRNA pode levar São componentes gerais da maquinaria da tradução. Uma molécula de tRNA pode levar um aa para o ribossomo com a finalidade de traduzir qualquer mRNA Tradução rRNA: são os principais componentes dos ribossomos Complexos macromoleculares que reúnem aa para formar a proteína cuja seqüência é para formar a proteína cuja seqüência é codificada em um mRNA especifico. Tradução Após um amplo processamento os mRNA eucarióticos são exportados do núcleo para a tradução em ribossomos que residem no citoplasma. Em procariontes a tradução de um mRNA começa em sua ponta 5’ enquanto o resto do mRNA ainda esta sendo transcrito. �São as principais determinantes das forma e função biológica. �Uma proteína é um polímero composto de monômeros chamados de aa. (Proteína é uma cadeia de aa). �Os aa tem a formula geral: C COOH H H N Proteínas C COOH R H 2 N Existem 20 aa nas proteínas Cada um tem um grupo R diferente que da ao aa as propriedade únicas (desde um H-glicina- ate um complexo anel – triptofano) Proteínas Nas proteínas os aa são ligados por uniões covalente chamadas ligações peptídicas Ligação peptídica, formada por uma ponta amino (NH2) de um aa com a ponta carboxila (COOH) de outro aa. A seqüência linear de nts em um gene determina a seqüência linear de aa em uma proteína Proteínas: Estrutura complexa com 4 níveis de organização Código genético �Código de três letras ou trincas. As trincas são chamadas de códons �Não é superposto �O código é lido de um ponto inicial fixo e continua ate a ponta da seqüência codificanteseqüência codificante �É redundante, alguns aa são especificados por mais de um códon Código genético �Se cada letra (ACGU) é uma palavras então teríamos 4 palavras �Se cada palavra fosse de 2 letras seria possíveis 4x4= 16 palavras AU, CU, ou CC não é grande o suficiente 20aa 20 palavras ou mais �Se as palavras fossem de 3 letras seria possivel 4x4x4=64 palavras o que fornece mais palavras do que o que precisamos Stop codon: é um sinal para o mecanismo de tradução de que a proteína agora esta completa. UAG: códon ambar UGA: códon opala Código genético UAA: códon ocre 4 hastes de dupla hélice e três alças unifilamentares Alça media é chamada de anticodon , seqüência tRNA: RNA transportadores Molécula unifilamentar de forma de trevo anticodon , seqüência complementar ao códon para o aa carregado pelo tRNA. O anticodon no tRNA e o codon no mRNA ligam-se por pareamento especifico de bases (RNA-RNA) tRNA Códon lido em sentido 5’ 3’ Os aa estão ligados ao tRNA pela enzima aminoacil-tRNA sintetases. Possui dois sítios de ligação: um Possui dois sítios de ligação: um para o aa e outro para o tRNA. O aa é ligado a ponta 3’ livre do seu tRNA Oscilação: situação onde o terceiro nts do anticodon (5’) pode formar dois alinhamentos Redundante: mais de um códon corresponde a um único aa como também, vários códons podem tRNA também, vários códons podem parear com mais de um anticódon (oscilação) Ribossomos A sínteses de proteínas acontece quando o as moléculas de tRNA e mRNA se associam no ribossomo Formados por duas subunidades, menor e maior (30S e 50S ou 40S e 60S) As subunidades são compostas de RNA e proteínas)As subunidades são compostas de RNA e proteínas) Ribossomos Fornece o ambiente para o controle da interação entre o mRNA e o tRNA Fabrica migratória que se desloca ao longo do molde (mRNA) Duas subunidades que desempenham papeis específicos na sínteses protéica sínteses protéica E.Coli : subunidade menor (30S) contem rRNA 16S, a subunidade maior (50S) contem rRNA 23S e RNA 5S Encontram-se no citoplasma Características do Ribossomo As moléculas de tRNA e mRNA são posicionadas no ribossomo, o códon do mRNA pode interagir com o anticódon do tRNA O sitio de ligação para o mRNA esta dentro da subunidade menor Após a ligação do tRNA na sub unidade menor liga-se a subunidade maior (anticódon –menor, aminoacil-maior) O processo de tradução pode ser dividido em 3 fases : Iniciação, Alongamento e Término Alem dos ribossomos, mRNA, tRNA são necessárias proteínas adicionais para o termino bem sucedido de cada fase. INICIAÇÃO Colocar o 1⁰ aa acil-tRNA no sitio P do ribossomo, e assim, estabelecer a correta matriz de leitura do mRNA Na maioria dos procariontes e em TODOS os eucariontes o primeiro aa em qualquer polipeptideo é uma metionina (codón AUG). Ela é inserida por um tRNA iniciador representado por tRNA Met INICIAÇÃO Como a célula sabe que essa metionina é a primeira do gene e não outra metionina que esta no meio dele????? Os mRNA tanto de procariontes quanto eucariontes possuem região 5` não traduzida (5’UTR) que consiste entre o ponto de inicio da transcrição e o ponto de inicio da tradução 5’UTR 3’UTR +1 AUG Inicio da Transcrição Inicio da Tradução mRNA SHINE DALGARMO Procariontes: o códon de inicio é precedido por seqüências especiais chamadas de seqüências Shine- Dalgarmo que fazem par com a ponta 3’ de um RNAr (rRNA 16S), na subunidade ribossomal 30S. Este pareamento posiciona corretamente o códon de inicio no sitio P onde o tRNA iniciador ira se ligar rRNA desempenha a função importante de garantir que o ribossomo esteja no lugar correto para começar a tradução. 3 proteínas ( IF1, IF2, IF3) são necessárias . IF3 encarregada de manter a sub > e < dissociadas e as outras duas atuam para garantir que apenas o tRNA iniciador entre no sitio P Sub 30S, mRNA, e o tRNA iniciador constituem o “complexo de Sub 30S, mRNA, e o tRNA iniciador constituem o “complexo de iniciação” Logo associa se a subunidade maior e se liberam os fatores de transcrição. Nos procariontes a tradução é junto com a transcrição Em Eucariontes a transcrição e tradução são em compartimentos separados. Cada aa é adicionada à cadeia crescente de polipeptideos, enquanto o tRNA desacilado, e reciclado pela adição de outro aa. O alongamento começa com um tRNA iniciador e sua metionina ligada no sitio P, e com o sitio A pronto para aceitar um complexo ternário (tRNA-aa- proteina) correspondente com o códon estabelecido no mRNA. ALONGAMENTO estabelecido no mRNA. Forma-se a ligação peptídica entre os dois aa e os dois tRNA dos sítios P e A são mudados para os sítios E e P respectivamente O RNAmmove-se ao longo do cromossoma e assim o códon seguinte é posicionado no sitio A, que esta aberto para aceitar outro complexo ternário seguinte. O ciclo continua ate o códon no sitio A ser um stop códon . Nenhum tRNA reconhece estes três códon, são reconhecidos por proteínas chamadas de fatores de liberação Uma molécula de água entra no centro do sitio P e leva à liberação do polipeptídeo do tRNA no sitio P. TÉRMINO do polipeptídeo do tRNA no sitio P. As subunidades ribossômicas se separam e a subunidade 30 S esta pronta para reiniciar outro complexo de iniciação. Quando liberadas do ribossomo as proteínas recém sintetizadas precisam se dobrar corretamente e alguns aa de algumas proteínas precisam ser quimicamente modificados Dobramento e modificação da proteínaacontecem após a sínteses delas , chamam-se de eventos pos- traducionais.
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