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1 Aula 3: Relação entre microrganismos e ambiente - uma questão de saúde pública Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Importância sanitária de microrganismos Importância sanitária dos microrganismos Microbiologia do solo: formação do solo, microrganismos, funções, equilíbrio biológico, rizosfera, ciclos (carbono, nitrogênio, fósforo, enxofre e metais) Padrões de qualidade. Microbiologia da água: indicadores de qualidade. Potencial tecnológico dos microrganismos: bioindicadores e biorremediadores Ação sobre xenobióticos, aplicabiblidade de microrganismos industriais. 2 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia do solo Ciclos biogeoquímicos Ciclos do Carbono e do Oxigênio Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia do solo Ciclos biogeoquímicos Ciclos do Carbono e do Oxigênio 3 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia do solo Ciclos biogeoquímicos Ciclos do Carbono e do Oxigênio Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia do solo Ciclos biogeoquímicos Ciclo do Nitrogênio 1 2 3 Fixação: N2 →→→→ Nitrificação: amônia →→→→ nitrato amônia nitrato Desnitrificação: nitrato →→→→ N2 Atmosfera (fecha o ciclo) aproveitáveis pelos seres vivos. 4 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia do solo Ciclos biogeoquímicos Ciclo do Nitrogênio Sistema radicular de soja com bactérias fixadoras de N. As bactérias são as as bolinhas que aparecem na raiz. http://www.ufmt.br/ufmtciencia/en-us/todas-noticias/66- ciencias-biologicas/154-ajuda-microscopica Relação mutualista entre plantas e bactérias Gram- negativas chamadas, de modo geral de rizóbios. Espécies: Rhizobium, Bradyrhizobium, Azorhizobium, etc Essas associações formam nódulos radiculares que fixam o nitrogênio, levando ao aumento do nitrogênio no solo, elevando a produção agrícola. Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia do solo Ciclos biogeoquímicos Ciclo do Nitrogênio https://pt.khanacademy.org/science/biology/ecology/biogeochemical-cycles/a/the-nitrogen-cycle 5 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia do solo Ciclos biogeoquímicos Ciclo do Nitrogênio Formação dos nódulos radiculares por bactérias fixadoras de nitrogênio Rhizobium e Bradyrhizobium em leguminosas. Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia do solo Ciclos biogeoquímicos Ciclo do Nitrogênio Ação de bactérias dos gêneros Nitrosomonas e Nitrobacter. É a oxidação da amônia em nitratos com a formação intermediária de nitritos. Processo de redução de nitrato 6 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia do solo Ciclos biogeoquímicos Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: indicadores de qualidade Padrões de qualidade Contaminação da água: pode ser detectada por meio de análises microbiológicas, mas algumas vezes é possível visualizar a olho nu como no caso da “maré vermelha”. Tratamento de água: usado para produzir uma água livre de microrganismos patogênicos. Maré vermelha Ocorre devido à reprodução intensa de algas em decorrência de grande disponibilidade de nutrientes provenientes de esgotos ou outras fontes poluentes. 7 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: indicadores de qualidade Padrões de qualidade Tratamento de água: usado para produzir uma água livre de microrganismos patogênicos. Tortora, 2012 (químico) Partículas se depositam no fundo (Areia fina ou carvão) ANTES DA DISTRIBUIÇÃO: Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Padrões de qualidade Tratamento de águas residuais (esgoto): Água de uso caseiro Água da chuva Resíduos industriais Esgoto lavagem e sanitário bueiros Etapas do tratamento do esgoto: 1. Tratamento primário 2. Tratamento secundário 3. Tratamento terciário – nem sempre empregados. São tratamentos são químicos e físicos principalmente. Alguns tratamentos usam bactérias desnitrificantes para produzir gás nitrogênio volátil. 4. Desinfeção - cloração 8 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Tratamento primário: Remoção de areia, óleo e trituração de restos. Tratamento secundário: Remoção da matéria orgânica e redução da DBO*. Aeração para crescimento de bactérias aeróbias que oxidam a matéria orgânica. Métodos: - Lodo ativado: possui bactérias que metabolizam a matéria orgânica. Os flocos formados de M.O. e bactérias são transferidos para o tanque de decantação. - Filtros biológicos: esgoto espalhado no leito de pedra ou plástico pré-moldado. Formação de biofilme nessas superfícies. O ar penetra e as bactérias oxidam a M.O. *DBO (Demanda Bioquímica de oxigênio) Tortora, 2012 (matéria sólida restante) Bactérias anaeróbias produtoras de metano: produção de subst. solúveis e gases Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Tortora, 2012 (matéria sólida restante) Bactérias anaeróbias produtoras de metano: produção de subst. solúveis e gases 9 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Qualidade da água Falhas na qualidade da água podem comprometer a saúde da população, causando doenças infecciosas. Por isso, métodos de monitoramento, tratamento e remediação da água são importantes. Microrganismos são utilizados para identificar, remover e degradar poluentes presentes na água. Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Qualidade da água A Portaria nº 2.914/2011 do Ministério da Saúde (Portaria de Potabilidade) Água para consumo humano: deve ser ausente de coliformes totais e Escherichia coli; a contagem de bactérias heterotróficas deve ser realizada. Sistema de distribuição (reservatório e rede): deve ser realizada a contagem de bactérias heterotróficas em 20% das amostras mensais, não devendo exceder 500 UFC/mL de amostra. 10 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Qualidade da água A Portaria nº 2.914/2011 do Ministério da Saúde (Portaria de Potabilidade) Definições: Água para consumo humano: água potável destinada à ingestão, preparação e produção de alimentos e à higiene pessoal, independentemente da sua origem. Água potável: água que atenda ao padrão de potabilidade estabelecido nesta Portaria e que não ofereça riscos à saúde. Água tratada: água submetida a processos físicos, químicos ou combinação destes, visando atenderao padrão de potabilidade. http://bvsms.saude.gov.br/bvs/saudelegis/gm/2011/prt2914_12_12_2011.html Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: indicadores de qualidade Padrão de Potabilidade da água http://bvsms.saude.gov.br/bvs/saudelegis/gm/2017/prc0005_03_10_2017.html 11 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Padrão de Potabilidade da água Água tratada na saída do tratamento Água tratada no sistema de distribuição Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Organismos indicadores Devem estar presentes nas fezes humanas em números suficientes, demonstrando que resíduos humanos foram introduzidos na água. Sua presença na água representa uma contaminação potencial por patógenos. Coliformes →→→→ normalmente presentes no intestino humano e de animais. São bactérias aeróbias ou anaeróbias facultativas, bacilos, Gram-negativas, não formadores de endósporos, fermentadores de lactose após 48h/36ºC. A maioria pertence aos gêneros Escherichia, Citrobacter, Klebsiella e Enterobacter, haja outros gêneros e espécies incluídos. Coliformes fecais→→→→ restringe-se aos membros que fermentam lactose com produção de gás a 44,5 ±0,2ºC em 24h. População bacteriana intestinal humana, cujo principal representante é Escherichia coli (exclusivamente fecal). A água consumida é tratada com cloro. No entanto, apesar desse produto ter ação contra coliformes, não é eficiente contra cistos de protozoários, vírus e esporos de fungos. 12 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Método da Membrana Filtrante Três diluições da amostra de água, cada uma com 5 tubos. Se existirem bactérias suficientes na amostra, haverá crescimento no tubo. Tabela do NMP. O nº de tubos positivos é anotado para cada grupo (5, 3, 1). Conforme a tabela, o índice de NMP é 110. O resultado representa que 95% das amostras de água que apresentaram esse resultado contêm entre 34 e 250 bactérias, com 110 sendo o nº mais provável. Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: indicadores de qualidade Método da Membrana Filtrante Uma membrana estéril é colocada em um aparato sobre o qual, posteriormente, é encaixado um frasco estéril. A água é colocada neste frasco e filtrada. Depois da filtração, a membrana é colocada em meios de cultura para a detecção do crescimento bacteriano. https://www.youtube.com/watch?v=sanBh460j_o 13 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Teste ONPG e MUG para coliformes O meio contém dois substratos: ONPG e MUG. Coliformes produzem a enzima que atua sobre o ONPG formando uma cor amarela (indica presença de coliformes). E. coli é a única entre os coliformes que produz a enzima que atua sobre o MUG, formando uma substância fluorescente com brilho azul quando iluminado com luz UV. Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Doenças veiculadas pela Água www.funasa.gov.br/site/wp-content/files.../manual_pratico_de_analise_de_agua_2.pdf 14 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Doenças veiculadas pela água Amostra de fezes tipo “água de arroz” de paciente portador de cólera causada por Vibrio cholerae. Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água Cistos são resistentes ao cloro e à radiação UV Doenças veiculadas pela água Giardíase 15 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Microbiologia da água: qualidade da água resistentes ao cloro e à radiação UV Doenças veiculadas pela água Criptosporidiose Oocistos de Crytosporidium parvum http://ludbioscience.blogspot.com/2015/07/doencas-de-veiculacao- hidrica-parte-ii_1.html Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Potencial tecnológico dos microrganismos Biorremediação Consiste na degradação, transformação e/ou remoção de contaminantes de um ambiente, como água ou solo. Ocorre pela ação de bactérias, fungos e plantas, onde os processos metabólicos destes organismos são capazes de utilizar estes contaminantes como fonte de carbono e energia. Pode ser aplicado em águas superficiais, águas subterrâneas, solos e resíduos industriais, aterros e áreas de contenção. 16 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Potencial tecnológico dos microrganismos Biorremediação Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Potencial tecnológico dos microrganismos Biorremediação www2.ifrn.edu.br/ojs/index.php/HOLOS/article/download/4278/1594 17 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Potencial tecnológico dos microrganismos Biorremediação http://agencia.fapesp.br/bacterias-ajudam-a-tratar-agua- utilizada-por-refinarias-de-petroleo/20227/ Microrganismos identificados por pesquisadores são capazes de eliminar contaminantes tóxicos presentes em efluente industrial; resultados do estudo foram apresentados no encontro Brazil-UK Frontiers of Engineering. Os cientistas identificaram duas bactérias – a Achromobacter sp. e a Pandoraea sp. – capazes de reduzir a concentração de contaminação da “água ácida” para níveis aceitáveis e permitir lançá-la no ambiente ou reutilizá-la em processos industriais nas refinarias. Microrganismos identificados por pesquisadores são capazes de eliminar contaminantes tóxicos presentes em efluente industrial; resultados do estudo foram apresentados no encontro Brazil-UK Frontiers of Engineering. Os cientistas identificaram duas bactérias – a Achromobacter sp. e a Pandoraea sp. – capazes de reduzir a concentração de contaminação da “água ácida” para níveis aceitáveis e permitir lançá-la no ambiente ou reutilizá-la em processos industriais nas refinarias. Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Biossensores são bactérias usadas para detectar poluentes ativos com baixo custo na ausência de substâncias químicas ou equipamentos caros. Amostras de solo e água são colocados no meio de cultura contendo uma bactéria que emite luz no escuro quando detecta um poluente. Potencial tecnológico dos microrganismos 18 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Aplicabilidade de microrganismos industriais Uso de microrganismos na Biotecnologia Insulina sintética No passado, a insulina aplicada aos diabéticos era extraída do pâncreas ou da urina de porcos. Hoje, é possível criar esse hormônio pela tecnologia do DNA recombinante, inserindo-se o gene no plasmídeo de E. coli. Essa técnica foi um dos primeiros processos biotecnológicos do mundo. Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Aplicabilidade demicrorganismos industriais Uso de microrganismos na Biotecnologia Somatotrofina recombinante (hormônio do crescimento) Após o isolamento do RNAm, é produzido o DNAc (complementar). A somatotrofina recombinante é utilizada: • Na indústria alimentícia para estimular a produção de leite • Para tratamento de distúrbios no crescimento humano (modificação para evitar o estímulo da prolactina e a lactação) O RNAm da somatotropina bovina é obtido do animal e convertido em DNAc pela transcriptase reversa. O DNAc é clonado em um vetor de expressão bacteriano que possui um promotor e um sítio de ligação de ribossomo (SLR). E. coli sofre transformação e a somatotropina recombinante (rBST) é produzida. 19 Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Aplicabilidade de microrganismos industriais Uso de microrganismos na Biotecnologia Vacina recombinante contra a hepatite B (primeira aprovada para uso humano – produzida em leveduras (para sanar o problema da glicosilação pós-traducional). Microbiologia Aplicada AULA 3: REALAÇÃO ENTRE MICRORGANISMOS E AMBIENTE – UMA QUESTÃO DE SAÚDE PÚBLICA Aplicabilidade de microrganismos industriais Uso de microrganismos na Biotecnologia Terapia gênica consiste no uso de engenharia genética para o tratamento de doenças genéticas humanas e para o ataque de células cancerosas. Terapia gênica de substituição: a função do gene não funcional é substituída por um gene funcional. Inserção do gene selvagem terapêutico em outro local do genoma, corrigindo o distúrbio. Ex. Imunodeficiência combinada severa causada pela ausência de adenosina desaminase (ADA) em células de medula óssea resulta em sistema imune deficiente. Terapia gênica: remoção de células T do paciente e introdução de retrovírus (vetor) contendo o gene selvagem e reintrodução das células no organismo.
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