Citoquímica e Imunocitoquímica

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Biologia e Embriologia – 02/04/2019 
Métodos de detecção (Muita usado para a área humana, médica, in vitro)
- Citoquímica ( reconhecimento de reações químicas produzidas na própria célula - reação in vitro – analisa principalmente carboidratos, proteínas ou ácidos nucléicos)
Inmunocitoquímica (reconhecimento de proteínas)
 Utiliza-se procedimentos para identificar e localizar proteínas e outros tipos de moléculas dentro da célula. 
Deve-se observar a citoquímica e para isso utiliza-se a microscopia óptica (produto deve ser corado) ou eletrônica (produto deve dispersar elétrons) 
Na citoquímica podemos trabalhar de forma qualitativa (observação da reação - utilizando a microscopia para visualização) ou de forma quantitativa (quanto da reação ocorreu – utiliza-se o histofotômetro ou citofotômetro, que determina a intensidade da cor produzida, quanto mais quantidade mais cor). Exemplo: reação de feulgen e fluorescência (produto seja da cor do corante fluorescente) 
Imunocitoquímica (principal objetivo: reconhecimento da molécula) 
Baseada na reação natural que ocorre no organismo (Reação antígeno/anticorpo). 
Antígeno: algo que o organismo não produz (o que queremos conhecer/localizar) 
Anticorpo: reconhece para combater 
Então a reação antígeno/anticorpo é uma reação de reconhecimento. Permitem o estudo da localização de proteínas específicas (deve-se saber o que se busca).
Radioautografia (trabalha-se com material radioativos, mas em pequenas quatidades)
Estuda os lugares de síntese (onde ela é produzida) e o destino (caminho dela na célula) de macromoléculas. 
Utiliza-se ela mais em moléculas com carga (Exemplo: proteínas) 
Elementos mais usados: H3, C14, S35, P32 etc
Utiliza-se a microscopia para ver se a reação ocorreu 
Se baseia na sensibilidade das emulsões fotográficas ás radiações ionizantes 
Monômero* célula macromolécula* usada na célula 
Métodos de separação (trabalha-se com material isolado)
Técnica que faz a separação de regiões da célula ou moléculas específicas 
Fracionamento celular (separação das estruturas celulares, separação e purificação com base nas propriedades físicas, destruição das membranas celulares por processos mecânicos ou químicos, seguido pela separação das frações molares de acordo com suas respectivas massas) p/ cromo ou eletro
Cromatografia (separação de moléculas isoladas, separação de proteínas, DNA e RNA)
Eletroforese (separação de moléculas isoladas, identificação de organismos-teste de paternidade- tamanho de moléculas protéicas, ácidos nucléicos e carboidratos, método que é dado pelo tamanho das moléculas)
Constituição química celular
Células: biomoléculas, água (o que mais tem), sais minerais etc. 
Biomoléculas: proteínas, carboidratos, lipídios, ácidos nucléicos, vitaminas, aminoácidos, ácidos graxos, nucleotídeos. 
Biopolímeros: Macromoléculas, altas massas moleculares, constituídos por monômeros iguais ou diferentes. Exemplo: Amido
Homopolímeros (função energética, feitos de unidades iguais) Heteropolímeros (unidades diferentes)
Água (componente principal da célula, sem ela não tem nada)
Solvente universal
Polar (uma região positiva e outra negativa)
Ligações de hidrogênio (importantes para manter as moléculas de água coesas) 
Solubilidade das moléculas em água: hidratação das cargas e atenuação da interação entre elas 
Importância Biológica da água (permeia todas as porções de todas as células 
Serve de meio para:
Transporte de nutrientes 
Reações enzimáticas catalisadas por enzimas 
Transferência de energia química
Afinidade das biomoléculas com a água; 
Quantidade grupos polares (forma pontes de H com a água e se dissocia) e apolares (não se dissocia com a água), dependendo da maneira com que ela (molécula) se combina com a água ela vai ter funções diferentes no corpo. 
Moléculas hidrofílicas (interage com a água em grandes quantidades-carboidratos e proteínas), hidrofóbicas (não tem afinidade com a água, quantidade de grupos polares é pequena ou inexistente-colesterol, triacilgliceróis), anfipáticas (moléculas que tem regiões hidrofílicas e hidrofóbicas-proteínas transmembrana, fosfolipídios, pigmentos e vitaminas) 
Para a célula são importantes todos os tipos de interações.