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FACULDADE ESTÁCIO DE SÁ 3º SEMESTRE GRADUAÇÃO ENFERMAGEM RELATORIO DE AULAS PRATICAS (BASTONETES GRAM NEGATIVOS) SÃO JOSE, 2015 FACULDADE ESTÁCIO DE SÁ RELATORIO DE AULAS PRATICAS (BASTONETES GRAM NEGATIVOS) LUIZ CLAUDIO FERNANDES TANIA LETICIA S. DA LUZ RICARDO PORTO São José, 2015 SUMÁRIO 1 Introdução A família Enterobacteriaceae constitui o maior heterogêneo conjunto de bastonetes gram-negativos importantes. As enterobacterias são organismos que se encontram em todas os lugares ao mesmo tempo como no solo, na água e na vegetação, e são parte da microbiotica intestinal da maioria dos animais, incluindo humanos. Estas bactérias causam diversas doenças humanas, um importante fator na contaminação é o grau de higiene pessoal. Este fator pode ser determinante e influenciar a transmissão de bactérias patogênicas. Neste experimento coletamos e semeamos amostras bacterians coolhidas nos tecidos abaixo das unhas, com intuito de cultivar coliformes fecais. A Escherichia Coli (E. Coli) é um grupo de bactérias que habitam normalmente no intestino humano e de alguns animais, e por isso a presença desta bactéria na água ou nos alimentos se deve à contaminação com fezes. As bactérias E.Coli presentes no intestino humano não causam problemas de saúde, mas quando outros tipos desta bactéria entram no organismo, elas podem causar doenças como a gastroenterite e infecção urinária. 2 Objetivo Coletar, isolar e cultivar coliformes fecais no tecido abaixo da unha. 3 Material 1 tubo de ensaio com água destilada estéril 1 tubo de ensaio com caldo BHI (Brain Heart Infusion) 1 swab estéril Estufa bacteriológica a 37ºc Bico de Bunsen Fósforo Placa de Petry com Agar MacConkey Alça de platina Lamina de microscopia Palito de dente esterelizado Microscópio Oleo de imersão Coloração Gram: 1º cristal violeta 2º lugol 3º álcool acetona 4ºfucsina 4 Local da Coleta Tecido abaixo da unha ( sub-ungueais). 5 Método * Assepticamente foi aberto o tubos onde se encontravam os palitos de dentes estéreis; * Foi coletado o material passando o palito abaixo das unhas; * Foi introduzido o palito no tubo com caldo nutriente (BHI) e incubado por 18 a 24hrs em estufa a 37oC * Todo o trabalho foi realizado dentro das normas de assepsia ao redor do bico de Bunsen; * A coleta foi realizada através do dedo polegar abaixo da unha * Foi realizado a assepsia das mãos antes da coleta do material * A placa foi encubada a 37º por 18 às 24H * A alça de platina foi esterilizada por método de flanbagem e resfriada na água destilada estéril. *Posteriormente observou-se as características das colônias que cresceram no Agar MacConkey * Não houve crescimento na placa Agar MacConkey * Coletou-se bastonetes das fezes de cachorro *Com a alça de platina bacteriológica devidamente esterilizada, coletou-se amostras de bactéria *Sobre a lâmina de vidro, colocou-se uma gota de água destilada estéril. Com a alça de platina bacteriológica foi tocada levemente na superfície da e o material foi colocado sobre a gota de água destilada. *Passou-se o esfregaço na chama do bico de Bunsen três vezes a fim de fixar o material. *Posteriormente cobriu-se o esfregaço seco com violeta de genciana (cristal violeta) e deixado por um minuto. *Lavou-se com água corrente. *Cobriu a lamina com solução de lugol e deixado por um minuto. * Lavou-se com água corrente *Pingou-se gotas de Álcool-acetona deixado por cinco segundos. *Lavou-se com água corrente. *Cobriu-se a lâmina com solução de fucsina e deixado por trinta segundos. *Lavou-se a lâmina e a cobriu com papel toalha para a secagem da lâmina. *Em seguida examinou-se ao microscópio com a objetiva de 100X com óleo de imersão. 6 - Resultados Não houve crescimento na placa de Petry com Agar MacConkey provavelmente porque as bactérias crescida no caldo BHI eram em sua maioria Gram positivos, e o Agar MacConkey é seletivo para bactérias Gram negativos . Coleto-se então bastonetes de outra placa com fezes de cachorro, nesta houve crescimento de bastonetes Gram negativo como se observou no microscópio. 7 – Conclusão As bactérias gram-negativas estão amplamente distribuídas no meio em que vivemos e em nosso organismo, são causa crescente de infecções sérias. Referencias Bibliográficas: TRABULSI,L.R .; ALTERTHUM,F. ; GOMPERTZ,O.F. ; CANDEIAS,J.A.N. , Microbiologia. Ed. Atheneu, São Paulo, 2002
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