Microscopia e coloração de bactérias

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MICROSCOPIA E COLORAÇÃO 
 
de bacterias 
INTRODUÇÃO 
As bactérias podem ser observadas COM ou 
SEM coloração; 
✓ SEM coloração: 
▪ Observadas vivas 
▪ Utilizadas para visualização de mobilidade 
e morfologia, divisão e formação de 
esporos. 
 
✓ COM coloração: 
▪ Bact. são mortas pelas interações 
químicas 
▪ Células mais visíveis 
▪ Diferencia pela afinidade distinta aos 
corantes 
As técnicas de coloração permitem distinguir 
as bactérias quanto: Morfologia e 
características tintoriais. 
ESTRUTURA 
a) Morfologia: tamanho, forma e arranjo 
▪ Tamanho: as de maior interesse medem 
0,5um – 2,5um 
▪ Forma: 
Cocos: esféricas, ovais 
Bacilos: bastão, bastonete 
Espiral. 
▪ Arranjos: 
Pares: diplococos 
Cadeias: Estrepto. 
Tetrades: cúbicos 
Sarcina: cubo 
Cachos: Estafilos. 
 
b) Características tintoriais 
▪ Bactérias podem adquirir a coloração, 
sendo possível diferenciar grandes 
grupos. 
TÉCNICAS 
As técnicas para visualização na microscopia 
mais utilizadas são: 
1) Direto sem coloração: 
Salina 
Hidróxido de potássio 
Exame em campo escuro 
Tinta da China 
MICROSCOPIA E COLORAÇÃO 
 
de bacterias 
2) Coloração 
a) Simples: utiliza apenas um corante. 
▪ Azul de metileno 
▪ Cristal violeta 
▪ Carbofucsina 
b) Diferenciais: utiliza mais de um corante, 
além de mordente e diferenciador 
Baseia-se na diferença química existente 
nas estruturas; 
Pode separar grupos microbianos e 
permitir a visualização de estruturas 
celulares 
✓ Separam grupos microbianos: 
▪ Gram 
▪ Ziehl-Neelsen 
 
✓ Visualizam estruturas: 
▪ Coloração de flagelos 
▪ Esporos 
▪ Cápsula 
COLORAÇÃO DE GRAM 
Classifica bactérias com base no tamanho, 
morfologia e comportamento diante dos 
corantes. Baseia-se na capacidade das 
paredes celulares de reterem o corante 
cristal violeta (CV), durante tratamento com 
etanol. 
Classifica as bactérias em Gram positivas e 
Gram negativas 
REAGENTES DE GRAM 
1) Cristal violeta: Corante primário, cora as 
células com cor purpura; inicialmente cora 
todas as bactérias. 
2) Lugol: mordente: fixa o corante primário à 
célula formando um complexo insolúvel. 
3) Etanol: descolorante, dissolve porção 
lipídica de Gram – removendo o CV. 
4) Fucsina (Safranina): contra corante, cora 
as estruturas que foram descoradas 
 
 
 
Gram positivas: coram-se em ROXO 
Gram negativas: coram-se em ROSA