Extração do DNA da Mucosa Bucal

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FACULDADE DE TECNOLOGIA E CIÊNCIAS – FTC 
 BACHARELADO EM BIOMEDICINA 
TURMA – 4º SEMESTRE 
 
 
 
 
 
ADRIELE SOUZA SANTOS 
ANGELA DO LAGO DAMASCENO 
LUCIANA PEREIRA SANTANA 
RENATA MIRELA BARRETO GARCIA 
 
 
 
EXTRAÇÃO DE DNA DA MUCOSA BUCAL 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
JEQUIÉ-BA 
 
SETEMBRO/2019 
 
 
ADRIELE SOUZA SANTOS 
ANGELA DO LAGO DAMASCENO 
LUCIANA PEREIRA SANTANA 
RENATA MIRELA BARRETO GARCIA 
 
 
 
EXTRAÇÃO DE DNA DA MUCOSA BUCAL 
 
 
 
 
Atividade apresentada ao Curso de 
Biomedicina 2019.2 da I unidade, como 
forma de avaliar o potencial do estudante 
e para obtenção de nota parcial na 
disciplina Genética Molecular, sendo a 
mesma avaliada pela docente Luciana 
Araújo. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
JEQUIÉ-BA 
SETEMBRO/2019 
 
 
OBJETIVO 
 
A atividade realizada no laboratório de microbiologia teve como objetivo a 
extração de DNA da mucosa bucal, a fim de observar o material genético que 
quando em contato com o álcool sofre lise, deixando em pedaços o material 
genético. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
INTRODUÇÃO 
 
O DNA (Ácido Desoxirribonucleico) é uma molécula presente no núcleo das 
células de todos os seres vivos e que carrega toda a informação genética de um 
organismo. É formado por uma fita dupla em forma de espiral (dupla hélice), 
composta por nucleotídeos. Todos os organismos vivos armazenam todas as 
informações genéticas codificadas e contidas nos ácidos nucléicos (DNA, ácido 
dioxirribonucleico). A molécula de DNA é conhecida como a molécula da 
hereditariedade, pois dentro dela estão contidas todas as informações genéticas das 
quais o novo indivíduo necessita para ser formado. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
MATERIAL E MÉTODO 
 
▪ 1 copo descartável 
▪ 1 espátula de madeira 
▪ 15 ml de solução de sacarose a 3% (1 colher de chá de açúcar em 100 ml de 
água). 
▪ Tubo de ensaio 
▪ Etanol absoluto gelado 
▪ Banho-maria a 60 °C 
▪ Estantes para tubos de ensaio 
▪ Caixa de isopor com gelo 
▪ 1 ml detergente neutro diluído a 25% (1:4) 
▪ NaCl (sal de cozinha) 
 
Extração do DNA - foi realizado uma raspagem na mucosa bucal e logo após 
foram colocadas a solução sem o detergente na boca e foram feitos bochechos por 
cerca de 30 segundos. Em seguida foi derramado o bochecho em um copo 
descartável, seguidamente mergulhando a espátula usada na raspagem da mucosa. 
Foram adicionados 500 μl (microlitro) de detergente neutro diluído a 255 e 
homogeneizar cuidadosamente, aquecendo no banho-maria a 60 °C por 10 minutos 
e resfriando dentro da caixa de isopor de gelo 5 minutos. E pra terminar, adicionar 
álcool gelado, pelas bodas do tubo lentamente, até alcançar pelo menos 1 cm de 
espessura. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
RESULTADOS E DISCUSSÃO 
 
 
O DNA constitui os genes de todos os seres vivos, ele é um polímero 
constituído por macromoléculas que carregam as informações necessárias para a 
síntese de proteínas. Consiste de dois filamentos paralelos de nucleotídeos que se 
enrolam um em torno do outro, formando uma dupla hélice que se ligaria por pontes 
de hidrogênio entre as bases. 
A saliva pode ser utilizada como fonte eficiente de DNA para inúmeras 
técnicas laboratoriais, esse material pode ser coletado de maneira indolor e 
não-invasiva. 
De acordo com os resultados obtidos, indicaram que o DNA foi extraído com 
sucesso, pois foi possível notar uma pequena quantidade de molécula de DNA 
suspensa na solução. Porém não foi possível ver a dupla hélice, pois essa 
visualização requer aparelhos sofisticados, portanto o que se observa são milhares 
de fitas de DNA juntas. 
Ao adicionar o sal (NaCl) na solução, ele bloqueia a eletronegatividade do 
esqueleto fosfato-açúcar e favorece a aglomeração das moléculas de DNA, portanto 
o sal possibilitou a precipitação dos ácidos nucleicos em solução alcoólica. 
Na adição de detergente há uma desestruturação nas moléculas de lipídeos 
presentes nas membranas celulares. Com a ruptura das membranas o conteúdo 
celular, incluindo as proteínas e o DNA, soltam-se e dispersam-se na solução. A 
função de algumas dessas proteínas é manter o DNA enrolado num espiral. 
Ao aquecer a solução em banho-maria, a temperatura elevada (60°C) inativa 
as DNAses (enzimas que degradam o DNA) e auxilia a dissolução da membrana 
celular. 
Quando ocorre a adição de álcool gelado, percebe-se uma melhor 
 
visualização das moléculas de DNA. Isso é possível, pois o DNA é insolúvel em 
etanol (álcool etílico), quando as moléculas são insolúveis em um dado solvente, 
elas se agrupam, tornando-se visíveis. Quanto mais gelado estiver o álcool, menos 
solúvel o DNA vai estar ocorrendo uma leve precipitação. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ANEXOS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
REFERÊNCIAS 
 
 
DE ROBERTIS, E. M. F. & HIB, J. ​Bases da Biologia Celular e Molecular​. Rio de 
Janeiro: Guanabara-Koogan, 3. ed., 2001. 
JUNQUEIRA, L. C. & CARNEIRO, J ​. Biologia CELULAR e Molecular​. Rio de 
Janeiro: Guanabara-Koogan, 7. ed., 2000. 
GRIFFITHS, A. J. F., et al. 2006​. Introdução a Genética​. Rio de Janeiro, ed. 
Guanabara Koogan, 8 ed., 2006.