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UNIVERSIDADE NILTON LINS BIOMEDICINA Biologia Molecular EXTRAÇÃO DE DNA DA BANANA Karen Soares Lima Rominia Cardoso Ribeiro Manaus, 2019 Karen Soares Lima Rominia Cardoso Ribeiro EXTRAÇÃO DE DNA DA BANANA Relatório apresentado na disciplina de Hematologia Básica ministrado pela Profª Marilda Assunção de Oliveira, para obtenção de nota parcial. Manaus, 2019 Introdução O primeiro relato sobre isolamento de DNA data de 1869 e foi realizado por Friedrich Miescher, a partir de leucócitos presentes em pus. Miescher lisou estas células com uma solução alcalina e precipitou o material nuclear com solução salina. Este material nuclear que posteriormente seria conhecido como DNA, foi chamado de nucleína. Basicamente, o processo de extração de DNA consiste em duas etapas. A primeira etapa é a extração propriamente dita e consiste no rompimento das membranas celulares (e consequente exteriorização do DNA). A segunda fase consiste na purificação do DNA em solução, ou seja, “retirada” dos outros componentes celulares da solução (restos de membrana, proteínas, RNA). A extração dos ácidos nucleicos (DNA E RNA) é o primeiro passo para a realização da maioria das metodologias da biologia molecular. Pode-se obter DNA a partir de inúmeros tipos de tecidos e células, e existe uma infinidade de protocolos para realização de tal procedimento. Graças ao estudo do DNA pode-se conhecer várias doenças que possuem o risco de aparecer, como; descobrir o autor de um crime; identificar restos humanos; verificar a paternidade etc. Objetivo Extrair e isolar DNA da banana para visualização a olho nu. Observar a sua estrutura do DNA através do microscópio. Analisar a importância da molécula do DNA para os seres vivos. Materiais e Métodos Materiais 1 Saco plástico tipo zip loc; 1 Banana; 1 Béquer; 1 Tubo de ensaio; 1 Bastão de vidro; 1 Papel de filtro ou gases; 1 Conta gotas ou pipeta; 1 Erlenmeyer; Álcool etílico gelado; Água mineral e; 10 ml de solução extratora de DNA (50 ml de detergente líquido, duas colheres de sal e 900 ml de água em um copo). Métodos Em um saco plástico zip lic foi macerada uma banana até formar uma pasta homogênea; Em um Erlenmeyer foi preparado a solução extratora de DNA (50 ml de detergente líquido, duas colheres de sal e 900 ml de água); Misturou a banana macerada com a solução extratora de DNA até ficar uniforme; Em um béquer foi passado pelos gases a mistura para tirar os pedaços de banana; Foi despejado no tubo de ensaio o líquido e acrescentamos álcool etílico. Aguardamos cerca de 3 minutos para o DNA começar a precipitar na interfase. Foi usado um bastão de vidro para enrolar as moléculas de DNA e colocar na lâmina. Na lâmina é acrescentado óleo de imersão e lamínula e levada ao microscópio, sendo observada com objetiva 40x. Resultados e Discussão A partir da maceração ocorre a primeira quebra das células e um aumento da solução “lise”, cuja sua função é romper as membranas celulares e membranas nucleares que libertará as moléculas de DNA que estavam localizadas no interior do núcleo. O sal proporciona um ambiente favorável. O detergente tem como função de desestruturar as moléculas de lipídeos das membranas biológicas. O álcool desidrata o DNA não fica mais dissolvido no meio aquoso. Com isso foi possível observar filamentos de DNA, ou seja, uma massa com aspecto de nuvens, fase alcoólica e pôr fim a fase aquosa. ANEXO Considerações finais Podemos observar neste trabalho que a extração do DNA da banana não é possível ver a dupla hélice pois o DNA é formado por moléculas muito longas e que é necessária uma microscopia eletrônica. Conclusão Concluímos que essa prática nos permitiu através de substâncias usadas como os agentes físicos e químicos, permitindo que no final da prática conseguíssemos ver o DNA da banana, através da lise da membrana, a precipitação salina e o isolamento do DNA. Com essa pratica, podemos concluir com êxito a existência do DNA da fruta. Referências FRANCIELE. P. Extração de DNA da banana. Salvador.2014. Disponível em:< https://www.docsity.com/pt/extracao-de-dna-da-banana>. Acesso em: 31 de agosto de 2019. JOÃO. G. LUCIANA. A. Protocolos de biologia molecular aplicada à produção animal. 2015.Disponível em:< https://ainfo.cnptia.embrapa.br/.pdf>. Acesso em: 31 de agosto de 2019. PAULA. L. Atividade prática para extração do DNA. 2017. Disponível em:< https://educador.brasilescola.uol.com.br/estrategias-ensino/atividade-pratica-para-extracao-dna.htm>. Acesso em: 31 de agosto de 2019.