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Prática – Aminoácidos Título: Identificação de Aminoácidos – reação da Ninhidrina Objetivo: Identificar a presença de aminoácidos ou de pequenos peptídeos em solução. Procedimento: Em 4 tubos de ensaio marcados (A), (Pro), (PTN) e (B), adicionar: • nos quatro tubos = 1,0 mL da solução de ninhidrina • adicionar as substâncias indicadas no quadro abaixo (alanina, prolina, proteína e soro fisiológico, cada uma destas em um dos tubos de ensaio). • Colocar os tubos em banho fervente durante 5 minutos ou até atingir a coloração esperada. • Compare os tubos e anote os resultados. A 1,0 mL ninhidrina 1,0 mL sol. Alanina ou Glicina Pro 1,0 mL ninhidrina 1,0 mL solução Prolina PTN 1,0 mL ninhidrina 1,0 mL solução de Proteína B 1,0 mL ninhidrina 1,0 mL solução fisiológica Fundamentação teórica: Teste com ninhidrina - Todos os aminoácidos que contêm o grupo -amino livre reagem com a ninhidrina, produzindo substâncias de coloração azul-violácea. A prolina e a hidroxiprolina, que possuem o grupo -amino substituído, fornecem derivados de cor amarela característica. O O O R H NH 2 CO 2 H O O N H R CO 2 H O O NH 2 O O N O O O O O _ RCHO + _ H 2 O _ CO 2 + (azul violáceo) _ H 2 O Como a intensidade da coloração do complexo formado é proporcional à concentração de aminoácidos ou peptídeos pequenos, esta reação é freqüentemente utilizada para determinação quantitativa de aminoácidos em solução. Universidade Estácio de Sá Graduação: Área de Saúde Disciplina: Bioquímica Prof: Roteiro de Atividade Prática – Laboratório de Bioquímica Ninhidrina
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