Ciências da saúde - Aminoácios, Proteínas e Reagentes Ninihdrina e Biureto

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Aminoácidos
Os aminoácidos são moléculas orgânicas - que servem como unidade fundamental na formação de proteínas - que possuem, pelo menos, um grupo amina - NH2 e um grupo carboxila - COOH em sua estrutura.
Existem muitos tipos de aminoácidos, mas apenas vinte aparecem no código genético, os quais chamamos de principais e alguns especiais que só aparecem em algumas proteínas. Dos vinte principais que formam as proteínas, dividimos em grupos:
Aminoácidos não essenciais
- São os que nós humanos conseguimos sintetizar em nosso organismo;
Aminoácidos essenciais
- São aqueles que não produzimos, sendo necessária a ingestão de determinados alimentos.
Os aminoácidos podem ainda sofrer outras divisões, segundo o “R” de cada um deles:
- Aminoácidos apolares: o grupo “R” é uma cadeia lateral apolar, ou seja, são hidrofóbicos. É o caso da alanina, leucina, valina, cisteína, glicina, prolina, isoleucina, metionanina, triptofano e fenilalanina.
- Aminoácidos polares neutros: o grupo “R” é uma cadeia lateral polar sem carga elétrica, ou seja, neutra. São hidrofílicos e geralmente contêm hidroxilias, sulfidrilas e aminas. São os: Glicina, Serina, Treonina, Cisteína, Tirosina, Asparagina e Glutamina.
- Aminoácidos polares ácidos: São hidrofílicos e o grupo “R” é uma cadeia lateral com carga negativa, normalmente possuem grupo carboxila, além daquela da estrutura geral. É o ácido glutâmico e ácido aspártico.
- Aminoácidos polares básicos: São hidrofílicos e o grupo “R” é uma cadeia lateral básica, carregada positivamente, possuem grupo amino. São eles: Histidina, lisina e arginina.
Proteínas
Ela é um polímero de aminoácidos que pode atuar como enzimas, catalisando reações químicas, podem transportar pequenas moléculas ou íons
Uma proteína é um grande polipeptídeo, ou seja, resíduos de aminoácidos estão ligados entre si covalentemente, chamamos de ligação peptídica. É a união entre o grupo carboxila de um aminoácido com o grupo amina de outro aminoácido, liberando água. Esta sequência de aminoácidos é única para cada proteína específica e é determinada pelo gene.
Dependendo da natureza dos aminoácidos que compõem o polipeptídeo, ela pode ter estruturas diferentes:
- Primária: Ao longo da cadeia polipeptídica os aminoácidos se apresentam de forma linear. Esta é a estrutura mais simples de uma proteína e é aquela determinada pelo gene.
- Secundária: Os aminoácidos estão ligados entre si covalentemente na estrutura primária, mas as moléculas podem sofrer rotações a partir do carbono alfa e a cadeia pode interagir com ela mesma de três formas: alfa-hélice (formam-se ligações de hidrogênio entre os aminoácidos); folhas-beta (as ligações de hidrogênio entre um aminoácido e outro gera uma estrutura folhear e rígida) e laços (formam-se fora do dobramento da proteína, não é uma estrutura regular no núcleo).
- Terciária: É a forma como o dobramento da estrutura secundária se organiza no espaço de forma tridimensional. Também é estabilizada por ligações de hidrogênio e dissulfeto, o que garante maior estabilidade à proteína.
- Quaternária: Esta é uma interação entre moléculas de proteínas, formando um complexo multi-proteico.
Se uma proteína perde sua estrutura, ela perde também sua função, porque estão relacionadas. Esse processo chamamos de desnaturação e ocorre em altas temperaturas, em grandes variações de PH, com alguns solventes orgânicos, etc. A quebra de uma molécula de proteína ocorre a partir da hidrólise das ligações peptídicas.
Ação dos reagentes ninihdrina e biureto
Colocou-se com o auxílio de uma pipeta 1 ml das seguintes substancias água destilada em tubos de ensaio.
Adicionou-se 5 gotas do Reagente de Ninhidrina 0,1%
Em seguida foi colocado pra aquecer por 3 minutos;
Observou- se as alterações, onde a ninhidrina que é um composto heterocíclico reagiu com a água destilada e produziu uma cor púrpura identificado aminoácidos de cadeia lateral.
Colocou-se com o auxílio de uma pipeta 1 ml das seguintes substancias água destilada em tubos de ensaio.
Adicionou-se 5 gotas do Reagente de biureto 0,1%
Em seguida foi colocado pra aquecer por 3 minutos;
Observou- se as alterações, onde o biureto é um reagente analítico, composto de Hidróxido de Sódio (NaOH 2,5N) e sulfato de cobre 1% (CuSO4), reagiu com a água destilada e produziu uma cor violeta que detecta a presença de ligações peptídicas, dando positiva para proteínas e peptídeos com três ou mais resíduos de aminoácidos.
Perguntas do roteiro
1 - O que houve com os fluidos contidos nos tubos de ensaio 1 e 2 após homogeneizar seus conteúdos? Justifique.
- Tubo 1 = a ninidrina fica de cor amarela porque há presença da prolina, um aminoácido com uma amina secundária (iminoácido).
- Tubo 2 = a ninidrina fica púrpura porque há presença do triptofano, um aminoácido com uma amina primária.
2 - O que houve com os fluidos contidos nos tubos de ensaio 1 e 2 após passarem alguns minutos no banho-maria? Justifique.
- A concentração de prolina e triptofano são baixas, então, após retiradas do banho maria não há alteração na cor dos experimentos.
3 - O que houve com os fluidos contidos nos tubos de ensaio 1, 2 e 3 após eles serem homogeneizados? Justifique.
- Tubo 1 = vai ficar violeta, pois a albumina é uma proteína, e o biureto marca a presença da mesma
-Tubo 2 = vai ficar azul pois nele há presença de água.
- Tubo 3 = ficará azul porque a prolina é um aminoácido.